Diagnos av hepatit A baseras på epidemiologiska, kliniska och laboratoriedata. Laboratoriediagnostik baseras på identifiering av markörer för viral replikation - IgM och IgG antikroppar mot patogena antigener och genetisk analys - detektion av viralt RNA i blodserum. Tekniken för att identifiera virusantigener är av begränsad betydelse, på grund av det faktum att toppen av deras bildning inträffar under inkubationsperioden och den tidigaste ikteriska perioden. Kultur används sällan för att diagnostisera hepatit A. Virus växer inte på flerskiktscellkulturer. Preferens ges åt leukocyt- eller organkulturer.
Ris. 1. Patienten har gulsot.
Kliniska fynd som tyder på hepatit A
Vid diagnostisering av sjukdomen bör man ta hänsyn till det faktum att sjukdomen oftast registreras hos barn från 5 till 14 år. Hos 80 % av barn under 5 år är sjukdomen asymtomatisk i en anikterisk form. Hos äldre barn och vuxna registreras den ikteriska formen av sjukdomen i 70% av fallen.
Förekomsten av hepatit A hos en patient indikeras av följande kliniska data:
Kontakt med en patient med hepatit A, dricksvatten från oprövade källor, otvättade grönsaker och frukter etc. besöker länder i Asien, Afrika och Latinamerika i genomsnitt 14 - 28 dagar före sjukdomen. Amplituden av fluktuationer i inkubationsperioden varierar från 7 till 50 dagar.
Akut debut av sjukdomen med hypertermi, förgiftning, dyspeptiska och asthenovegetativa syndrom.
I den ikteriska formen av sjukdomen är den pre-ikteriska perioden kort.
Förbättring av patientens välbefinnande med uppkomsten av gulsot.
Signifikant ökning (5 - 40 gånger) av nivån av aminotransferaser (ALT och ASAT) i blodserum- och tymoltestet.
För att diagnostisera hepatit A används främst blodserum och fekalt material.
Ris. 2. Mörkning av urin och missfärgning av avföring är nyckeltecken på sjukdomen.
Diagnos av sjukdomen med hjälp av serologiska tester
Hepatit i den akuta fasen kan endast identifieras genom att detektera specifika IgM- och IgG-antikroppar i blodserumet. Dessa sjukdomsmarkörer detekteras med hjälp av serologiska reaktioner ELISA (enzym-linked immunosorbent assay) och RIA (radioimmunoassay). Båda diagnostiska metoderna är mycket specifika och mycket känsliga. Vid utförande av RIA används specifik IgG märkt med radionuklid 125I, vid utförande av ELISA används enzymet peroxidas. Med hjälp av immunofluorescensreaktionen kan leverbiopsier undersökas. Serologiska diagnostiska metoder används också för epidemiologisk undersökning av kontaktpersoner.
IgM börjar produceras i patientens kropp från slutet av inkubationsperioden och finns i blodet i 3 till 6 månader efter sjukdomen.
IgG börjar produceras 2-3 veckor efter sjukdomen och finns sedan i patientens blodserum under hela livet.
I olika regioner varierar andelen friska individer med IgG-antikroppar i blodserumet mot hepatit A-viruset från 30 till 60 %.
Ris. 3. Antikroppar produceras av celler i patientens immunsystem som svar på hepatitvirusantigener. Ju högre immunsvar, desto högre koncentration av antikroppar i blodserumet.
Antikroppar (immunoglobuliner) av IgM-klassen
IgM (”tidiga” antikroppar) är de första som bekämpar främmande mikroorganismer. De börjar produceras i patientens kropp från slutet av inkubationsperioden - 5 - 10 dagar innan de första symtomen på hepatit A uppträder. IgM-titern ökar 4 gånger under de första 3 - 6 veckorna och minskar sedan gradvis. Efter 6 -8 månader (ibland 12 - 18 månader) försvinner IgM. Med hjälp av IgM upptäcks hepatit A, som förekommer i anikteriska, raderade och subkliniska former.
Bestämning av antikroppar mot hepatit A-virusklass IgM är det huvudsakliga testet för den specifika diagnosen hepatit A. Deras närvaro i blodserumet indikerar en akut fas eller en nyligen inträffad sjukdom.
Antikroppar (immunoglobuliner) av IgG-klassen
"Sena" IgG-antikroppar börjar produceras av immunsystemet vid 2–3 veckors sjukdom. Deras titer ökar långsamt, maxvärdet bestäms vid 4-6 veckors sjukdom och minskar sedan gradvis. Därefter finns IgG i patientens blodserum under hela hans liv. Detekteringen av IgG-antikroppar i blodserumet hos friska individer indikerar en tidigare sjukdom. Specifik IgG produceras i vaccinerade individer.
Antikroppar (immunoglobuliner) av IgA-klassen
Antikroppar av IgA-klassen ackumuleras i slemhinnorna i tarmarna, övre luftvägarna och könsorganen, de finns i saliv, tårvätska, råmjölk och mjölk och är de första som skyddar kroppen från främmande mikroorganismer. I blodserumet sker uppkomsten av IgA-antikroppar parallellt med uppkomsten av IgM-antikroppar, men IgA försvinner från blodet mycket snabbare. IgA-antikroppar detekteras i avföring.
Ris. 4. Specifika IgM- och IgG-antikroppar detekteras med hjälp av serologiska reaktioner ELISA (enzyme-linked immunosorbent assay) och RIA (radioimmunoassay).
Antigener från hepatit A-virus kan detekteras i extrakt av patientens avföring, för vilka immunelektronmikroskopi, enzymkopplade immunosorbentanalyser och radioimmunoanalyser används. Närvaron av virus i patientens avföring är 100% bekräftelse på diagnosen, men deras frånvaro utesluter inte förekomsten av hepatit A.
Virus-RNA (genetiskt material) detekteras i patientens blodserum, fekala extrakt, livsmedel och vatten (reservoarer, avlopp, etc.) med hjälp av polymeraskedjereaktion (PCR). Känsligheten för denna diagnostiska metod är minst 80 virala partiklar i 5 μl, specificiteten är 98%. Virus-RNA detekteras från sjukdomens 3:e vecka och cirka 20 dagar efter att de första symtomen på sjukdomen uppträder. Viralt RNA i avföring detekteras från den tredje veckan av sjukdomen och cirka 3 månader efter uppkomsten av de första symtomen på sjukdomen.
Hepatit A-virus kan isoleras genom att infektera mottagliga djur (silkesapaapor, schimpanser eller babianer), vilket endast görs i högt specialiserade laboratorier. Material som erhållits från infekterade djur undersöks för detektion av själva patogenen och dess antigener med användning av metoderna som beskrivits ovan.
Ris. 6. Hepatit A-virus kan isoleras genom att infektera mottagliga djur (Marmosetapor, schimpanser eller babianer), vilket endast görs i högspecialiserade laboratorier.
Kliniska tester för diagnos av hepatit A som har diagnostiskt värde:
Leukopeni eller normocytos.
Relativ lymfocytos.
Bromsar ESR.
Biokemiska tester för att diagnostisera sjukdomen som har diagnostiskt värde:
En kortvarig (inom 1 - 2 veckor) ökning av aktiviteten av aminotransferaserna ALT och ASAT med 5 - 40 gånger. Deras normalisering registreras av den 21:a dagen av sjukdomen.
Ökningen av bilirubinnivåerna är kortlivad (1 - 2 veckor), måttlig. Fullständig normalisering observeras under den tredje veckan av sjukdomen.
En signifikant ökning av tymoltestet under de första 10 dagarna av den ikteriska perioden.
Ökade nivåer av alkaliskt fosfatas.
Om pankreatit utvecklas mot bakgrund av den underliggande sjukdomen, observeras en ökning av nivån av amylas i urinen och blodet.
I fallet med utvecklingen av den underliggande sjukdomen mot bakgrund av alkoholförgiftning registreras höga nivåer av γ-GT (gamma-glutamyltransferas) i blodet.
Ris. 7. Hos barn under 5 år uppträder sjukdomen i ikterisk form i 20% av fallen. I 80% - asymptomatisk i anikterisk form.
Differentialdiagnos av hepatit A bör utföras med följande sjukdomar:
Viral hepatit C, B och E.
I den anikteriska formen, i de tidiga, pre-ikteriska perioderna, uppstår hepatit A ofta under sken av en akut luftvägsinfektion eller livsmedelsburen sjukdom.
Cancer i huvudpapillen i tolvfingertarmen.
Kronisk hepatit och cirros i levern.
Infektiös mononukleos, toxoplasmos, leptospiros, pseudotuberkulos och cytomegalovirusinfektion kan förekomma med gulsot.
