Moderní diagnostika černého kašle umožňuje rychle stanovit správnou diagnózu a předepsat adekvátní léčbu, která může výrazně zmírnit stav pacienta a provádět včasná preventivní opatření, zabraňující infekci ostatních a kontaktních osob. Analýza černého kašle pomocí bakteriologické výzkumné metody je hlavní při diagnostice onemocnění.
Zkušenosti z mnoha studií však dokazují, že pro přesnou laboratorní diagnostiku onemocnění je nutné použít několik komplementárních technik. Nejúčinnější kombinací je kombinace bakteriologické metody a polymerázové řetězové reakce (PCR).
Rýže. 1. Křečovitý záchvatovitý kašel je dominantním příznakem černého kašle u dětí.
Klinické metody diagnostiky černého kašle
Rozpoznání černého kašle v raných fázích vývoje onemocnění podléhá velkým potížím, které souvisí s několika faktory:
Nemoc se vyvíjí pomalu. K jeho kulminaci dochází 2–3 týdny po nástupu prvních příznaků onemocnění.
Primární toxikóza a výrazná teplotní reakce na začátku onemocnění, tak charakteristická pro mnoho dětských infekčních onemocnění, u černého kašle chybí. Proto je laboratorní diagnostika často opožděná.
U očkovaných dětí a dospělých jsou nejčastěji zaznamenávány atypické formy onemocnění, u kterých se mění charakteristika kašle (nedochází k záchvatům křečovitého kašle ani k recidivám).
Kritéria pro diagnostiku černého kašle v prekonvulzivním (katarálním) období:
Kontakt s pacienty, kteří mají dlouhodobý kašel.
Pomalý vývoj onemocnění. Normální nebo nízká tělesná teplota. Stav pacienta je uspokojivý.
Absence výrazných katarálních jevů.
Zpočátku kašel a poté přetrvávající suchý kašel, než se změní v záchvatovitý křečovitý kašel, trvá 1 - 2 týdny.
Symptomatická terapie nemá žádný účinek.
Chrastění v plicích často není slyšet. Vysoké hladiny bílých krvinek (leukocytóza) a lymfocytů (lymfocytóza) s normální rychlostí sedimentace erytrocytů (ESR).
Detekce patogenů černého kašle v plodinách (Bordetella pertussis).
Rýže. 2. Fotografie ukazuje růžovou bakterii Bordetella pertussis pod mikroskopem (Gramovo barvení). Pertusové tyčinky jsou krátké, kokosového tvaru, konce jsou zaoblené, délka je 0,5 - 2 mikrony, v nátěrech jsou umístěny samostatně, méně často - v párech.
Rýže. 3. Pohled na bakterie černého kašle v elektronovém mikroskopu.
Klasickou metodou laboratorního potvrzení onemocnění je izolace původců černého kašle z hlenu nosohltanu. Výsev patogenů zřídka dosahuje 80 %. V průměru nepřesahuje 10 - 30 %. Důvody jsou následující:
Pomalý růst pertussis bacilli na živných médiích.
Nízká kvalita živných médií.
Pozdější vyšetření pacienta.
Kontaminace testovaného materiálu bakteriální flórou.
Chyby při sběru testovacího materiálu.
Použití antibiotik do doby odběru materiálu na bakteriologické vyšetření.
Materiálem pro bakteriologické vyšetření je stěr z nosních cest (oba) a zadní stěny nosohltanu (ne z hrtanu!).
K odběru stěru se používá tampon Dacron nebo metoda náplasti proti kašli.
Výsev se provádí okamžitě na živnou nebo transportní půdu. Materiál je uložen v transportním médiu nejdéle jeden den. Předběžná odpověď je obdržena do 3–5 dnů. Konečná odpověď je získána za 5 - 7 dní.
Vyšetření se podrobují osoby podezřelé z onemocnění a osoby, jejichž kašel přetrvává déle než 7, ale ne více než 30 dnů.
Rýže. 4. Na fotografii je kolonie Bordetella pertussis. Pro kultivaci se používá médium Bordet-Gengou (foto vpravo) nebo kasein-uhlí agar (foto vlevo). Na těchto půdách dochází k tvorbě kolonií 3–4 dny po výsevu. Kolonie mikrobů jsou lesklé, šedo-krémové barvy, vzhledem připomínají kapičky rtuti a mají viskózní konzistenci. Po odstranění kolonií z živného média zůstane krémová stopa.
Rýže. 5. Při prohlížení kolonií Bordetella pertussis pod světelným mikroskopem můžete vidět, jak kolonie vrhají stín (světelný kužel).
Diagnostika černého kašle pomocí PCR (polymerázová řetězová reakce) je v moderních podmínkách nejslibnější technikou. Vysoká citlivost testu umožňuje detekovat DNA bakterií, i když jich je v testovaném materiálu několik.
Metoda stanovení DNA Bordetella pertussis pomocí PCR byl vyvinut v Novosibirsku v roce 1999. Oproti bakteriologické metodě má řadu výhod:
Vysoká citlivost této metody. I přítomnost jednoho nebo více patogenů ve vzorku umožňuje získat pozitivní výsledek.
Tato metoda je vysoce specifická. Podíl pozitivních výsledků je 85 - 100 %. Kontaminace sekundární mikroflórou nemá vliv na výsledky studie.
Výsledek se dostaví do 1 dne.
Tato diagnostická metoda nenahrazuje metodu kulturní.
Bakteriologická metoda a technika PCR jsou doplňkové a spolehlivé testy pro identifikaci Bordetella pertussis.
Rýže. 6. Fotografie ukazuje typy kolonií Bordetella pertussis.
Testování na pertusi pomocí techniky fluorescenčních protilátek
Nízký podíl bakteriologického potvrzení onemocnění se stal podnětem pro vývoj dalších, citlivějších metod pro identifikaci původce černého kašle. V 60. letech metoda pro určování Bordetella pertussis pomocí fluorescenčních protilátek. Speciálně zpracované nátěry jsou pozorovány pod fluorescenčním mikroskopem. Tento test smí provádět pouze vysoce kvalifikovaný personál; Jinak je možný velký počet falešně pozitivních výsledků. Tato technika se v praktické medicíně používá jen zřídka.
Rýže. 7.Speciálně zpracované nátěry jsou pozorovány pod fluorescenčním mikroskopem.
Testování na černý kašel pomocí sérologických testů
Původci černého kašle obsahují látky (antigeny), které mohou vyvolat imunitní odpověď v těle nakaženého člověka (tvorba protilátek). Díky sérologickým studiím jsou identifikovány a studovány protilátky a antigeny v krevním séru pacienta. Jsou založeny na imunitních reakcích těla. Specifičnost tohoto typu studie nedosahuje 100 %, proto jsou výsledky sérologické studie hodnoceny pouze s přihlédnutím ke klinickému obrazu onemocnění. Sérologické metody se také používají k provádění epidemiologické analýzy.
K diagnostice černého kašle se používá několik testů:
Enzymově vázaný imunosorbentní test (ELISA) - citlivý, specifický a relativně levný test. K jeho provedení se používají proteinové antigeny bakterií černého kašle, pomocí kterých se měří sérové imunoglobuliny tříd G, M a A, jejichž hladina v krvi po onemocnění nebo imunizaci stoupá. Sérové imunoglobuliny M se zvyšují v časných stádiích onemocnění, sérové imunoglobuliny G - v pozdějších stádiích.
Diagnostika černého kašle v pozdějších stádiích onemocnění se provádí pomocí aglutinačních reakcí: RPGA, RNGA A RA. Základem takových reakcí je schopnost korpuskulárních antigenů slepit se pomocí protilátek.
Změny v buněčném složení krve: vysoké hladiny leukocytů (leukocytóza) a lymfocytů (lymfocytóza) s normální rychlostí sedimentace erytrocytů (ESR) jsou častěji detekovány u neočkovaných dětí.
Bez ohledu na to, v jaké formě se černý kašel vyskytuje, dnes mají lékaři možnost provést včasnou laboratorní diagnostiku tohoto onemocnění.
Rýže. 8. Na fotografii vlevo jsou leukocyty, vpravo lymfocyty. S černým kašlem se jejich počet výrazně zvyšuje.
Diferenciálně diagnostická metoda umožňuje vyloučit u pacientů řadu možných onemocnění a stanovit jedinou správnou diagnózu. Správně provedená diferenciální diagnostika černého kašle umožňuje pacientovi včas podat adekvátní léčbu a tím usnadnit průběh onemocnění.
Černý kašel by měl být odlišen od ARVI, paraworm, bronchitida, bronchiální astma, přítomnost cizích těles v dýchacím traktu, pneumonie, tuberkulózní bronchoadenitidy atd.
Největší obtíž je v diagnostikování onemocnění. v katarálním období. Černý kašel v tomto období má mnoho podobností s celou skupinou akutních respiračních virových onemocnění, dále spalničkami a paradávivým kašlem. Černý kašel v tomto období je charakterizován přetrvávajícím, narůstajícím kašlem a nepřítomností nebo slabou závažností katarálních jevů horních cest dýchacích.V tomto období je nutné používat expresní metody a bakteriologickou diagnostiku černého kašle.
Při záchvatech křečovitého kašle černý kašel je třeba odlišit od akutních respiračních onemocnění s obstrukčním syndromem, akutních virových onemocnění s převládajícím poškozením dolních částí dýchacího aparátu, respirační mykoplazmózy, tuberkulózní bronchoadenitidy, aspirace cizího tělesa, tumoru mediastina, bronchopulmonální formy cystické fibrózy.
Rýže. 9. Moderní diagnostika černého kašle umožňuje rychle stanovit správnou diagnózu. A včasná adekvátní léčba výrazně zmírní stav nemocného dítěte a provede preventivní opatření, čímž zabrání infekci kontaktních osob.
