Listeriose er en infeksjonssykdom som forårsaker de mest virulente matbårne infeksjonene. Listeriose er vanlig blant dyr og mennesker. Det er preget av mange infeksjonskilder, ulike overføringsveier og faktorer, flere former for manifestasjoner og høy dødelighet. Listeriose rammer tusenvis av mennesker over hele verden, 20 til 30 % av dem dør. Dødeligheten fra alvorlige vanlige former for sykdommen når 90 - 100%. Rettidig diagnose av listeriose lar deg foreskrive tilstrekkelig behandling, som sikrer en fullstendig kur for pasienten.
Ris. 1. Bildet viser en pasient med listeria meningitt.
Polymorfismen av kliniske manifestasjoner og umuligheten av å identifisere infeksjonskilden skaper i noen tilfeller eksepsjonelle vanskeligheter med å etablere en diagnose basert på kliniske og epidemiologiske data. I denne forbindelse blir laboratoriediagnose av listeriose avgjørende.En foreløpig diagnose stilles på grunnlag av bakterioskopisk undersøkelse. Den endelige diagnosen krever bakteriologisk bekreftelse eller PCR.
Hos kvinner som har født et dødfødt barn eller med tegn på listeriose, undersøkes morkake, fostervann og utflod fra fødselskanalen.
Mekonium er testet hos nyfødte.
Hos pasienter med mistanke om listeria meningitt undersøkes cerebrospinalvæsken.
En rekke biologisk materiale er tatt fra lik.
Avføring og orofaryngeale vattpinner tas for å bestemme bakteriell transport.
Diagnose av listeriose ved bruk av vanlig og fluorescensmikroskopi
Ris. 2. Visning av Listeria under et mikroskop. Bakterier er lokalisert enkeltvis eller i par, sjeldnere i korte kjeder. Når farget med Gram-beis, ser Listeria rosa ut.
Ris. 3. Listeria i lys av et mikroskop som gir tredimensjonal forstørrelse ser ut som sylindre.
Ris. 4. Listeria i makrofager.
Mikroskopi av listeria granulomer
En reduksjon i funksjonen til cellulær immunitet fører til spredning av infeksjon i hele kroppen. Spesifikke granulomer - listeriomer - dannes i organer og vev. Deres spesifikke sammensetning bestemmes ved mikroskopi av et utstryk eller biopat.
Ris. 5. Granulomer i leveren (bilde til venstre). Granulom (listeriom) i hjernen (bilde til høyre).
Laboratoriediagnose av listeriose ved hjelp av bakteriologisk undersøkelse
Listeria vokser ved romtemperatur på vanlige næringsmedier - lett alkalisk og nøytral. Avlinger anbefales å gjøres i løpet av de første 7 - 10 dagene av sykdommen.Inkubasjonen varer i 3 uker ved en temperatur på 37 °C. Ved plettering på glukoseblodagar velges typiske kolonier (transparente eller hornformede) som produserer hemolyse.
Ris. 6. Listeria-kolonier sådd på kjøttpeptonagar ligner duggdråper. I gjennomlyst lys får koloniene en perleskinnende fargetone.
Ris. 7. Når Listeria vokser på kromogen agar, får koloniene en blå farge.
Ris. 8. Ved dyrking på Oxford-agar dannes det en svart glorie rundt koloniene.
Ris. 9. Når Listeria vokser i kjøtt-peptonbuljong, dannes det en uklarhet med lett opalescens.
Diagnose av listeriose ved hjelp av biologiske prøver
Biologiske tester er basert på å infisere forsøksdyr med biologisk materiale tatt fra en pasient for å påvise bakterier. Hvite mus, kaniner, marsvin og steppebøtter er utsatt for infeksjon.
Ris. 10. Bildet viser hvite mus infisert med listeriose. I sentrum står en frisk mus. Til høyre og venstre for ham er diende mus med lammelse av forbena.
Ris. 11. På bildet til venstre utviklet listeriose hos en kanin etter intravenøs infeksjon. Bildet til høyre viser en inflammatorisk reaksjon som utviklet seg på stedet for intradermal injeksjon av Listeria.
Antistoffer mot Listeria bestemmes ved hjelp av serologiske reaksjoner: agglutinasjonsreaksjon (RA), indirekte hemagglutinasjonsreaksjon (IRHA) og komplementfikseringsreaksjon (CFR) med listeriaantigen i parede sera. Hvis en pasient har listeriose, registreres en økning i titer med 4 ganger eller mer. Reaksjoner utføres to ganger med 2 ukers pause.
På grunn av det antigene forholdet mellom Listeria og Staphylococcus, er falske positive resultater mulig.
Etter 2 uker fra sykdomsutbruddet påvises IgG-antistoffer i pasientens blod, som er tilstede i blodet gjennom hele sykdomsperioden. Antistoffer forblir i blodet i lang tid under kronisk listeriose.
Fluorescerende antistoffmetode
Immunfluorescensreaksjon (RIF) er en rask og svært sensitiv metode for å diagnostisere listeriose. Det er en direkte og indirekte RIF-metode. Ved bestemmelse av antistoffer ved den direkte metoden tilsettes fluorokrom-merket serum til en suspensjon av mikrober festet på et glassglass. Når et antigen-antistoffkompleks dannes under blåfiolett (ultrafiolett) lys, lyser bakteriene lysegrønt under et fluorescensmikroskop.
Ris. 12. Glød av Listeria under immunfluorescensreaksjon.
En Listeria-blodprøve er en effektiv måte å oppdage listeria-infeksjon på. I ulike former for listeriose aktiveres systemet med mononukleære fagocytter - makrofager - i pasientens kropp. De fanger opp og ødelegger bakterier og virus som lever intracellulært, leser informasjon om deres struktur og overfører den til T-lymfocytter. Deretter begynner B-lymfocytter å produsere antistoffer som ødelegger patogenet. Med sykdommen øker antallet monocytter i det perifere blodet. I den septiske formen for listeriose når antallet 70% (med en norm på 3 - 11%).
Ris. 13. På bildet er monocytter de største cellene i det perifere blodet.
For å diagnostisere listeriose brukes en intradermal (allergisk) test. Listeria-antigen administreres intradermalt. Etter 24 timer studeres reaksjonen. Hvis listeria er tilstede i kroppen til personen som testes, vises en papule (infiltrat) på 10 millimeter eller mer på huden på stedet for introduksjon av listeria-antigenet.
En intradermal test utføres på dag 6–9 fra sykdomsøyeblikket.
Ved isolerte tilfeller av listeriose bør diagnostisering av sykdommen utføres ved bruk av bakteriologisk metode og PCR-metode.
