Diagnostika giardiózy je náročná úloha. Ochorenie nemá žiadne patogonické príznaky. Často sa klinický obraz giardiázy prekrýva s inými ochoreniami gastrointestinálneho traktu. Z mnohých dôvodov nie je vždy možné detegovať protilátky v krvnom sére. Mikroskopická metóda má tiež svoje obmedzenia - neschopnosť rozlíšiť blízko príbuzné druhy Giardia a frekvencia izolácie cysty robí skatologickú diagnostickú metódu menej informatívnou.
Analýza Giardie zahŕňa analýzu obsahu stolice, krvi a dvanástnika:
Mikroskopia natívneho (nezafarbeného) náteru a náteru zafarbeného Lugolovým roztokom na detekciu cystických foriem vo formovaných a precystických formách parazita v tekutých výkaloch. Pri hnačke a v duodenálnom obsahu sa zisťujú vegetatívne formy patogénov.
Detekcia vegetatívnych foriem Giardia počas duodenálnej intubácie. Biopsia dvanástnika je najspoľahlivejšou diagnostickou metódou.
Citlivejšou metódou je detekcia protilátok proti patogénu v krvnom sére pomocou ELISA a RNIF. Niektoré laboratóriá vykonávajú testy na zistenie antigénov parazitov v stolici. Táto technika na diagnostikovanie giardiázy je vhodnejšia ako hľadanie cýst vo výkaloch pacienta.
Molekulárne genetická metóda sa považuje za vysoko citlivú.
Giardia sa pestuje na umelých živných médiách, ale táto technika sa v praxi nepoužíva.
Vzhľadom na nedostatok 100% citlivosti každej z vyššie uvedených metód musí byť diagnostika giardiózy vykonaná komplexne.
Ryža. 1. Na fotografii je Giardia (vegetatívna forma parazita, trofozoity).
Parazitologický výskum
Ak existuje podozrenie na ochorenie, vykonajú sa testy na Giardiu: skúmajú sa výkaly a obsah dvanástnika. Vo fekálnych hmotách sa zisťujú cysty (v tekutých fekálnych hmotách), v obsahu dvanástnika sa zisťujú cysty aj trofozoity, zisťujú sa iba trofozoity (mobilné vegetatívne formy parazitov).
Ryža. 2. Giardia pod mikroskopom.
Ryža. 3. Na fotografii sú mobilné vegetatívne formy Giardia (na obrázku vyššie) a cysta parazita (foto nižšie).
Metóda skatologického výskumu
Metóda skatologického výskumu (analýza stolice pre Giardiu) je najdostupnejšia, ale menej informatívna. S jeho pomocou sa zisťujú parazitické cysty, vylučované u pacientov so stolicou od 5. do 7. dňa ochorenia prerušovane, každých 2 až 21 dní (v priemere každých 8 až 14 dní).
Počas „tichého“ obdobia sa uvoľňovanie cýst zastaví. Táto okolnosť si vyžaduje opakované vyšetrenie výkalov a použitie iných laboratórnych techník.V čerstvej stolici zozbieranej 15 - 20 minút pred začiatkom štúdie sa vegetatívne formy Giardie detegujú v 5% prípadov. V priebehu pol hodiny alebo hodiny vegetatívne formy odumierajú a cysty sa „zmenšujú“ a spájajú s detritom, čo znemožňuje ich detekciu.
Na Giardiu by mali byť vyšetrení pacienti s ochoreniami tráviaceho traktu so sklonom k chronicite, so súčasnou neurocirkulačnou dysfunkciou, s dlhodobou eozinofíliou a alergickými ochoreniami.
Optimalizáciu skatologického výskumu možno dosiahnuť nasledujúcim spôsobom:
vykonanie 4- až 5-násobnej analýzy stolice na Giardiu v intervaloch 7-8 dní;
vylúčenie na 5 - 7 dní z užívania antiparazitík;
ak nie je možné doručiť čerstvo odobratú stolicu do laboratória, odporúča sa použiť konzervačné látky v pomere tri diely konzervačnej látky na jeden diel stolice;
pri zápche je potrebné v predvečer testu stolice na lambliu užiť preháňadlo (gutalax, senáda a pod.) a/alebo choleretiká.
Ryža. 4. Na fotografii sú vegetatívne formy parazitov - trofozoity (elektrónová rastrovacia mikroskopia).
Ryža. 5. Trophozoit (foto A) a cysty Giardia (foto B).
Mikroskopia duodenálneho obsahu
V duodenálnom obsahu počas giardiázy sú mobilné formy Giardia (vegetatívne formy, trofozoidy) detegované s väčšou frekvenciou ako vo výkaloch. Ak však Giardia parazituje v dolných častiach tenkého čreva, výsledky testov sú negatívne. Štúdie obsahu dvanástnika by sa mali vykonávať súčasne s vyšetrením stolice. V poslednej dobe sa tento typ výskumu používa len zriedka.
Ryža. 6.Na fotografii sú vegetatívne formy (trofozoity) Lamblia intestinalis, označené protilátkami (fluorescenčné farbenie, nepriame RIF).
Na identifikáciu špecifických imunoglobulínov sa podáva krvný test na Giardiu. Predpokladá sa, že hlavným faktorom patogenity Lamblia inneris (hlavný imunogén) je antigén Ag GSA-65, na základe ktorého boli vytvorené moderné testovacie systémy, ktoré sa používajú na diagnostiku tohto ochorenia.
Metódy enzýmovej imunoanalýzy (ELISA) a imunofluorescencie (RNIF) sú perspektívne v laboratórnej diagnostike giardiázy. S ich pomocou sa zisťujú sérové imunoglobulíny tried G a M pacientov a nosiče a antigény vo vzorkách stolice. Senzitivita a špecifickosť týchto metód na diagnostiku giardiázy je viac ako 90 %.
Imunoglobulíny IgM a IgG sa objavujú v krvi od 12. do 14. dňa choroby. Prítomnosť imunoglobulínov IgM aj IgG naznačuje, že pacient má giardiázu. Po sanitácii IgM zmizne a IgG pretrváva až dva mesiace.
úroveň IgM (v neprítomnosti IgG) indikuje prítomnosť akútnej giardiázy u pacientov, u ktorých k invázii došlo nie viac ako pred 3 mesiacmi.
hladina IgG (v kombinácii s alebo bez IgM) indikuje chronický priebeh giardiázy alebo počiatočné štádium rekonvalescencie akútnej giardiázy.
Čím vyššia je hladina protilátok v krvnom sére pacienta, tým častejšie sa pozoruje negatívna sekrécia cysty.
Protilátky sa nezistia u detí s lymfaticko-hypoplastickou diatézou a u pacientov s neúčinnými humorálnymi obrannými mechanizmami, čo prispieva k chronickosti infekčného procesu. Liečba giardiózy sa v tomto prípade uskutočňuje podľa jednotlivých schém.
Analýza Giardie so súčasným použitím sérologických a skatologických metód umožňuje presnejšie identifikovať ochorenie. Diagnóza giardiózy len na základe výsledkov skatologických výskumných metód sa považuje za neopodstatnenú.
Biopsia tenkého čreva je cenným diagnostickým testom, ktorý umožňuje identifikovať a posúdiť rozsah poškodenia sliznice a odhaliť parazity. Táto technika sa používa v extrémnych prípadoch.
Ryža. 8. Pri giardiáze sú poškodené klky sliznice tenkého čreva. Na fotografii vľavo je mikroskopia bioptického materiálu od pacienta s giardiázou. Na fotografii vpravo sa Giardia pohybuje smerom k črevným klkom.
Ak pacient ochorie, vykoná sa všeobecný krvný test.
Ryža. 9. Eozinofília indikuje vývoj alergických reakcií u pacienta s giardiázou (foto vľavo). Pri dlhom a ťažkom priebehu ochorenia vzniká anémia (foto vpravo).
