Kasama sa pagsusuri sa dugo ng HIV o HIV test ang ilang mga pamamaraan ng diagnostic sa laboratoryo na tumutulong sa pagtukoy ng pagkakaroon ng immunodeficiency virus (HIV), pagtukoy ng mga antibodies sa mga protina nito (immunoglobulins) o antigens (mga virus na protina) sa dugo, laway o ihi ng pasyente. Ang human immunodeficiency virus ay may kakaibang antigenic variability, na nauugnay sa mataas na rate ng transcription (reproduction), na nagpapahirap sa diagnosis ng HIV infection at sa pagpigil nito.
Ang batayan para sa pag-diagnose ng impeksyon sa HIV, tulad ng anumang iba pang nakakahawang sakit, ay:
kasaysayan ng epidemiological,
katangian ng mga reklamo ng pasyente,
klinikal na larawan ng sakit,
data mula sa mga pamamaraan ng pananaliksik sa laboratoryo.
Sa sandaling maitatag ang diagnosis ng impeksyon sa HIV, upang linawin ang likas na katangian ng kurso ng pinagbabatayan na sakit at pangalawang sakit, ang karagdagang pagsusuri sa pasyente ay isinasagawa at ang naaangkop na paggamot ay inireseta.
Ang kalubhaan ng sakit ay tinasa ng antas ng konsentrasyon ng virus sa dugo, ang bilang ng mga CD4 lymphocytes at ang pagpapasiya ng p24 antigen.
Mga pangunahing uri ng diagnosis ng HIV
Virological diagnostics ay batay sa pagtuklas ng HIV sa mga tisyu at biological fluid ng pasyente.
Reaksyon ng kadena ng polymerase (PCR) ay ginagamit upang makita ang virus at masuri ang viral load, na ginagawang posible upang hatulan ang bisa ng partikular na paggamot at hulaan ang kurso ng nakakahawang sakit.
Serological diagnosis Ang impeksyon sa HIV ay kinabibilangan ng pagtuklas ng mga viral antigen at antibodies sa serum ng dugo. Ang pagtuklas ng mga antibodies sa human immunodeficiency virus gamit ang ELISA (enzyme-linked immunosorbent assay) ay ang pangunahing paraan ng pagsusuri sa laboratoryo. Lahat ng positibong resulta ay kinumpirma ng immunoblotting. Mabilis na pagsusuri sa HIV ay batay sa pagtuklas ng mga antibodies sa dugo at mga biyolohikal na likido ng paksa. Ginagamit sa mga kaso kung saan kinakailangan upang mabilis na makakuha ng mga resulta.
Antas ng immunosuppression tinutukoy ng paraan ng pagbibilang ng CD4 at CD8 lymphocytes, na sinusundan ng pagpapasiya ng CD4: CD8 ratio.
Ang bawat isa sa mga pamamaraan sa laboratoryo para sa pag-diagnose ng impeksyon sa HIV ay nailalarawan sa pamamagitan ng isang tiyak na sensitivity (% ng mga tamang natukoy na pagsusuri sa mga halatang (+) na sample) at specificity (% ng mga tamang natukoy na pagsusuri sa mga halatang negatibong sample).Ang mga resulta ng pagsusuri sa HIV ay binibigyang-kahulugan bilang negatibo, positibo o hindi malinaw.
kanin. 1. Sa larawan sa kaliwa, nahawaan ng HIV ang immune cell (ipinahiwatig sa dilaw). Sa larawan sa kanan ay isang lymphocyte na nahawaan ng HIV. Ang mga pinahabang istruktura sa ibabaw ng cell ay sanhi ng sobrang produksyon ng protina.
kanin. 2. Ipinapakita ng larawan ang proseso ng paglabas (budding) ng mga virion mula sa isang nahawaang cell.
Pagsusuri ng dugo para sa HIV. Anong kailangan mong malaman
Sinumang residente ng ating bansa ay maaaring magpasuri ng dugo para sa HIV nang hindi nagpapakilala at walang bayad. Ngunit may mga kategorya ng mga tao na kinakailangang magpasuri para sa HIV. Kabilang dito ang:
lahat ng mga donor ng dugo at mga bahagi nito, pati na rin ang mga tisyu at iba pang biological fluid;
mga taong sumailalim sa pagsasalin ng dugo o paglipat (isinasagawa sa unang 3 buwan pagkatapos ng pamamaraan);
buntis na babae;
mga taong nasugatan bilang resulta ng aksidente;
mga taong may mga klinikal na indikasyon - lagnat, pagtatae, patuloy na ubo at paglaki ng higit sa 2 grupo ng mga lymph node, na tumatagal ng higit sa 1 buwan, hindi maipaliwanag na pagbaba ng timbang, nauugnay sa AIDS at oportunistikong mga nakakahawang sakit, somatic at oncopathology;
Mga dayuhang mamamayan;
mga taong nasa panganib (mga adik sa droga at mga dumaranas ng mga sakit na nakukuha sa pakikipagtalik).
Ang sinumang nalantad sa HIV ay dapat magpasuri para sa HIV.
kanin. 3. Ang pagsusuri ng dugo para sa HIV sa ating bansa ay maaaring gawin nang hindi nagpapakilala at walang bayad.
Kung saan mag-donate ng dugo para sa HIV
Maaaring kumuha ng HIV test nang walang bayad sa mga institusyon ng pangangalagang pangkalusugan na tumatakbo batay sa badyet kung mayroon kang pasaporte at segurong pangkalusugan. Kinakailangan ng mga doktor na panatilihin ang pagiging kompidensyal ng medikal.Maaari kang magpasuri nang walang bayad at hindi nagpapakilala sa AIDS Prevention and Control Centers at kumuha ng medikal na payo doon bago at pagkatapos ng pagsusuri. Ang pagsusuri sa HIV ay isinasagawa sa isang bayad na batayan sa mga komersyal na institusyong medikal. Ang sinumang tao na pansamantalang naninirahan sa teritoryong ito ay maaaring magpa-HIV test.
Ang laboratoryo ay gagawa ng pagsusuri sa dugo para sa HIV gamit ang enzyme immunoassay method (ELISA).
Anonymous HIV test
Sa mga pampublikong institusyong pangkalusugan (mga klinika at ospital), hindi ka maaaring magpasuri ng dugo para sa HIV nang hindi nagpapakilala. Ang impormasyon tungkol sa mga resulta ng pag-aaral ay malalaman sa isang makitid na bilog ng mga doktor na obligadong panatilihin ang pagiging kompidensyal ng medikal.
Umiiral ang mga anonymous na testing room sa AIDS Centers, kung saan ang bawat test ay nakatalaga ng isang numero.
kanin. 4. Ang mga test tube na may dugo ay ipinadala para sa serological testing.
Sapilitang pagsusuri sa HIV
Mayroong apat na pangkat ng populasyon kung saan ang pagsusuri sa HIV ay sapilitan, ngunit hindi sapilitan:
Mga donor ng dugo at iba pang biological na materyal.
Kapag nag-aaplay para sa trabaho sa mga institusyon kung saan ang empleyado ay maaaring makipag-ugnayan sa halatang infected na materyal at mga pasyente.
Mga dayuhang mamamayan sa pagtanggap ng mga visa para sa paninirahan (higit sa 3 buwan) sa teritoryo ng Russian Federation.
Kung may mga klinikal na indikasyon para sa mga taong nasa bilangguan.
Ang sapilitang pagsusuri sa populasyon para sa HIV ay walang saysay at salungat sa paggalang sa karapatang pantao. Ang sapilitang pagsubok sa populasyon sa Russian Federation ay ilegal.
kanin. 5. Ang pagsusuri sa HIV sa mga nahatulan ay isinasagawa ayon sa mga klinikal na indikasyon.
Magkano ang halaga ng pagsusuri sa HIV?
Sa mga institusyon ng gobyerno, libre ang pagsusuri sa HIV, sa mga pribadong klinika ito ay binabayaran:
Ang halaga ng ELISA ay mula 400 hanggang 800 rubles. Ang sagot ay magiging handa pagkatapos ng isang araw. Mayroong isang agarang pagsusuri, kapag ang isang sagot ay maaaring matanggap sa loob ng 2 oras.
Ang halaga ng isang pagsusuri sa HIV gamit ang paraan ng immunoblot ay mula 3 hanggang 5 libong rubles. Ang resulta ay magiging handa sa loob ng 4 - 7 araw.
Ang halaga ng isang pagsusuri sa HIV gamit ang paraan ng PCR ay 10 - 12 libong rubles. Ang resulta ay magiging handa sa loob ng 10 - 14 na araw.
Gaano katagal ang pagsubok para sa HIV?
Sa mga ahensya ng gobyerno, ang deadline para sa pagtanggap ng mga resulta ng HIV test ay:
Kapag gumagamit ng 3rd generation ELISA, ang mga resulta ay nagbibigay ng pinaka-maaasahang resulta 12 linggo mula sa sandali ng pinaghihinalaang impeksyon.
Kapag gumagamit ng 4th generation ELISA – 6 na linggo.
Kapag gumagamit ng PCR - 4 na linggo.
Paano magpasuri para sa HIV
Kinakailangang kumuha ng HIV test nang hindi mas maaga kaysa 3 hanggang 4 na linggo pagkatapos ng pinaghihinalaang impeksyon.
Ang pagsusuri ay isinasagawa nang hindi mas maaga kaysa sa 8 oras pagkatapos kumain.
Ang tanging likido na maaari mong inumin ay plain water.
Para sa pagsusuri, 3 - 5 ml ng dugo ang kinuha mula sa ulnar vein, kung saan ginagamit ang isang regular na hiringgilya o karayom na may bomba.
Bago dalhin sa laboratoryo, ang serum ng dugo ay maaaring maimbak sa refrigerator hanggang sa 7 araw. Nang walang pagpapalamig hindi hihigit sa 30 minuto pagkatapos ng koleksyon.
Ang transportasyon ng mga tubo na may serum ng dugo ay isinasagawa sa mga espesyal na lalagyan ng thermal sa temperatura na +4 - +8OSA.
kanin. 6. Upang masuri ang HIV, kinakailangan upang mangolekta ng 3 - 5 ML ng dugo na kinuha mula sa antecubital vein - kung saan ang isang regular na hiringgilya (larawan sa kaliwa) o isang karayom na may bomba (larawan sa kanan) ay ginagamit.
Kapag ang dugo ay kinuha mula sa isang ugat, imposibleng mahawa ng human immunodeficiency virus.
Maling positibong pagsusuri sa HIV at iba pang uri ng mga resulta ng pagsusuri
Ang mga resulta ng pagsusuri sa HIV ay maaaring bigyang-kahulugan bilang positibo, negatibo o equivocal.
Kaduda-dudang resulta ng pagsusulitpara sa HIV ay nakukuha kapag may mga antibodies sa blood serum na nag-cross-react sa mga protina ng human immunodeficiency virus. Sa kasong ito, ang pagsusuri ay paulit-ulit, at sa panahon ng pagsasagawa nito mas tiyak na mga sistema ng pagsubok ang gagamitin. Kung magpapatuloy ang isang kahina-hinalang resulta, dapat isagawa ang pagsusuri tuwing 1 hanggang 3 buwan sa loob ng anim na buwan.
Positibong resulta ng pagsusuri sa HIV (seropositive) ay nagpapahiwatig ng pagkakaroon ng mga antibodies sa virus sa dugo ng taong nasuri. Sa kasong ito, ang enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) ay inuulit at, kung ang pangalawang positibong resulta ay nakuha, ito ay kinukumpirma ng isang immunoblotting test na may parehong sample ng dugo.
Negatibong resulta ng pagsusuri sa HIV (seronegative) ay nagpapahiwatig ng kawalan ng impeksyon sa HIV, o ang impeksyon ay naganap kamakailan lamang at ang mga antibodies ay hindi pa nabuo sa dugo ng paksa (ang panahon ng "window"). Sa kasong ito, dapat na ulitin ang pagsusuri pagkatapos ng 3 at 6 na buwan.
Maling positibong resulta ng pagsusuri sa HIV ay nakarehistro kapag ang sanhi nito ay hindi ang human immunodeficiency virus, ngunit ang pagbubuntis, isang autoimmune disease, allergy, anumang iba pang nakakahawang sakit, isang kamakailang pagbabakuna, oncopathology, paglipat ng organ at kahit na ordinaryong pagkain (mga buto, maanghang, mataba at maaasim na pagkain na kinakain sa araw. dati, at kahit na may mataas na carbonated na mineral na tubig). Ang isang malaking bilang ng mga maling positibong resulta ay nakukuha kapag nagsusuri sa bahay.
Maling negatibong resulta ng pagsusuri sa HIV ay nagpapahiwatig na ang virus ay naroroon sa dugo ng pasyente, ngunit ang mga antibodies ay hindi pa nabuo.Kapag nagsasagawa ng pagsusuri sa PCR, ang isang maling negatibong resulta ay maaaring makuha sa mga pasyente na nahawaan ng HIV sa panahon ng partikular na paggamot, kapag ang konsentrasyon ng mga virus sa dugo ay napakababa na humahantong sa pagkabigo ng sistema ng pagsubok. Sa karamihan ng mga kaso, ang isang maling negatibong resulta ay nakuha dahil sa isang teknikal na error o depekto sa sistema ng pagsubok, na napakabihirang dahil sa mahigpit na kontrol sa kalidad sa lahat ng antas.
Ang pagsusuri sa HIV ay dapat na ipagpaliban nang hindi bababa sa dalawang linggo pagkatapos ng isang nakakahawang sakit o pagbabakuna.
Mga sistema ng pagsubok na tumutukoy sa pagkakaroon ng mga antibodies sa HIV
Sa pamamagitan ng pagsubok para sa mga antibodies sa human immunodeficiency virus, ang tugon ng katawan sa impeksyon ay tinasa. Para sa layuning ito, ang isang enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) ay ginagamit upang makita ang mga antibodies sa mga viral protein at isang confirmatory immunoblotting analysis (Western blot), na tumutukoy sa reaksyon ng mga antibodies sa mga viral protein.
Antibodies sa HIV
Ang mga human immunodeficiency virus ay may mga antigenic na katangian at, kapag pumasok sila sa katawan ng tao, nagiging sanhi ng synthesis ng mga antibodies - mga tiyak na immunoglobulin. Gamit ang mga modernong sistema ng pagsusuri, ang klase ng mga immunoglobulin (antibodies) ay maaaring matukoy sa serum ng dugo at iba pang biological fluid ng isang pasyenteng HIV. Ang mga immunoglobulin ng klase ng IgM ay lumalabas bago ang lahat (isang linggo pagkatapos ng impeksyon). Ang kanilang paglaki ay sinusunod sa loob ng isang buwan at pagkatapos ay nagpapatuloy sila ng halos 30 araw. Ang mga immunoglobulin ng klase ng IgG ay umiikot sa dugo sa loob ng ilang taon. Ang kanilang pagtuklas ay isang tagapagpahiwatig ng pagkakaroon ng impeksyon sa HIV.
Lumilitaw ang mga antibodies sa HIV sa loob ng 2-4 na linggo.pagkatapos ng impeksyon at pagkatapos ay makikita ang mga ito sa dugo sa buong sakit.
Panahon ng "Window" para sa HIV
Ang mga antibodies ay hindi agad nagagawa sa katawan ng isang nahawaang tao. Sa una, ang impeksyon sa HIV ay hindi nagpapakita ng sarili sa anumang paraan. Ang mga antibodies ay lumilitaw sa dugo sa average 2 - 3 buwan mula sa sandali ng impeksyon (mula 2 linggo hanggang 6 na buwan). Ang panahong ito ay tinatawag na "window", kapag ang mga pagsusuri para sa mga antibodies ay negatibo pa rin, ngunit ang mga virus ay dumarami nang husto, at ang pasyente mismo ay nagiging mapanganib sa mga tuntunin ng pagkahawa sa mga taong nakikipag-ugnayan. Ang isang nahawaang tao ay maaaring makilala pagkatapos ng mas maikli (1 - 2 linggo) na panahon pagkatapos ng impeksyon, kung saan ginagamit ang polymerase chain reaction (PCR). Gayunpaman, dahil sa mataas na halaga nito, ang ganitong uri ng pag-aaral ay hindi ginagamit para sa screening.
Enzyme immunoassay para sa pag-diagnose ng HIV
Sa 90 - 95% ng mga nahawaang indibidwal, lumilitaw ang mga antibodies sa serum ng dugo 3 buwan pagkatapos ng impeksiyon Sa isang maliit na bahagi ng mga pasyente (5 - 9%), lumilitaw ang mga antibodies sa panahon mula 3 hanggang 9 na buwan at sa 0.5 - 1% -. sa higit sa huli na mga petsa. Sa huling yugto ng AIDS, ang bilang ng mga antibodies ay bumababa nang malaki, at sa ilang mga kaso ay ganap na nawawala.
Mula noong 1985, ang pamamaraan na ito ay ginamit sa Russian Federation para sa layunin ng mass research. Ito ay madaling ipatupad, nagpapakita ng medyo tumpak na mga resulta, at mura kumpara sa iba pang mga pamamaraan. Dahil sa posibilidad na makakuha ng mga maling positibong resulta, ang lahat ng positibong resulta ay sinusuri ng dalawang beses, pagkatapos kung saan ang serum ng dugo ng pasyente ay sinusuri gamit ang isang confirmatory test - isang immunoblot. Gumagamit ito ng parehong sample ng dugo. Kung mayroong 2 positibong resulta gamit ang ELISA at immunoblot sa isang sample, gagawin ang diagnosis ng impeksyon sa HIV.
Sa Russian Federation, ang ika-4 na henerasyong ELISA ay karaniwang ginagamit. Ang pag-aaral ay isinasagawa upang makuha ang kabuuang spectrum ng mga antibodies laban sa mga protina ng HIV (antigens) - p24 at gp160.
Nakikita ng pagsusuri ang parehong mga antibodies na ginawa ng katawan ng pasyente at mga p24 antigens (mga protina ng virus). Ang panahon ng palugit para sa ika-4 na henerasyon ng mga pagsubok ay mas maikli. Sa loob ng isang buwan maaari kang makakuha ng maaasahang mga resulta. Gayunpaman, ayon sa mga eksperto sa pangangalagang pangkalusugan ng Russia, ang mga tuntunin ng 6, 8 o 12 na linggo ay mas maaasahan.
kanin. 8. Ang larawan ay nagpapakita ng enzyme immunoassay analyzers.
kanin. 9. Ang larawan ay nagpapakita ng isang awtomatikong enzyme immunoassay analyzer.
Para sa paunang pagsusuri ng mga grupo ng mga tao upang makita ang impeksyon sa HIV, ang pamamaraang ELISA lamang ang ginagamit.
Paraan ng immunoblotting
Ang paraan ng immunoblotting ay mas tumpak kaysa sa ELISA ayon sa karamihan ng mga eksperto, ito ang paraan ng sanggunian. Sa tulong nito, ang mga antibodies sa mga protina ng HIV ay nakita sa serum ng dugo. Ang pamamaraan ay ginagamit upang kumpirmahin ang mga resulta na nakuha sa panahon ng ELISA. May mataas na pagtitiyak. Ang mga maling positibong resulta ay bihira. Ang pagiging maaasahan ng mga resulta na nakuha ay umabot sa 99%. Ang immunoblotting ay isang mamahaling pamamaraan at nangangailangan ng mataas na espesyalisasyon ng espesyalista na nagsasagawa ng pag-aaral. Maaaring makuha ang mga kaduda-dudang resulta.
Ang pamamaraan ay batay sa paghihiwalay ng HIV antigens (protina) gamit ang electrophoresis batay sa molekular na timbang. Ang mga antibodies laban sa mga protina ng capsid ay ang unang natukoy sa panahon ng impeksyon.Gag" (p24 at p17) at ang precursor na p55. Sinusundan sila ng mga antibodies laban sa mga supercapsid na protina.Env"(glycoproteins gр 160, gр120, gр41 at proteins p88) at non-structural proteins "Pol" (р31, р51 at р66). Sa ilang mga kaso, ang mga antibodies laban sa mga gene ay maaaring makita "vpu», «vpr», «vif», «tat», «nef», «rev», «tat».
Ang serum ng dugo ng mga pasyente na may HIV-1 at HIV-2 ay naglalaman ng mga antibodies sa lahat ng mga protina ng viral, ngunit upang kumpirmahin ang diagnosis, tanging mga antibodies sa mga protina na p24, gp41, gp120 at gp160 ang nakikita sa HIV-1, at mga antibodies sa mga protina na gp105, gp140 at gp140 sa HIV-2.
Kung mayroong 2 positibong resulta gamit ang ELISA at immunoblot sa isang sample, gagawin ang diagnosis ng impeksyon sa HIV.
kanin. 10. Apparatus para sa pagsasagawa ng immunoblot research.
kanin. 11. Ang diagnosis ng impeksyon sa HIV ay ginawa sa pagkakaroon ng 2 positibong resulta gamit ang ELISA at immunoblot sa isang sample.
Mga sistema ng pagsubok para sa pagbibilang ng mga CD4 lymphocytes
Isa sa mga immunological test na ginagamit para sa HIV infection ay ang paraan ng pagbibilang ng CD4 at CD8 lymphocytes sa dugo.
CD4 lymphocytes (T helper cells) ay apektado ng immunodeficiency virus. Ang unti-unting pag-ubos ng kanilang populasyon ay humahantong sa pagbaba ng kaligtasan sa sakit at ang katawan ng pasyente ay tumitigil sa paglaban sa impeksiyon. Ang mga bilang ng CD4 lymphocyte ay ginagawa sa pamamagitan ng flow cytometry gamit ang mga automated analyzer o manu-manong gamit ang optical o fluorescence microscopy. Tinutukoy ng bilang ng CD4 lymphocytes ang oras ng pagsisimula ng partikular na paggamot (antiretroviral therapy) at ang pag-iwas sa mga oportunistikong impeksyon, at sinusuri ang pagiging epektibo ng paggamot.
Kapag ang bilang ng mga CD4 lymphocytes sa serum ng dugo ay 500 o mas mababa sa bawat 1 ml, ito ay nagpapahiwatig ng pag-unlad ng immunodeficiency.
Kapag ang bilang ng mga CD4 lymphocytes ay bumaba sa 200 bawat 1 ml (ang pamantayan ay mula 600 hanggang 1900 na mga cell bawat 1 ml), ang nakuha na immunodeficiency syndrome (AIDS) ay bubuo.
Kapag ang antas ng CD4 lymphocytes ay bumaba sa 50 o mas mababa sa bawat 1 μl, ang AIDS ay pumapasok sa terminal stage.
Ang proporsyon ng CD4 lymphocytes sa lahat ng lymphocytes ay karaniwang mga 40%.Ang pagbaba sa rate sa 20% ay nagpapahiwatig ng pag-unlad ng AIDS.
CD8-lymphocytes (T-killers, sa English. mamamatay tao - mamamatay) sirain ang mga virus ng HIV sa pamamagitan ng cytolysis. Ang kanilang paglaganap (pagtaas ng bilang) ay nakasalalay sa aktibidad ng mga selulang T helper. Sa panahon ng impeksyon sa HIV, ang bilang ng CD4 at CD8 lymphocytes ay bumababa, ngunit ang antas ng CD4 lymphocytes ay nababawasan higit sa lahat. Ang normal na ratio ng CD4/CD8 ay 1.5 - 2.5. Sa isang pagbawas sa bilang ng mga CD4 lymphocytes, isang pagbawas sa index ay sinusunod.
Ang halaga nito na mas mababa sa 1 ay nagpapahiwatig ng isang binuo na immunodeficiency na may ratio na 0.6 - 0.8, bubuo ang AIDS.
Sa pagtanggap ng mga positibong resulta ng pagsusuri, ang isang tao ay dapat magparehistro sa ahensya ng gobyerno na Center for Prevention and Control of AIDS, kung saan ang kanyang kondisyon ay susubaybayan at magrereseta ng sapat na partikular na paggamot.
kanin. 12. Sa larawan, ginagamit ang mga automatic flow analyzer upang mabilang ang mga CD4 lymphocytes sa dugo ng taong pinag-aaralan.
Sa nakalipas na mga taon, ang isang molecular genetic method para sa pag-diagnose ng HIV infection—polymerase chain reaction (PCR)—ay lalong lumaganap. Sa tulong nito, ang genetic na materyal ng pathogen ay natutukoy - RNA - na 1 - 2 linggo pagkatapos ng di-umano'y impeksiyon, at ang mataas na sensitivity ng pagsubok ay nagpapahintulot sa iyo na makita ang mga virus ng RNA kahit na kakaunti lamang ang mga ito sa pagsubok. materyal. Ang pamamaraan na ito ay mahal at samakatuwid ay hindi kasalukuyang ginagamit para sa screening. Bilang karagdagan, ang isang makabuluhang problema sa pag-aaral ay ang posibilidad na makakuha ng mga maling positibong resulta.
Ang kakanyahan ng pamamaraan ng PCR para sa HIV
Ang kakanyahan ng pamamaraang ito ay upang makakuha ng maraming kopya ng virus na RNA (nucleic acid), na kasunod na kinilala sa pamamagitan ng kanilang katangian na istraktura at sa tulong ng mga may label na enzyme o isotopes.
Mga posibilidad ng PCR para sa impeksyon sa HIV
Gamit ang PCR, maaari mong lutasin ang mga kaduda-dudang resulta na nakuha kapag gumagamit ng immunoblotting technique, masuri ang impeksyon sa HIV sa mga unang yugto (sa unang bahagi ng 1-2 linggo pagkatapos ng pinaghihinalaang impeksyon), subaybayan ang bisa ng antiretroviral therapy, at matukoy ang yugto ng sakit. .
Inirerekomenda na kumuha ng mga pagsusuri sa PCR 4 na linggo mula sa petsa ng inaasahang panganib.
kanin. 13. Sa larawan sa kaliwa ay isang normal na T-lymphocyte, sa kanan ay isang T-lymphocyte na nahawaan ng HIV. Nakikita ang maraming bula, kung saan lumitaw ang mga bagong nabuong virus (maliit na bilugan na pormasyon). Gamit ang PCR, ang impeksyon sa HIV ay makikita sa loob ng 1 - 2 linggo pagkatapos ng pinaghihinalaang impeksyon.
Mga kalamangan ng pamamaraan ng PCR para sa HIV
Gamit ang PCR, posibleng makita ang virus mismo at ang dami nito.
Posibilidad ng paggamit sa mga batang wala pang isa at kalahating taong gulang.
Suriin ang pagiging epektibo ng paggamot.
Tukuyin ang kalubhaan at pagbabala ng sakit.
Mga disadvantages ng PCR technology para sa HIV
Mataas na halaga ng pananaliksik.
Pagkakaroon ng mga dalubhasang laboratoryo.
Tagal ng pagkuha ng mga resulta (hanggang 4 na linggo).
Sino ang nangangailangan ng PCR?
Pagtanggap ng resulta sa loob ng 7-10 araw para sa mga tao sa kaso ng pinaghihinalaang impeksyon, kapag ang resulta na nakuha sa maikling panahon ay ninanais.
Upang matukoy ang petsa ng pagsisimula at suriin ang pagiging epektibo ng paggamot.
Ginagawa ang PCR sa mga nahawaang buntis 4 na linggo bago ipanganak upang mapagpasyahan kung gagamit ng cesarean section.
Mga bagong silang mula sa mga nahawaang ina. Ang positibong resulta na nakuha ng dalawang beses ay nagpapahiwatig na ang bata ay nahawaan.
Sa ilalim ng normal na mga kondisyon, ang PCR ay hindi ginagamit para sa pagsusuri at pag-diagnose ng impeksyon sa HIV.
RNA PCR at DNA PCR. Ano ang pagkakaiba
Pinatutunayan ng RNA PCR ang pagkakaroon ng immunodeficiency virus sa dugo at ang dami ng nakitang RNA. Ang pag-aaral na ito ay ginagamit sa mga nasuri na indibidwal upang suriin ang pagiging epektibo ng therapy.
Gamit ang DNA PCR, ang pagkakaroon ng virus sa mga mononuclear cell sa mga bata ay tinutukoy kapag pinipigilan ng mga antibodies sa human immunodeficiency virus sa ina ang paggamit ng ELISA method.
Viral load
Ang viral load ay tinutukoy sa pamamagitan ng pagbibilang ng bilang ng mga kopya ng RNA sa 1 ml ng plasma ng dugo, na ginagawang posible upang matukoy ang yugto ng sakit, pag-aralan ang partikular na paggamot na ibinigay, at matukoy ang kalubhaan at pagbabala ng sakit. Kung mas mataas ang viral load, mas kaunting CD4 lymphocytes ang naitala sa plasma ng dugo.
Interpretasyon ng mga resulta:
Maaaring hindi natukoy ang RNA, o ang bilang ng mga kopya ng RNA ay mas mababa sa 20 bawat ml. plasma.
Natukoy ang RNA sa limitasyon ng pagiging sensitibo - mas mababa sa 20 kopya/ml.
RNA mula 20 hanggang 106 Ang mga kopya sa 1 ml ng plasma ng dugo ay nagpapahiwatig ng pagiging maaasahan ng resulta.
Higit sa 10 kopya ng RNA6Ang ml ay ang pinakamataas na limitasyon ng linear range.
Ang pagtaas ng viral load sa isang pasyenteng may HIV infection ng tatlo o higit pang beses ay isang klinikal na makabuluhang resulta.
Ang pagsubaybay sa viral load ay isinasagawa tuwing 3 buwan sa mga pasyente na hindi pa nakakatanggap ng paggamot. Kung sinimulan ang antiretroviral therapy, ang kontrol ay isinasagawa pagkatapos ng 2-8 na linggo.
kanin. 14. Ang PCR ay lalong naging popular sa mga nakaraang taon.
kanin. 15. Mga amplifier para sa PCR.
Ang isang pagsusuri sa HIV ay dapat isagawa sa mga unang yugto ng impeksyon at pana-panahon sa panahon ng sakit, na titiyakin ang napapanahong pangangasiwa ng antiretroviral therapy upang maiwasan ang pag-unlad ng mga mapanganib na nakakahawang proseso at oncological.
Ang mga virus, ang RNA nito, DNA, antigens at antibodies ay maaaring makita hindi lamang sa serum ng dugo, kundi pati na rin sa tamud, laway, mga nilalaman ng vaginal, atbp. Ang HIV ay nilinang sa isang kultura ng mga selulang lymphocyte. Ang pamamaraan ay lubos na sensitibo at tiyak (hanggang sa 100%), ngunit ang mataas na halaga ng pag-aaral ay hindi pinapayagan ang paggamit nito sa pang-araw-araw na gawain sa laboratoryo.
Bilang resulta ng pinsala sa mga hematopoietic na organo ng mga virus ng immunodeficiency ng tao, ang pagsugpo sa hematopoiesis ay sinusunod, na kung saan ay ipinahayag sa pamamagitan ng pagbawas sa bilang ng mga lymphocytes (lymphopenia), neutrophils (neutropenia), platelets (thrombopenia) at anemia. Bilang karagdagan, ang pagkasira ng mga populasyon ng cell ay naiimpluwensyahan ng mga proseso ng autoimmune na nabubuo sa mga pasyenteng nahawaan ng HIV. Ang mga immunoglobulin ng IgG ay nangingibabaw sa serum ng dugo ng mga pasyente.
kanin. 16. Pagkuha ng dugo mula sa ugat at daliri para sa pagsusuri.
Ngayon, kahit sino ay maaaring magpasuri ng HIV nang hindi nagpapakilala at walang bayad sa loob ng ilang minuto, at pinapayagan ka ng mga modernong kagamitan at sinanay na tauhan na makuha ang pinakatumpak na mga resulta.
