Diagnóza hepatitídy A je založená na epidemiologických, klinických a laboratórnych údajoch. Laboratórna diagnostika je založená na identifikácii markerov vírusovej replikácie - IgM a IgG protilátok proti antigénom patogénu a genetickej analýze - detekcia vírusovej RNA v krvnom sére. Technika identifikácie vírusových antigénov má obmedzený význam vzhľadom na skutočnosť, že vrchol ich tvorby nastáva v inkubačnej dobe a v najskoršom ikterickom období. Kultivácia sa zriedka používa na diagnostiku hepatitídy A. Vírusy nerastú na viacvrstvových bunkových kultúrach. Výhodné sú leukocytové alebo orgánové kultúry.
Ryža. 1. Pacient má žltačku.
Klinické nálezy naznačujúce hepatitídu A
Pri diagnostike choroby je potrebné vziať do úvahy skutočnosť, že najčastejšie je choroba registrovaná u detí vo veku od 5 do 14 rokov. U 80% detí mladších ako 5 rokov je ochorenie asymptomatické v anikterickej forme. U starších detí a dospelých je ikterická forma ochorenia zaznamenaná v 70% prípadov.
Prítomnosť hepatitídy A u pacienta je indikovaná nasledujúcimi klinickými údajmi:
Kontakt s pacientom s hepatitídou A, pitie vody z netestovaných zdrojov, neumytá zelenina a ovocie a pod., návšteva krajín Ázie, Afriky a Latinskej Ameriky v priemere 14 - 28 dní pred ochorením. Amplitúda výkyvov v inkubačnej dobe sa pohybuje od 7 do 50 dní.
Akútny nástup ochorenia s hypertermiou, intoxikáciou, dyspeptickými a astenovegetatívnymi syndrómami.
Pri ikterickej forme ochorenia je predikterické obdobie krátke.
Zlepšenie pohody pacienta s výskytom žltačky.
Významné zvýšenie (5 - 40 krát) hladiny aminotransferáz (ALT a AST) v krvnom sére a tymolovom teste.
Na diagnostiku hepatitídy A sa používa hlavne krvné sérum a fekálne hmoty.
Ryža. 2. Stmavnutie moču a zmena farby výkalov sú kľúčovými príznakmi ochorenia.
Diagnostika ochorenia pomocou sérologických testov
Hepatitída v akútnej fáze môže byť identifikovaná iba detekciou špecifických IgM a IgG protilátok v krvnom sére. Tieto markery ochorenia sa detegujú pomocou sérologických reakcií ELISA (enzyme-linked immunosorbent assay) a RIA (rádioimunoanalýza). Obe diagnostické metódy sú vysoko špecifické a vysoko citlivé. Pri vykonávaní RIA sa používa špecifický IgG značený rádionuklidom 125I, pri vykonávaní ELISA sa používa enzým peroxidáza. Pomocou imunofluorescenčnej reakcie možno vyšetriť biopsie pečene. Sérologické diagnostické metódy sa využívajú aj na účely epidemiologického vyšetrenia kontaktných osôb.
IgM sa začína produkovať v tele pacienta od konca inkubačnej doby a je prítomný v krvi 3 až 6 mesiacov po ochorení.
IgG sa začína produkovať po 2-3 týždňoch choroby a následne je prítomný v krvnom sére pacienta počas jeho života.
V rôznych regiónoch sa podiel zdravých jedincov s IgG protilátkami v krvnom sére proti vírusu hepatitídy A pohybuje od 30 do 60 %.
Ryža. 3. Protilátky sú produkované bunkami imunitného systému pacienta ako odpoveď na antigény vírusu hepatitídy. Čím vyššia je imunitná odpoveď, tým vyššia je koncentrácia protilátok v krvnom sére.
Protilátky (imunoglobulíny) triedy IgM
IgM („skoré“ protilátky) sú prvé v boji proti cudzím mikroorganizmom. Začínajú sa produkovať v tele pacienta od konca inkubačnej doby - 5 - 10 dní pred objavením sa prvých príznakov hepatitídy A. Titer IgM sa počas prvých 3 - 6 týždňov zvyšuje 4-krát a potom sa postupne znižuje. Po 6 - 8 mesiacoch (niekedy 12 - 18 mesiacoch) IgM zmiznú. Pomocou IgM sa zisťuje hepatitída A, vyskytujúca sa v anikterických, vymazaných a subklinických formách.
Stanovenie protilátok proti vírusu hepatitídy A triedy IgM je hlavným testom na špecifickú diagnózu hepatitídy A. Ich prítomnosť v krvnom sére naznačuje akútnu fázu alebo nedávne ochorenie.
Protilátky (imunoglobulíny) triedy IgG
„Neskoré“ protilátky IgG začnú produkovať imunitný systém po 2-3 týždňoch choroby. Ich titer sa pomaly zvyšuje, maximum sa určuje na 4-6 týždňov choroby a potom sa postupne znižuje. Následne je IgG prítomný v krvnom sére pacienta počas celého života. Detekcia IgG protilátok v krvnom sére zdravých jedincov naznačuje predchádzajúce ochorenie. Špecifické IgG sa tvoria u očkovaných jedincov.
Protilátky (imunoglobulíny) triedy IgA
Protilátky triedy IgA sa hromadia v slizniciach čriev, horných dýchacích ciest a močových ciest, nachádzajú sa v slinách, slznej tekutine, mledzive a mlieku a ako prvé chránia telo pred cudzími mikroorganizmami. V krvnom sére sa výskyt protilátok IgA vyskytuje paralelne s výskytom protilátok IgM, ale IgA mizne z krvi oveľa rýchlejšie. IgA protilátky sa detegujú vo výkaloch.
Ryža. 4. Špecifické IgM a IgG protilátky sa detegujú pomocou sérologických reakcií ELISA (enzyme-linked immunosorbent assay) a RIA (rádioimunoanalýza).
Antigény vírusu hepatitídy A možno detegovať v extraktoch pacientových výkalov, na čo sa používa imunoelektrónová mikroskopia, enzýmové imunoanalýzy a rádioimunoanalýzy. Prítomnosť vírusov v stolici pacienta je 100% potvrdením diagnózy, ale ich absencia nevylučuje prítomnosť hepatitídy A.
Vírusová RNA (genetický materiál) sa deteguje v pacientovom krvnom sére, fekálnych extraktoch, potravinách a vode (nádrže, kanalizácie atď.) pomocou polymerázovej reťazovej reakcie (PCR). Senzitivita tejto diagnostickej metódy je minimálne 80 vírusových častíc v 5 μl, špecificita je 98 %. Vírusová RNA sa zisťuje od 3. týždňa ochorenia a asi 20 dní po objavení sa prvých príznakov ochorenia. Vírusová RNA vo výkaloch sa zisťuje od 3. týždňa ochorenia a približne 3 mesiace po objavení sa prvých príznakov ochorenia.
Vírusy hepatitídy A možno izolovať infikovaním vnímavých zvierat (opice kosmáč, šimpanzy alebo paviány), čo sa robí len vo vysoko špecializovaných laboratóriách. Materiál získaný z infikovaných zvierat sa vyšetruje na detekciu samotného patogénu a jeho antigénov pomocou metód opísaných vyššie.
Ryža. 6. Vírusy hepatitídy A možno izolovať infikovaním vnímavých zvierat (opice kosmáč, šimpanzy alebo paviány), čo sa robí len vo vysoko špecializovaných laboratóriách.
Diferenciálna diagnostika hepatitídy A by sa mala vykonať s nasledujúcimi ochoreniami:
Vírusová hepatitída C, B a E.
V anikterickej forme, v skorých, predikterických obdobiach, sa hepatitída A často vyskytuje pod rúškom akútnej respiračnej infekcie alebo alimentárneho ochorenia.
Rakovina hlavnej papily dvanástnika.
Chronická hepatitída a cirhóza pečene.
Pri žltačke sa môže vyskytnúť infekčná mononukleóza, toxoplazmóza, leptospiróza, pseudotuberkulóza a cytomegalovírusová infekcia.
