Suvremena dijagnostika hripavca omogućuje vam brzo postavljanje ispravne dijagnoze i propisivanje odgovarajućeg liječenja, što može značajno olakšati stanje bolesnika i provesti pravovremene preventivne mjere, sprječavajući infekciju drugih i kontaktnih osoba. Analiza hripavca bakteriološkom metodom istraživanja glavna je u dijagnosticiranju bolesti.
Međutim, iskustvo mnogih studija dokazuje da je za točnu laboratorijsku dijagnozu bolesti potrebno koristiti nekoliko komplementarnih tehnika. Najučinkovitija kombinacija je kombinacija bakteriološke metode i lančane reakcije polimerazom (PCR).
Riža. 1. Spasmodični paroksizmalni kašalj dominantan je simptom hripavca u djece.
Kliničke metode dijagnostike hripavca
Prepoznavanje hripavca u ranim fazama razvoja bolesti prolazi kroz velike poteškoće, što je povezano s nekoliko čimbenika:
Bolest se razvija polako. Njegova kulminacija događa se 2-3 tjedna nakon pojave prvih simptoma bolesti.
Primarna toksikoza i izražena temperaturna reakcija na početku bolesti, tako karakteristična za mnoge dječje zarazne bolesti, odsutni su kod hripavca. Stoga se laboratorijska dijagnoza često kasni.
U cijepljene djece i odraslih najčešće se bilježe atipični oblici bolesti kod kojih se mijenjaju karakteristike kašlja (nema napadaja grčevitog kašlja niti recidiva).
Kriteriji za dijagnosticiranje hripavca u predkonvulzivnom (kataralnom) razdoblju:
Kontakt s pacijentima koji imaju dugotrajni kašalj.
Spor razvoj bolesti. Normalna ili niska tjelesna temperatura. Stanje bolesnika je zadovoljavajuće.
Odsutnost izraženih kataralnih pojava.
U početku kašalj, a zatim uporan suhi kašalj prije nego što pređe u paroksizmalni grčeviti kašalj traje 1 - 2 tjedna.
Simptomatska terapija nema učinka.
Zveckanje u plućima često se ne čuje. Visoke razine bijelih krvnih stanica (leukocitoza) i limfocita (limfocitoza) uz normalnu brzinu sedimentacije eritrocita (ESR).
Detekcija uzročnika hripavca u usjevima (Bordetella pertussis).
Riža. 2. Fotografija prikazuje ružičastu bakteriju Bordetella pertussis pod mikroskopom (bojenje po Gramu). Štapići pertusisa su kratki, u obliku kokosa, krajevi su zaobljeni, duljina je 0,5 - 2 mikrona, u razmazima se nalaze odvojeno, rjeđe - u parovima.
Riža. 3. Prikaz bakterije pertusisa u elektronskom mikroskopu.
Izolacija uzročnika hripavca iz nazofaringealne sluzi klasična je metoda laboratorijske potvrde bolesti. Stopa sjetve patogena rijetko doseže 80%. U prosjeku ne prelazi 10 - 30%. Razlozi za to su:
Spor rast bacila pertusisa na hranjivim podlogama.
Niska kvaliteta hranjivih medija.
Kasnije ispitivanje bolesnika.
Kontaminacija ispitivanog materijala bakterijskom florom.
Pogreške u prikupljanju ispitnog materijala.
Primjena antibiotika do uzimanja materijala za bakteriološki pregled.
Materijal za bakteriološku pretragu je bris iz nosnih prolaza (oba) i stražnje stijenke nazofarinksa (ne iz grkljana!).
Za uzimanje brisa koristi se Dacron tupfer ili se koristi metoda flastera za kašalj.
Sjetva se obavlja odmah na hranjivi ili transportni medij. Materijal se čuva u transportnom mediju ne duže od jednog dana. Preliminarni odgovor dobiva se u roku od 3-5 dana. Konačan odgovor dobiva se za 5 - 7 dana.
Pregledu podliježu osobe kod kojih postoji sumnja na bolest i osobe čiji kašalj traje duže od 7, a ne duže od 30 dana.
Riža. 4. Na fotografiji je kolonija Bordetella pertussis. Za uzgoj se koristi Bordet-Gengou medij (fotografija desno) ili kazein-ugljeni agar (fotografija lijevo). Na tim podlogama do stvaranja kolonija dolazi 3-4 dana nakon sjetve. Kolonije mikroba su sjajne, sivkasto-krem boje, izgledom nalikuju kapljicama žive i imaju viskoznu konzistenciju. Nakon uklanjanja kolonija iz hranjive podloge ostaje kremasti trag.
Riža. 5. Kada promatrate kolonije Bordetella pertussis pod svjetlosnim mikroskopom, možete vidjeti kako kolonije bacaju sjenu (svjetlosni stožac).
Dijagnostika hripavca pomoću PCR-a (lančana reakcija polimeraze) je tehnika koja najviše obećava u suvremenim uvjetima. Visoka osjetljivost testa omogućuje otkrivanje DNK bakterija, čak i ako ih ima nekoliko u ispitivanom materijalu.
Metoda određivanja DNA Bordetella pertussis pomoću PCR-a razvijen je u Novosibirsku 1999. Ima niz prednosti u odnosu na bakteriološku metodu:
Visoka osjetljivost ove metode. Čak i prisutnost jednog ili više patogena u uzorku omogućuje vam da dobijete pozitivan rezultat.
Ova metoda je vrlo specifična. Udio pozitivnih rezultata je 85 - 100%. Kontaminacija sekundarnom mikroflorom ne utječe na rezultate studije.
Rezultat se dobiva unutar 1 dana.
Ova dijagnostička metoda ne zamjenjuje kulturnu metodu.
Bakteriološka metoda i PCR tehnika su komplementarni i pouzdani testovi za identifikaciju Bordetella pertussis.
Riža. 6. Na fotografiji su prikazane vrste kolonija Bordetella pertussis.
Testiranje na pertusis tehnikom fluorescentnih antitijela
Nizak udio bakteriološke potvrde bolesti bio je poticaj za razvoj drugih, osjetljivijih metoda za identifikaciju uzročnika hripavca. U 60-ima, metoda za određivanje Bordetella pertussis pomoću fluorescentnih antitijela. Posebno obrađeni razmazi se pregledavaju pod fluorescentnim mikroskopom. Samo visoko kvalificirano osoblje smije provoditi ovaj test; koriste se visokokvalitetni reagensi. U protivnom je moguć veliki broj lažno pozitivnih rezultata. Ova tehnika se rijetko koristi u praktičnoj medicini.
Riža. 7.Posebno obrađeni razmazi se pregledavaju pod fluorescentnim mikroskopom.
Uzročnici hripavca sadrže tvari (antigene) koje mogu potaknuti imunološki odgovor u tijelu zaražene osobe (stvaranje protutijela). Zahvaljujući serološkim studijama identificiraju se i proučavaju antitijela i antigeni u krvnom serumu pacijenta. Temelje se na imunološkim reakcijama tijela. Specifičnost ove vrste studije ne doseže 100%, stoga se rezultati serološke studije procjenjuju samo uzimajući u obzir kliničku sliku bolesti. Serološke metode također se koriste za provođenje epidemiološke analize.
Za dijagnosticiranje hripavca koristi se nekoliko testova:
Enzimski imunološki test (ELISA) - osjetljiv, specifičan i relativno jeftin test. Za njegovu provedbu koriste se proteinski antigeni bakterija hripavca, kojima se mjere serumski imunoglobulini klase G, M i A, čija se razina u krvi povećava nakon bolesti ili imunizacije. Imunoglobulini M u serumu rastu u ranim fazama bolesti, imunoglobulini G u serumu - u kasnijim fazama.
Dijagnoza hripavca u kasnijim fazama bolesti provodi se pomoću reakcija aglutinacije: RPGA, RNGA I RA. Osnova takvih reakcija je sposobnost korpuskularnih antigena da se drže zajedno uz pomoć protutijela.
Promjene u staničnom sastavu krvi: visoke razine leukocita (leukocitoza) i limfocita (limfocitoza) uz normalnu brzinu sedimentacije eritrocita (ESR) češće se otkrivaju u necijepljene djece.
Bez obzira na oblik u kojem se hripavac javlja, danas liječnici imaju priliku provesti ranu laboratorijsku dijagnostiku ove bolesti.
Riža. 8. Na fotografiji lijevo su leukociti, desno su limfociti. Kod hripavca njihov se broj znatno povećava.
Diferencijalno dijagnostička metoda omogućuje isključivanje niza mogućih bolesti kod bolesnika i postavljanje jedine točne dijagnoze. Ispravno provedena diferencijalna dijagnoza hripavca omogućuje pravodobno liječenje bolesnika, čime se olakšava tijek bolesti.
Hrapavac treba razlikovati od ARVI, parahripavca, bronhitisa, bronhijalne astme, prisutnosti stranih tijela u respiratornom traktu, upale pluća, tuberkuloznog bronhoadenitisa itd.
Najveća je poteškoća u dijagnosticiranju bolesti. u kataralnom razdoblju. Hripavac u ovom razdoblju ima mnogo sličnosti s cijelom skupinom akutnih respiratornih virusnih bolesti, kao i ospicama i parahripalčevim kašljem. Hripavac tijekom tog razdoblja karakterizira uporan, sve veći kašalj i odsutnost ili slaba težina kataralnih pojava gornjeg dišnog trakta.Tijekom tog razdoblja potrebno je koristiti ekspresne metode i bakteriološku dijagnostiku hripavca.
Tijekom napadaja grčevitog kašlja hripavac treba razlikovati od akutnih respiratornih bolesti s opstruktivnim sindromom, akutnih virusnih bolesti s dominantnim oštećenjem donjih dijelova respiratornog aparata, respiratorne mikoplazmoze, tuberkuloznog bronhoadenitisa, aspiracije stranog tijela, medijastinalnog tumora, bronhopulmonalnog oblika cistične fibroze.
Riža. 9. Moderna dijagnostika hripavca omogućuje brzo postavljanje ispravne dijagnoze. A pravodobno odgovarajuće liječenje značajno će olakšati stanje bolesnog djeteta i provesti preventivne mjere, čime će se spriječiti infekcija kontaktnih osoba.
