Moderná diagnostika čierneho kašľa vám umožňuje rýchlo stanoviť správnu diagnózu a predpísať adekvátnu liečbu, ktorá môže výrazne zmierniť stav pacienta a vykonať včasné preventívne opatrenia, ktoré zabránia infekcii iných a kontaktných osôb. Analýza čierneho kašľa pomocou bakteriologickej výskumnej metódy je hlavnou metódou diagnostiky ochorenia.
Skúsenosti z mnohých štúdií však dokazujú, že pre presnú laboratórnu diagnostiku ochorenia je potrebné použiť viacero komplementárnych techník. Najúčinnejšou kombináciou je kombinácia bakteriologickej metódy a polymerázovej reťazovej reakcie (PCR).
Ryža. 1. Kŕčovitý záchvatovitý kašeľ je dominantným príznakom čierneho kašľa u detí.
Klinické metódy diagnostiky čierneho kašľa
Rozpoznanie čierneho kašľa v počiatočných štádiách vývoja ochorenia je veľmi ťažké, čo súvisí s niekoľkými faktormi:
Choroba sa vyvíja pomaly. Ku kulminácii dochádza 2–3 týždne po objavení sa prvých príznakov ochorenia.
Pri čiernom kašli chýba primárna toxikóza a výrazná teplotná reakcia na začiatku ochorenia, tak charakteristická pre mnohé detské infekčné choroby. Preto je laboratórna diagnostika často oneskorená.
U očkovaných detí a dospelých sa najčastejšie zaznamenávajú atypické formy ochorenia, pri ktorých sa mení charakteristika kašľa (nedochádza k záchvatom kŕčovitého kašľa ani k recidíve).
Kritériá na diagnostikovanie čierneho kašľa v prekonvulzívnom (katarálnom) období:
Kontakt s pacientmi, ktorí majú dlhotrvajúci kašeľ.
Pomalý vývoj ochorenia. Normálna alebo nízka telesná teplota. Stav pacienta je uspokojivý.
Absencia výrazných katarálnych javov.
Spočiatku kašeľ a potom pretrvávajúci suchý kašeľ, ktorý sa zmení na záchvatovitý kŕčovitý kašeľ, trvá 1 - 2 týždne.
Symptomatická liečba nemá žiadny účinok.
Chrastenie v pľúcach často nie je počuť. Vysoké hladiny bielych krviniek (leukocytóza) a lymfocytov (lymfocytóza) s normálnou rýchlosťou sedimentácie erytrocytov (ESR).
Detekcia patogénov čierneho kašľa v plodinách (Bordetella pertussis).
Ryža. 2. Fotografia ukazuje ružové baktérie Bordetella pertussis pod mikroskopom (Gramovo farbenie). Pertussis tyčinky sú krátke, kokosové, konce sú zaoblené, dĺžka je 0,5 - 2 mikróny, v náteroch sú umiestnené oddelene, menej často - v pároch.
Ryža. 3. Pohľad na baktérie čierneho kašľa v elektrónovom mikroskope.
Klasickou metódou na laboratórne potvrdenie ochorenia je izolácia patogénov čierneho kašľa z hlienu nosohltanu. Výsev patogénov zriedka dosahuje 80%. V priemere nepresahuje 10 - 30%. Dôvody sú:
Pomalý rast bacilov čierneho kašľa na živných médiách.
Nízka kvalita živných médií.
Neskoršie vyšetrenie pacienta.
Kontaminácia testovaného materiálu bakteriálnou flórou.
Chyby pri zbere testovacieho materiálu.
Užívanie antibiotík až do odberu materiálu na bakteriologické vyšetrenie.
Materiálom na bakteriologické vyšetrenie je ster z nosových priechodov (oboch) a zadnej steny nosohltanu (nie z hrtana!).
Na vykonanie náteru sa používa tampón Dacron alebo metóda náplasti proti kašľu.
Výsev sa vykonáva okamžite na živnom alebo transportnom médiu. Materiál sa skladuje v transportnom médiu najviac jeden deň. Predbežnú odpoveď dostanete do 3 až 5 dní. Konečná odpoveď je získaná za 5 - 7 dní.
Vyšetreniu sa podrobujú osoby podozrivé z ochorenia a osoby, ktorých kašeľ pretrváva dlhšie ako 7, ale nie viac ako 30 dní.
Ryža. 4. Na fotografii je kolónia Bordetella pertussis. Na kultiváciu sa používa médium Bordet-Gengou (foto vpravo) alebo kazeínovo-uhoľný agar (foto vľavo). Na týchto médiách dochádza k tvorbe kolónií 3–4 dni po zasiatí. Kolónie mikróbov sú lesklé, šedo-krémovej farby, vzhľadom pripomínajú kvapôčky ortuti a majú viskóznu konzistenciu. Po odstránení kolónií zo živného média zostane krémová stopa.
Ryža. 5. Pri prezeraní kolónií Bordetella pertussis pod svetelným mikroskopom môžete vidieť, ako kolónie vrhajú tieň (svetelný kužeľ).
Diagnostika čierneho kašľa pomocou PCR (polymerázová reťazová reakcia) je najsľubnejšou technikou v moderných podmienkach. Vysoká citlivosť testu umožňuje odhaliť DNA baktérií, aj keď sa ich v testovanom materiáli nachádza viacero.
Metóda stanovenia DNA Bordetella pertussis pomocou PCR bol vyvinutý v Novosibirsku v roku 1999. V porovnaní s bakteriologickou metódou má množstvo výhod:
Vysoká citlivosť tejto metódy. Dokonca aj prítomnosť jedného alebo viacerých patogénov vo vzorke umožňuje získať pozitívny výsledok.
Táto metóda je vysoko špecifická. Podiel pozitívnych výsledkov je 85 – 100 %. Kontaminácia sekundárnou mikroflórou nemá vplyv na výsledky štúdie.
Výsledok sa dosiahne do 1 dňa.
Táto diagnostická metóda nenahrádza kultúrnu metódu.
Bakteriologická metóda a technika PCR sú komplementárne a spoľahlivé testy na identifikáciu Bordetella pertussis.
Ryža. 6. Na fotografii sú typy kolónií Bordetella pertussis.
Testovanie čierneho kašľa pomocou techniky fluorescenčných protilátok
Nízky podiel bakteriologického potvrdenia ochorenia sa stal impulzom pre vývoj ďalších, citlivejších metód na identifikáciu pôvodcu čierneho kašľa. V 60. rokoch metóda na určenie Bordetella pertussis pomocou fluorescenčných protilátok. Špeciálne spracované nátery sa prezerajú pod fluorescenčným mikroskopom. Tento test môže vykonávať iba vysokokvalifikovaný personál; V opačnom prípade je možný veľký počet falošne pozitívnych výsledkov. Táto technika sa v praktickej medicíne používa zriedka.
Ryža. 7.Špeciálne spracované nátery sa prezerajú pod fluorescenčným mikroskopom.
Testovanie na čierny kašeľ pomocou sérologických testov
Pôvodcovia čierneho kašľa obsahujú látky (antigény), ktoré môžu vyvolať imunitnú odpoveď v organizme infikovaného človeka (tvorba protilátok). Vďaka sérologickým štúdiám sa identifikujú a študujú protilátky a antigény v krvnom sére pacienta. Sú založené na imunitných reakciách organizmu. Špecifickosť tohto typu štúdie nedosahuje 100 %, preto sa výsledky sérologickej štúdie hodnotia len s prihliadnutím na klinický obraz ochorenia. Sérologické metódy sa používajú aj na vykonávanie epidemiologických analýz.
Na diagnostiku čierneho kašľa sa používa niekoľko testov:
Enzymovo viazaný imunosorbentový test (ELISA) - citlivý, špecifický a relatívne lacný test. Na jej uskutočnenie sa používajú proteínové antigény baktérií čierneho kašľa, pomocou ktorých sa merajú sérové imunoglobulíny triedy G, M a A, ktorých hladina v krvi po chorobe alebo imunizácii stúpa. Sérové imunoglobulíny M sa zvyšujú v počiatočných štádiách ochorenia, sérové imunoglobulíny G - v neskorších štádiách.
Diagnóza čierneho kašľa v neskorších štádiách ochorenia sa vykonáva pomocou aglutinačných reakcií: RPGA, RNGA A RA. Základom takýchto reakcií je schopnosť korpuskulárnych antigénov zlepovať sa pomocou protilátok.
Zmeny v bunkovom zložení krvi: vysoké hladiny leukocytov (leukocytóza) a lymfocytov (lymfocytóza) s normálnou rýchlosťou sedimentácie erytrocytov (ESR) sa častejšie zisťujú u neočkovaných detí.
Bez ohľadu na to, v akej forme sa čierny kašeľ vyskytuje, dnes majú lekári možnosť vykonať včasnú laboratórnu diagnostiku tohto ochorenia.
Ryža. 8. Na fotografii vľavo sú leukocyty, vpravo lymfocyty. Pri čiernom kašli sa ich počet výrazne zvyšuje.
Diferenciálna diagnostická metóda umožňuje u pacientov vylúčiť množstvo možných ochorení a stanoviť jedinú správnu diagnózu. Správne vykonaná diferenciálna diagnostika čierneho kašľa umožňuje pacientovi včas podať adekvátnu liečbu a tým uľahčiť priebeh ochorenia.
Čierny kašeľ by sa mal odlíšiť od ARVI, paradávneho kašľa, bronchitídy, bronchiálnej astmy, prítomnosti cudzích telies v dýchacom trakte, zápalu pľúc, tuberkulóznej bronchoadenitíde atď.
Najväčšou ťažkosťou je diagnostika ochorenia. v katarálnom období. Čierny kašeľ v tomto období má veľa podobností s celou skupinou akútnych respiračných vírusových ochorení, ako aj s osýpkami a paradávnym kašľom. Čierny kašeľ v tomto období je charakterizovaný pretrvávajúcim, narastajúcim kašľom a absenciou alebo slabou závažnosťou katarálnych javov horných dýchacích ciest.Počas tohto obdobia je potrebné používať expresné metódy a bakteriologickú diagnostiku čierneho kašľa.
Počas záchvatov kŕčovitého kašľa čierny kašeľ treba odlíšiť od akútnych respiračných ochorení s obštrukčným syndrómom, akútnych vírusových ochorení s prevládajúcim poškodením dolných častí dýchacieho aparátu, respiračnej mykoplazmózy, tuberkulóznej bronchoadenitidy, aspirácie cudzieho telesa, mediastinálneho tumoru, bronchopulmonálnej formy cystickej fibrózy.
Ryža. 9. Moderná diagnostika čierneho kašľa umožňuje rýchlo stanoviť správnu diagnózu. A včasná adekvátna liečba výrazne uľahčí stav chorého dieťaťa a vykoná preventívne opatrenia, čím zabráni infekcii kontaktných osôb.
