Virushepatiitti C on vakava lääketieteellinen ja sosiaalinen ongelma. Tällä hetkellä maailmassa noin 180 miljoonaa ihmistä kärsii tästä taudista, ja 350 tuhatta kuolee vuosittain. Taudin pitkäaikainen piilevä (oireeton) kulku johtaa viivästyneeseen diagnoosiin. Hepatiitti C:n analyysi suoritetaan taudin diagnosoimiseksi, erotusdiagnoosiksi ja sen avulla määritetään aiemmin kärsinyt sairaus "jaloissa".
Tutkimusta käytetään ihmisillä, joilla on C-hepatiittioireita, kohonneita maksaentsyymiarvoja, hankittaessa tietoa aikaisemmasta, etiologiasta määrittelemättömästä sairaudesta, riskiryhmissä ja seulontatutkimuksissa.
Hepatiitti C:n diagnoosi suoritetaan kahdessa vaiheessa:
Vaihe 1. Viruksen vasta-aineiden (anti-HCV) esiintymisen määrittäminen veren seerumissa.
Vaihe 2. Jos anti-HCV on läsnä, suoritetaan testi RNA:n (ribonukleiinihapon) esiintymisen varalta hepatiitti C:n PCR-menetelmällä. Testin avulla voit tunnistaa prosessin vaiheen - "aktiivinen/inaktiivinen" ja päättää hoidon tarvetta.Tiedetään, että noin 30 % tartunnan saaneista pääsee eroon tartunnasta itse, koska heillä on vahva immuunijärjestelmä eivätkä he tarvitse hoitoa. PCR:llä määritetään viruksen genotyyppi. Eri genotyypit reagoivat hoitoon eri tavalla.
Maksavaurion laajuus määritetään biopsialla tai muilla invasiivisilla ja ei-invasiivisilla testeillä (esimerkiksi fibrotestillä). Maksan steatoosin aste määritetään steatotestillä. Kaikissa tapauksissa hepatiitti C:n diagnoosin tulee perustua epidemiologisen tutkimuksen tietoihin, sairauden kliiniseen kuvaan ja biokemiallisen verikokeen tietoihin.
Riisi. 1. Viruksen maksavaurion vakavat seuraukset - voimakas askites.
C-hepatiittitesti: anti-HCV
Virusten vasta-aineet (anti-HCV) ovat spesifisiä infektion merkkiaineita. Sairaan ihmisen kehossa muodostuu spesifisiä vasta-aineita virusproteiineille (antigeeneille) - IgM- ja IgG-luokkien immunoglobuliineille (anti-HCV IgM/IgG).
Jos vasta-aineille saadaan positiivinen tulos, suoritetaan varmistustesti - määritetään viruksen rakenteellisten ja ei-rakenteellisten proteiinien vasta-aineiden kokonaismäärä. Anti-HCV IgM tuotetaan viruksen E1 ja E2 rakennevaippaproteiineille, nukleokapsidiproteiinille C-cor (anti-HCV IgG) ja 7 ei-rakenteelliselle entsyymiproteiinille NS (anti-HCV NS IgG).
Entsyymi-immunosorbenttimääritystä (ELISA) käytetään C-hepatiittiviruksen vasta-aineiden havaitsemiseen. (+) ELISA-tulosten vahvistamiseksi käytetään varmistustestejä - RIBA (rekombinantti immunoblottaus), harvemmin Inno-Lia (synteettisten peptidien analyysi).
Anti-HCV IgM testi
IgM-vasta-aineita ilmaantuu veren seerumiin 4–6 viikkoa tartunnan jälkeen ja saavuttaa nopeasti huippunsa. Akuutin prosessin lopussa (5 - 6 kuukauden kuluttua) niiden pitoisuus laskee.
Pitkäaikainen anti-HCV IgM:n rekisteröinti osoittaa, että hepatiitti C on muuttunut krooniseksi.
IgM-tasojen nousu kroonisen jakson aikana osoittaa infektioprosessin uudelleenaktivoitumista.
IgM-immunoglobuliinien taso mahdollistaa hoidon tehokkuuden arvioinnin.
Anti-HCV IgG testi
IgG-vasta-aineet ilmaantuvat potilaan veriseerumiin 11–12 viikkoa tartunnan jälkeen. Huippupitoisuudet kirjataan 5–6 kuukauden kuluttua. Lisäksi vasta-aineet pysyvät vakiona koko taudin keston ajan akuutissa ja toipumisjaksossa.
Viruksen kokonaisvasta-aineita (anti-HCV-kokonaismäärä) käytetään "tuoreiden" tautitapausten diagnosoimiseen. Kokonaisvasta-aineet ovat vasta-aineita nukleokapsidiproteiinille C - cor (anti-HCV IgG) ja 7 ei-rakenneentsyymiproteiinille NS (anti-HCV NS IgG) - anti-HCV NS3, anti-HCV NS4 ja anti-HCV NS5.
Hepatiitti C -viruksen kokonaisvasta-aineet ilmaantuvat tartunnan saaneen henkilön veren seerumiin 11 - 12 viikkoa tartunnan alkamisen jälkeen, saavuttavat huippunsa 5 - 6 kuukauden kohdalla ja pysyvät vakiona koko taudin keston ajan akuutissa jaksossa. ja 5-9 vuotta toipumisajan jälkeen.
Jokaisella vasta-ainetyypillä on oma diagnostinen arvonsa:
Anti-HCV C (cor) ovat tärkeimmät indikaattorit kosketuksesta hepatiitti C -viruksiin.
Anti HCV NS3 on yksi ensimmäisistä, jotka havaitaan serokonversioprosessissa (vasta-aineiden tuotanto vasteena viruksen läsnäololle), osoittaa tartuntaprosessin vakavuuden ja osoittaa suurta viruskuormaa. Heidän avullaan C-hepatiitti havaitaan potilailla, jotka eivät epäile saavansa tartuntaa. Anti-HCV NS3:n pitkittynyt esiintyminen veren seerumissa osoittaa prosessin kroonisuuden suuren riskin.
Anti HCV NS4 osoittaa, että hepatiitti C:llä on pitkä kulku. Vasta-ainetiitterien tasoa voidaan käyttää maksavaurion asteen arvioimiseen.
Anti-HCV NS5 osoittaa viruksen RNA:n läsnäolon. Niiden havaitseminen akuutissa jaksossa on prosessin kroonisuuden ennakkoedustaja. Korkeat vasta-ainetiitterit hoidon aikana osoittavat, että potilas ei reagoi hoitoon.
Anti HCV NS4 ja anti HCV Tämän tyyppiset vasta-aineet ilmaantuvat myöhään hepatiitin kehittyessä. Niiden väheneminen osoittaa tarttuvan prosessin remission muodostumista. Hoidon jälkeen NS4- ja NS5-vasta-aineiden tiitterit laskevat 8-10 vuoden aikana. Tämäntyyppinen vasta-aine ei suojaa uudelleentartunnalta.
Riisi. 2. Makrovalmiste. Maksakirroosi on virushepatiitti C:n vakava komplikaatio.
Hepatiitti C -viruksen vasta-aineiden puuttuminen on merkitty termillä "normaali". Tämä ei kuitenkaan aina tarkoita, että henkilöllä ei ole sairautta. Siten vasta-aineiden puuttuminen tartunnan saaneen henkilön verestä kirjataan ennen kuin ne ilmestyvät vereen - jopa 6 kuukautta tartunnan hetkestä (keskimäärin 12 viikon kuluttua). Ajanjaksoa, jolloin tartunnan saaneen henkilön veressä ei ole vasta-aineita, kutsutaan "serologiseksi ikkunaksi". Kolmannen sukupolven testijärjestelmillä (ELISA-3) on korkea spesifisyys (jopa 99,7 %). Noin 0,3 % johtuu vääristä positiivisista tuloksista.
Anti-HCV:n esiintyminen viittaa nykyiseen tai menneeseen infektioon.
IgM-vasta-aineiden ja ydin-IgG-vasta-aineiden havaitseminen, Core-IgG-vasta-ainetiitterien nousu ja (+) PCR-tulokset akuutin hepatiitin kliinisissä ja laboratoriotutkimuksissa osoittavat taudin akuutin vaiheen.
IgM-vasta-aineiden, anti-HCV Core IgG-, anti-HCV NS IgG- ja (+) PCR-tulokset taudin kliinisten ja laboratoriomerkkien esiintyessä viittaavat kroonisen hepatiitti C:n uudelleenaktivoitumiseen.
Anti-HCV Core IgG:n ja anti-HCV NS IgG:n havaitseminen ilman kliinisiä ja laboratoriotutkimuksia taudista ja negatiivinen PCR-tulos osoittaa, että potilaalla on piilevässä vaiheessa krooninen hepatiitti.
Riisi. 3. Makroskooppinen näyte maksasta. Primaarinen maksasyöpä on vakava C-hepatiittikomplikaatio.
Polymeraasiketjureaktio (PCR) on "kultastandardi" virushepatiitti C:n diagnosoinnissa. Testin korkea herkkyys mahdollistaa virusten geneettisen materiaalin (RNA:n) havaitsemisen, vaikka niitä olisi testissä vain muutama materiaalia. PCR kykenee havaitsemaan viruksen RNA:n kauan ennen vasta-aineiden ilmaantumista veren seerumiin, mutta aikaisintaan viidennestä päivästä tartunnan jälkeen. Sairauden sattuessa virus-RNA:iden PCR havaitaan ei vain veriseerumista, vaan myös maksabiopsioista.
Polymeraasiketjureaktion avulla voit määrittää hepatiitti C -virusten esiintymisen tai puuttumisen veressä ja päättää hoidon aloittamisesta. Tiedetään, että jopa 30 % potilaista pääsee eroon infektiosta itse, koska heillä on vahva immuunijärjestelmä eivätkä he tarvitse hoitoa.
PCR:llä määritetään viruksen genotyyppi. Eri genotyypit reagoivat hoitoon eri tavalla.
PCR:ää käytetään hoidon tehokkuuden seuraamiseen.
PCR:ää käytetään, kun veressä ei ole vasta-aineita, mutta jos sairautta epäillään vahvasti (kohonneet alkalisen fosfataasin tasot, kokonaisbilirubiini, kaksinkertainen maksaentsyymien AST ja ALT ylimäärä).
Hepatiitti C:n PCR-testiä käytetään hepatiittivirusten kohdunsisäisen leviämisen seuraamiseen.
PCR-analyysin avulla on mahdollista määrittää ei vain RNA-virusten esiintyminen veressä - kvalitatiivinen analyysi (havaittu/ei havaittu), vaan myös niiden määrä - viruskuorma (viruksen RNA:n yksiköiden lukumäärä 1 ml:ssa veri). Kvantitatiivista PCR:ää käytetään hoidon tehokkuuden seuraamiseen.
PCR:ssä käytetyillä menetelmillä on eri herkkyys. Venäjän federaatiossa vuoden 2014 metodologisten suositusten mukaan suositellaan menetelmiä, joiden herkkyys on 25 IU/ml tai vähemmän. European Association for the Study of the Liver -järjestön vuoden 2015 suositusten mukaisesti ehdotetaan käytettäväksi menetelmiä viruksen RNA:n määrittämiseen, jonka herkkyys on 15 IU/ml tai vähemmän.
Testijärjestelmän herkkyydestä riippuen potilas saa yhden tai toisen testituloksen:
COBAS AMPLICOR -analysaattorin minimiherkkyys on 600 IU/ml (vanhan sukupolven analysaattori).
COBAS AMPLICOR HCV-TEST -analysaattorin minimiherkkyys on 50 IU/ml, mikä on 100 kopiota 1 ml:ssa.
RealBest HCV RNA -analysaattorin minimiherkkyys on 15 IU/ml, mikä on 38 kopiota 1 ml:ssa (osa nykyaikaisten testijärjestelmien ryhmää). Näiden analysaattoreiden spesifisyys on 100 %. Niiden avulla havaitaan alatyyppien 1a ja 1b, 2a, 2b, 2c ja 2i, 3, 4, 5a ja 6 hepatiitti C -virusten RNA.
Jos RNA-kopioita on tämän analysaattorin herkkyysrajan alapuolella, potilas saa "ei havaittu" -vasteen.
Riisi. 4. Esimerkki PCR-analyysistä (kvantitatiivinen testi). Viruskuorman määrittäminen.
Hepatiitti C:n PCR-testin tulosten tulkinta
Viruksen RNA:n puuttuminen osoittaa infektion puuttumisen.
RNA:n puuttuminen analyysissä veressä olevien vasta-aineiden taustalla osoittaa taudin katoamisen hoidon tai itseparantumisen vaikutuksesta.
Joissakin tapauksissa virusta on veressä, mutta kynnyksen alapuolella, kun analysaattorit eivät havaitse sen pitoisuutta. Tällaiset potilaat ovat edelleen vaarallisia infektioiden suhteen.
Viruksen RNA:n havaitseminen 6 peräkkäisen kuukauden ajan potilailla, joilla on akuutti hepatiitti C, osoittaa, että sairaus on muuttunut krooniseksi.
Viruksen RNA:n väheneminen testeissä hoidon aikana osoittaa hoidon tehokkuutta ja päinvastoin.
Riisi. 5. Makrovalmiste. Rasvainen hepatoosi on yksi taudin seurauksista.
Perusbiokemialliset verikokeet C-hepatiittia varten
Biokemialliset verikokeet auttavat selvittämään monien ihmisen elinten ja järjestelmien toiminnallisen tilan.
Verikoe maksaentsyymeille ALT ja AST
Maksaentsyymit syntetisoidaan intrasellulaarisesti. Ne osallistuvat aminohappojen synteesiin. Suuri määrä niistä löytyy maksan, sydämen, munuaisten ja luustolihasten soluista. Kun elimet ovat vaurioituneet (solukalvojen eheyden rikkominen), entsyymit pääsevät vereen, jossa niiden taso nousee. Entsyymien kohonneita tasoja kirjataan maksasolujen vaurioitumisesta (lyysi, tuhoutuminen), sydäninfarkti ja muut sairaudet. Mitä korkeampi transaminaasien taso veren seerumissa, sitä enemmän soluja tuhoutui. ALT hallitsee maksasoluissa, AST hallitsee sydänlihassoluissa. Kun maksasolut tuhoutuvat, ALT-taso nousee 1,5-2 kertaa. Kun sydänlihassolut tuhoutuvat, AST-taso nousee 8-10 kertaa.
Kroonisen virushepatiitin diagnosoinnissa on kiinnitettävä huomiota AST/ALT-suhteeseen (de Ritis -kerroin).Ylimääräinen AST-taso ALT-arvoon verrattuna viittaa maksasolujen vaurioitumiseen.
AST-normi miehillä on enintään 41 yksikköä/l, naisilla - enintään 35 yksikköä / l, yli 12-vuotiailla lapsilla - jopa 45 yksikköä/l.
ALT-normi miehillä on 45 yksikköä/l, naisilla 34 yksikköä/l, 12-vuotiaille ja sitä vanhemmille lapsille 39 yksikköä/l.
Normaalisti (terveillä ihmisillä) AST/ALT-suhde vaihtelee välillä 0,91-1,75.
Verikoe bilirubiinille
Bilirubiini on hemoglobiinin hajoamistuote. Bilirubiini veressä on epäsuoran (jopa 96%) ja suoran (4%) muodossa. Tämän aineen hajoamisprosessi tapahtuu pääasiassa maksasoluissa, joista se erittyy elimistöstä sapen mukana. Kun maksasolut tuhoutuvat, veren seerumin bilirubiinitaso nousee. Normaalisti kokonaisbilirubiinipitoisuus on alle 3,4 - 21,0 µmol/l. Tasolla 30-35 µmol/l tai enemmän bilirubiini tunkeutuu kudoksiin aiheuttaen ihon ja kovakalvon keltaisuutta.
Riisi. 6. Keltaisuus on yksi maksavaurion merkkejä.
