Diagnostisering av malaria er basert på data fra kliniske manifestasjoner, epidemiologiske undersøkelser og laboratorieforskningsmetoder, inkludert metoder for å identifisere parasitter, deres antall, arter og påvisning av antistoffer i kroppen til den som studeres. Først og fremst er pasienter fra risikogruppen gjenstand for undersøkelse - de som kom fra regioner som er endemiske for malaria, og som utviklet feber de to første årene etter at de forlot disse regionene.
Ris. 1. Blodprøvetaking for å forberede "tykk dråpe"-preparatet.
Ris. 2. Farge og type preparater: "tykk dråpe" og tynt utstryk.
Diagnose av malaria ved hjelp av mikroskopisk metode
Mikroskopi av en "tykk dråpe" og et tynt utstryk, som gjør det mulig å oppdage parasitter, deres antall og arter, er den ledende metoden for å diagnostisere malaria. Det utføres ved den minste mistanke om denne sykdommen, uavhengig av pasientens temperaturreaksjon. Et tynt blodutstryk brukes til å bestemme arten av parasitter og stadiet av sykdommen. Flere parasitter er lokalisert i en tykk dråpe enn i en utstryk.Denne diagnostiske metoden er 20 til 40 ganger bedre enn metoden for å bestemme tilstedeværelsen av malariapatogener i et tynt blodutstryk.
Parasitter oppdages i perifert blod en viss tid etter infeksjon:
for 3-dagers malaria - etter 8 - 12 dager,
for tropisk - fra fem og en halv dag til 12,
med 4 dager - etter 15 - 21 dager,
for malaria tilsvarende 3 dager - etter 9 - 15 dager.
Parasitter er tilstede i blodet både under feberanfall og i interiktalperioden og under parasitttransport.
Ris. 3. Teknikk for å tilberede en tynn smøre.
Teknikk for å tilberede en "tykk" dråpe
En bloddråpe oppnådd ved å stikke en finger påføres et tidligere rengjort og tørt glassglass og smøres inn til en flekk på 1 cm i diameter er oppnådd. Etter tørking i luft fylles objektglasset med Romanovsky-Giemsa maling. Etter en 40-minutters eksponering skylles stoffet under rennende vann og tørkes ved romtemperatur, satt i vertikal stilling.
Minst 100 synsfelt undersøkes under et mikroskop. Det anses som mer effektivt å studere 2 tykke dråper i 2,5 minutter enn å studere 1 dråpe i 5 minutter. 100 synsfelt blir sett selv i tilfelle malariaplasmodia oppdages allerede i de første feltene. Dette gjøres for ikke å gå glipp av en blandet infeksjon.
Ris. 4. Mikroskopi av et "tykk dråpe"-preparat og et tynt utstryk er den ledende metoden for å diagnostisere malaria.
Parasittdeteksjonsterskel
Deteksjonsterskelen for malariaplasmodia er minimumskonsentrasjonen av patogener som kan påvises ved mikroskopi av et "tykk dråpe"-preparat. Under sykdommen er dette tallet 5 parasitter i en mikroliter blod.Ved visning av 100 synsfelt undersøkes 0,2 μl blod.
Hvis det er indirekte tegn på malaria (opphold i endemiske områder, hypokrom anemi, påvisning av pigment i monocytter) og negative resultater av studien av "tykke dråper" medikamenter, gjentas studien mer nøye, og ikke bare en, men en serie bestående av 4 - 6 medikamenter med en injeksjon, eller oppnådd under blodprøvetaking, som utføres 4 - 6 ganger daglig i 2 - 3 dager.
Intensiteten av parasitemi bestemmes av "+"-tegnet.
1 (+) indikerer påvisning av 1 til 100 parasitter i 10 p/z, som tilsvarer 5 - 50 plasmodia i en μl blod;
2 (+) indikerer påvisning av 10 til 100 parasitter i 10 p/z, som tilsvarer 50 - 500 plasmodia i en μl blod;
3 (+) indikerer påvisning av 1 til 10 parasitter i 1 p/z, som tilsvarer 500 - 5000 plasmodia i en μl blod;
4 (+) indikerer påvisning av 10 til 100 parasitter i 1 p/z, som tilsvarer 5000 - 50 000 plasmodia i en μl blod;
5 (+) indikerer påvisning av mer enn 100 parasitter i 1 p/z, som tilsvarer mer enn 50 000 plasmodia i en μl blod.
Intensiteten av parasittmia kan beregnes ved antall parasitter per 100 røde blodlegemer i 10 synsfelt, eller ved forholdet mellom antall parasitter og leukocytter i 1 μl blod.
Intensiteten av parasitemi bestemmer prognosen for tropisk malaria. Ved andre typer sykdommer påvirkes ikke mer enn 2 % av de røde blodcellene.
Former for malariaplasmodia i ulike utviklingsfaser
I den "tykke dråpen" blodpreparatet er det mulig å identifisere malariaplasmodia på forskjellige stadier av utviklingen - trofozoid, ring, schizont, morula og gameter.
Ris. 5.Plasmodium ovale har en rund form.
Ris. 6. Ung Plasmodium vivax trofozoitt i en erytrocytt.
Ris. 7. Juvenile trofozoider av Plasmodium falciparum.
Ris. 8. Ringformede trofozoitter av Plasmodium vivax.
Ris. 9. Amøboide schizonter Plasmodium vivax.
Ris. 10. Modne schizonter Plasmodium vivax.
Ris. 11. Kvinnelige gametocytter av tropiske malariapatogener.
Ris. 12. Gametocytter av plasmodia av tropisk malaria er halvmåneformede, mens plasmodia av andre typer sykdom er runde.
Ris. 13. Under vekst akkumuleres pigment i cytoplasmaet til parasitter. Bildet viser R. vivax.
Overvåking av behandlingens effektivitet
Ved adekvat behandling av malaria reduseres nivået av parasitemi innen 24 timer med 25% eller mer, og etter 3 dager fra behandlingsstart bør det ikke være mer enn 25% av det opprinnelige nivået. Hvis parasitter oppdages på den 4. dagen fra behandlingsstart, indikerer dette utvikling av medikamentresistens hos patogenene.
Frekvens av forskning
Når malaria oppdages, utføres mikroskopisk undersøkelse av blodprodukter daglig. Ved alvorlige former for tropisk malaria utføres mikroskopi 2 ganger daglig til patogenene forsvinner i blodet og deretter ukentlig frem til 28. behandlingsdag for å vurdere effektiviteten og identifisere resistens mot malariamedisiner.
Ris. 14. Når de er infisert med P. vivax og P. ovale, blir røde blodlegemer forstørret, misfarget og deformert, og giftig granularitet vises i dem.
Ved infeksjon med P. malariae og P. falciparum endres ikke formen og størrelsen på røde blodlegemer. Bildet viser deformerte røde blodlegemer fra en malariapasient (skanningmikroskopmikroskop).
Ved å bruke serodiagnose av malaria er det mulig å oppdage antistoffer og løselige parasittiske antigener i pasientens blodserum. Serologiske tester er indisert for bruk i tilfeller av feber av ukjent opprinnelse, hepatosplanomegali, anemi hos pasienter, samt for studiet av donorblod - den antatte infeksjonskilden. Serologiske tester brukes til epidemiologisk overvåking av personer som bodde i områder som tidligere var ugunstige for malaria.
Oftest, i diagnostisering av malaria, brukes NIIF - indirekte immunfluorescensreaksjon. ELISA, RIGA osv. brukes også. Bruken av enzymmerket antistoffreaksjon (ERMA) blir introdusert i praksis.
Ved svært lav parasitemi er bruk av PCR (polymerasekjedereaksjon) indisert. Den høye kostnaden og kompleksiteten ved å bruke denne teknikken tillater ikke utbredt bruk.
Nye metoder for å diagnostisere malaria er utviklet - rask mikroskopisk analyse av blodprodukter ved bruk av fluorescerende fargestoffer, som gjør det mulig å identifisere tropiske malariaparasitter, hvor antallet er mer enn 60 i 1 μl hemolysert blod, innen to minutter.
Ved malaria oppstår antistoffer på dag 8–27 med parasitemi. IgM-antistoffer vises først, etterfulgt av IgG-antistoffer. Antistoffer etter malaria og vellykket behandling kan forbli i en persons blod i lang tid - fra 0,5 til 2 eller til og med 20 år.
Ris. 15. Oftest, ved diagnostisering av malaria, brukes NRIF - indirekte immunfluorescensreaksjon.
Malaria bør skilles fra influensa og andre akutte luftveisvirusinfeksjoner, tarminfeksjoner, leptospirose, gul feber, ondartede former for viral hepatitt, tyfus-paratyfoidsykdommer, sepsis, brucellose, sepsis, hemoragisk feber og blodsykdommer.
I komatøs tilstand bør malaria skilles fra epidemisk cerebrospinal meningitt, uremisk, hepatisk og diabetisk koma.
Noen ganger bør malaria skilles fra kolecystitt, kolangitt, leverabscess, pyelonefritt og lymfogranulomatose.
Ris. 16. Rutinestudie av stoffet "tykke dråper" i malaria-endemiske regioner.
