Virusinis hepatitas C yra rimta medicininė ir socialinė problema. Pasaulyje šia liga šiandien serga apie 180 milijonų žmonių, kasmet miršta 350 tūkst. Ilgalaikė latentinė (besimptomė) ligos eiga lemia pavėluotą diagnozę. Ligai diagnozuoti, diferencinei diagnozei atlikti atliekama hepatito C analizė, jos pagalba nustatoma anksčiau sirgusi liga „ant pėdų“.
Tyrimas taikomas žmonėms, turintiems hepatito C simptomų, padidėjusį kepenų fermentų kiekį, gaunant informaciją apie anksčiau buvusį nepatikslintos etiologijos ligą, rizikos grupėms ir patikros tyrimus.
Hepatito C diagnozė atliekama dviem etapais:
1 etapas. Antikūnų prieš virusą (anti-HCV) buvimo kraujo serume nustatymas.
2 etapas. Jei yra anti-HCV, atliekamas RNR (ribonukleino rūgšties) tyrimas naudojant PGR metodą hepatitui C gydyti. Tyrimas leidžia nustatyti proceso fazę – „aktyvus/neaktyvus“ ir nuspręsti, ar nėra RNR (ribonukleino rūgšties). gydymo poreikis.Yra žinoma, kad apie 30% užsikrėtusių žmonių infekcija atsikrato patys, nes turi stiprią imuninę sistemą ir jiems nereikia gydymo. Naudojant PGR, nustatomas viruso genotipas. Skirtingi genotipai skirtingai reaguoja į gydymą.
Kepenų pažeidimo mastas nustatomas naudojant biopsiją arba kitus invazinius ir neinvazinius tyrimus (pavyzdžiui, fibrotestą). Kepenų steatozės laipsnis nustatomas naudojant steatotestą. Visais atvejais hepatito C diagnozė turėtų būti pagrįsta epidemiologinio tyrimo duomenimis, klinikiniu ligos vaizdu ir biocheminio kraujo tyrimo duomenimis.
Antikūnai prieš virusus (anti-HCV) yra specifiniai infekcijos žymenys. Sergančio žmogaus organizme gaminasi specifiniai antikūnai prieš viruso baltymus (antigenus) – IgM ir IgG klasių imunoglobulinus (anti-HCV IgM/IgG).
Jei gaunamas teigiamas antikūnų rezultatas, atliekamas patvirtinamasis tyrimas – nustatomas bendras antikūnų prieš struktūrinius ir nestruktūrinius viruso baltymus. Anti-HCV IgM gaminamas viruso E1 ir E2 struktūriniams apvalkalo baltymams, nukleokapsidės baltymui C-cor (anti-HCV IgG) ir 7 nestruktūriniams fermentų baltymams NS (anti-HCV NS IgG).
Antikūnams prieš hepatito C virusą aptikti naudojamas su fermentu susijęs imunosorbentinis tyrimas (ELISA). (+) ELISA rezultatams patvirtinti naudojami patvirtinamieji testai - RIBA (rekombinantinis imunoblotavimas), rečiau Inno-Lia (sintetinių peptidų analizė).
Anti-HCV IgM testas
IgM antikūnai kraujo serume atsiranda praėjus 4–6 savaitėms po užsikrėtimo ir greitai pasiekia maksimumą. Pasibaigus ūminiam procesui (po 5 - 6 mėnesių), jų koncentracija krenta.
Ilgalaikis anti-HCV IgM registravimas rodo, kad hepatitas C tapo lėtinis.
IgM koncentracijos padidėjimas lėtiniu laikotarpiu rodo infekcinio proceso reaktyvavimą.
IgM imunoglobulinų lygis leidžia įvertinti gydymo efektyvumą.
Anti-HCV IgG testas
IgG antikūnai atsiranda paciento kraujo serume praėjus 11–12 savaičių po užsikrėtimo. Didžiausia koncentracija registruojama po 5–6 mėnesių. Be to, antikūnų lygis išlieka pastovus per visą ligos laikotarpį ūminiu ir sveikimo laikotarpiu.
Viso hepatito C viruso antikūnų tyrimas
Bendras viruso antikūnų kiekis (bendras anti-HCV) naudojamas diagnozuoti „šviežius“ ligos atvejus. Bendrieji antikūnai yra antikūnai prieš nukleokapsidės baltymą C – cor (anti-HCV IgG) ir 7 nestruktūrinius fermentinius baltymus NS (anti-HCV NS IgG) – anti-HCV NS3, anti-HCV NS4 ir anti-HCV NS5.
Bendras hepatito C viruso antikūnų kiekis užsikrėtusio žmogaus kraujo serume atsiranda praėjus 11-12 savaičių nuo užsikrėtimo, pasiekia piką 5-6 mėnesius ir išlieka pastovus per visą ligos laikotarpį ūminiu laikotarpiu. ir 5-9 metus po sveikimo laikotarpio .
Kiekvienas antikūnų tipas turi savo diagnostinę vertę:
Anti HCV C (cor) yra pagrindiniai kontakto su hepatito C virusais rodikliai.
Anti HCV NS3 yra vienas iš pirmųjų, aptinkamų serokonversijos (antikūnų gaminimosi reaguojant į viruso buvimą) procese, rodo infekcinio proceso sunkumą ir rodo didelį viruso kiekį. Jų pagalba hepatitas C nustatomas pacientams, kurie neįtaria, kad yra užsikrėtę. Ilgalaikis anti-HCV NS3 buvimas kraujo serume rodo didelę proceso chroniškumo riziką.
Anti HCV NS4 rodo, kad hepatitas C yra ilgas. Pagal antikūnų titrų lygį galima spręsti apie kepenų pažeidimo laipsnį.
Anti HCV NS5 rodo viruso RNR buvimą. Jų aptikimas ūminiu laikotarpiu yra proceso chroniškumo pranašas. Didelis antikūnų titras gydymo metu rodo, kad pacientas nereaguoja į gydymą.
Anti HCV NS4 ir anti HCV Šio tipo antikūnai atsiranda vėlyvoje hepatito vystymosi stadijoje. Jų sumažėjimas rodo infekcinio proceso remisijos formavimąsi. Po gydymo NS4 ir NS5 antikūnų titrai sumažėja per 8–10 metų. Šio tipo antikūnai neapsaugo nuo pakartotinio užsikrėtimo.
Ryžiai. 2. Makropreparatas. Kepenų cirozė yra rimta virusinio hepatito C komplikacija.
Antikūnų prieš hepatito C virusą nebuvimas žymimas terminu „normalus“. Tačiau tai ne visada reiškia, kad žmogus neserga. Taigi, antikūnų nebuvimas užsikrėtusio žmogaus kraujyje fiksuojamas prieš jiems atsirandant kraujyje – iki 6 mėnesių nuo užsikrėtimo momento (vidutiniškai po 12 savaičių). Laikotarpis, kai užsikrėtusio žmogaus kraujyje nėra antikūnų, vadinamas „serologiniu langu“. 3 kartos testavimo sistemos (ELISA-3) pasižymi dideliu specifiškumu (iki 99,7%). Apie 0,3% yra dėl klaidingai teigiamų rezultatų.
Anti-HCV buvimas rodo esamą arba buvusią infekciją.
IgM antikūnų ir Core IgG antikūnų nustatymas, Core IgG antikūnų titrų padidėjimas ir (+) PGR rezultatai, esant klinikiniams ir laboratoriniams ūminio hepatito požymiams, rodo ūminį ligos periodą.
IgM antikūnų, anti-HCV Core IgG, anti-HCV NS IgG ir (+) PGR aptikimas, esant klinikiniams ir laboratoriniams ligos požymiams, rodo lėtinio hepatito C reaktyvaciją.
Anti-HCV Core IgG ir anti-HCV NS IgG nustatymas nesant klinikinių ir laboratorinių ligos požymių ir neigiamas PGR rezultatas rodo, kad pacientas serga lėtiniu hepatitu latentinėje fazėje.
Ryžiai. 3. Makroskopinis kepenų mėginys. Pirminis kepenų vėžys yra rimta hepatito C komplikacija.
Polimerazės grandininė reakcija (PGR) yra „auksinis standartas“ diagnozuojant virusinį hepatitą C. Didelis tyrimo jautrumas leidžia aptikti virusų genetinę medžiagą (RNR), net jei tyrime jų yra tik keletas. medžiaga. PGR viruso RNR gali aptikti dar gerokai prieš antikūnų atsiradimą kraujo serume, bet ne anksčiau kaip nuo 5 dienos nuo užsikrėtimo momento. Susirgus viruso RNR PGR nustatoma ne tik kraujo serume, bet ir kepenų biopsijose.
Polimerazės grandininė reakcija leidžia nustatyti hepatito C virusų buvimą ar nebuvimą kraujyje ir nuspręsti dėl gydymo pradžios. Yra žinoma, kad iki 30% pacientų infekcija atsikrato patys, nes turi stiprią imuninę sistemą ir jiems nereikia gydymo.
Naudojant PGR, nustatomas viruso genotipas. Skirtingi genotipai skirtingai reaguoja į gydymą.
PGR naudojama gydymo veiksmingumui stebėti.
PGR naudojamas nesant antikūnų kraujyje, bet esant rimtam ligos įtarimui (padidėjęs šarminės fosfatazės, bendro bilirubino kiekis, 2 kartus perteklinis kepenų fermentų AST ir ALT kiekis).
PGR tyrimas dėl hepatito C naudojamas intrauteriniam hepatito virusų perdavimui stebėti.
Naudojant PGR analizę, galima nustatyti ne tik RNR virusų buvimą kraujyje – kokybinę analizę (aptikta/neaptikta), bet ir jų kiekį – viruso kiekį (virusinės RNR vienetų skaičių 1 ml. kraujas). Gydymo efektyvumui stebėti naudojama kiekybinė PGR.
PGR naudojami metodai turi skirtingą jautrumą. Rusijos Federacijoje pagal 2014 metų metodines rekomendacijas rekomenduojama naudoti metodus, kurių jautrumas yra 25 TV/ml ar mažesnis. Remiantis 2015 metų Europos kepenų tyrimo asociacijos rekomendacijomis, viruso RNR, kurių jautrumas yra 15 TV/ml ar mažesnis, nustatymo metodais.
Priklausomai nuo tyrimo sistemos jautrumo, pacientas gauna vienokį ar kitokį tyrimo rezultatą:
Minimalus COBAS AMPLICOR analizatoriaus jautrumas yra 600 IU/ml (senos kartos analizatorius).
Minimalus COBAS AMPLICOR HCV-TEST analizatoriaus jautrumas yra 50 IU/ml, tai yra 100 kopijų 1 ml.
Minimalus RealBest HCV RNR analizatoriaus jautrumas yra 15 IU/ml, tai yra 38 kopijos 1 ml (šiuolaikinių testavimo sistemų grupės dalis). Šių analizatorių specifiškumas yra 100%. Jų pagalba aptinkama 1a ir 1b, 2a, 2b, 2c ir 2i, 3, 4, 5a ir 6 potipių hepatito C virusų RNR.
Jei RNR kopijų yra žemiau šio analizatoriaus jautrumo slenksčio, pacientas gauna atsakymą „neaptikta“.
Ryžiai. 4. PGR analizės (kiekybinio tyrimo) pavyzdys. Viruso kiekio nustatymas.
Hepatito C PGR tyrimo rezultatų aiškinimas
Virusinės RNR nebuvimas rodo infekcijos nebuvimą.
RNR nebuvimas analizėje, atsižvelgiant į antikūnų buvimą kraujyje, rodo, kad liga išnyksta dėl gydymo ar savęs išgydymo.
Kai kuriais atvejais viruso yra kraujyje, bet žemesnio lygio, kai jo koncentracijos neaptinka analizatoriai. Tokie pacientai išlieka pavojingi dėl infekcijos.
Virusinės RNR aptikimas 6 mėnesius iš eilės pacientams, sergantiems ūminiu hepatitu C, rodo, kad liga tapo lėtinė.
Viruso RNR sumažėjimas tyrimų metu gydymo metu rodo gydymo veiksmingumą ir atvirkščiai.
Ryžiai. 5. Makropreparatas. Riebalinė hepatozė yra viena iš ligos pasekmių.
Pagrindiniai biocheminiai kraujo tyrimai hepatitui C nustatyti
Biocheminiai kraujo tyrimai padeda nustatyti daugelio žmogaus organų ir sistemų funkcinę būklę.
Kraujo tyrimas dėl kepenų fermentų ALT ir AST
Kepenų fermentai sintetinami intraląsteliniu būdu. Jie dalyvauja aminorūgščių sintezėje. Daug jų randama kepenų, širdies, inkstų ir skeleto raumenų ląstelėse. Pažeidus organus (pažeidžiant ląstelių membranų vientisumą), fermentai patenka į kraują, kur padidėja jų kiekis. Padidėjęs fermentų kiekis fiksuojamas su kepenų ląstelių pažeidimu (lize, sunaikinimu), miokardo infarktu ir kitomis ligomis. Kuo didesnis transaminazių kiekis kraujo serume, tuo daugiau ląstelių buvo sunaikinta. ALT vyrauja kepenų ląstelėse, AST – miokardo ląstelėse. Sunaikinus kepenų ląsteles, ALT kiekis padidėja 1,5–2 kartus. Sunaikinus miokardo ląsteles, AST kiekis padidėja 8-10 kartų.
Diagnozuojant lėtinį virusinį hepatitą būtina atkreipti dėmesį į AST/ALT santykį (de Ritis koeficientą).AST perteklius, palyginti su ALT, rodo kepenų ląstelių pažeidimą.
AST norma vyrams yra iki 41 vnt/l, moterims - iki 35 vnt/l, vaikams nuo 12 metų - iki 45 vnt/l.
Vyrams ALT norma yra iki 45 vnt/l, moterims - iki 34 vnt/l, vaikams nuo 12 metų ir vyresniems - iki 39 vnt./l.
Paprastai (sveikiems žmonėms) AST/ALT santykis svyruoja nuo 0,91 iki 1,75.
Kraujo tyrimas dėl bilirubino
Bilirubinas yra hemoglobino skilimo produktas. Bilirubinas kraujyje yra netiesioginio (iki 96%) ir tiesioginio (4%) pavidalu. Šios medžiagos skilimo procesas vyksta daugiausia kepenų ląstelėse, iš kurių ji išsiskiria iš organizmo su tulžimi. Kai kepenų ląstelės sunaikinamos, padidėja bilirubino kiekis kraujo serume. Paprastai bendrojo bilirubino kiekis yra mažesnis nei 3,4–21,0 µmol/l. Esant 30–35 µmol/l ir didesniam kiekiui, bilirubinas prasiskverbia į audinius, todėl oda ir sklera tampa gelta.
Ryžiai. 6. Gelta – vienas iš kepenų pažeidimo požymių.
