Diagnozowanie giardiozy jest trudnym zadaniem. Choroba nie ma objawów patogonicznych. Często obraz kliniczny lambliozy pokrywa się z obrazem innych chorób przewodu żołądkowo-jelitowego. Z wielu powodów nie zawsze możliwe jest wykrycie przeciwciał w surowicy krwi. Metoda mikroskopowa ma również swoje ograniczenia – brak możliwości rozróżnienia blisko spokrewnionych gatunków Giardia oraz częstość izolacji cyst powoduje, że metoda diagnostyki skatologicznej jest mniej informatywna.
Analiza w kierunku Giardia obejmuje analizę zawartości kału, krwi i dwunastnicy:
Mikroskopia rozmazu natywnego (niezabarwionego) i rozmazu barwionego roztworem Lugola w celu wykrycia postaci torbielowatych w postaciach uformowanych i precystycznych pasożyta w płynnym kale. W przypadku biegunki i zawartości dwunastnicy wykrywa się wegetatywne formy patogenów.
Wykrywanie form wegetatywnych Giardia podczas intubacji dwunastnicy. Biopsja dwunastnicy jest najbardziej wiarygodną metodą diagnostyczną.
Wykrywanie przeciwciał przeciwko patogenowi w surowicy krwi za pomocą testów ELISA i RNIF jest metodą bardziej czułą. Niektóre laboratoria wykonują badania w celu wykrycia antygenów pasożytów w kale. Ta technika diagnozowania lambliozy jest lepsza niż poszukiwanie cyst w kale pacjenta.
Metodę genetyki molekularnej uważa się za wysoce czułą.
Giardia uprawiana jest na sztucznych pożywkach, jednak technika ta nie jest stosowana w praktyce.
Ze względu na brak 100% czułości każdej z powyższych metod, diagnostykę lambliozy należy przeprowadzić kompleksowo.
Ryż. 1. Na zdjęciu Giardia (forma wegetatywna pasożyta, trofozoity).
Badania parazytologiczne
W przypadku podejrzenia choroby wykonuje się badania na Giardię: bada się kał i zawartość dwunastnicy. Cysty wykrywa się w masach kałowych, przy biegunce (w płynnych masach kałowych) wykrywa się zarówno cysty, jak i trofozoity, w treści dwunastnicy wykrywa się jedynie trofozoity (ruchome formy wegetatywne pasożytów).
Ryż. 2. Giardia pod mikroskopem.
Ryż. 3. Na zdjęciu mobilne formy wegetatywne Giardii (na zdjęciu powyżej) i cysta pasożyta (na zdjęciu poniżej).
Metoda badań skatologicznych
Metoda badań skatologicznych (analiza kału dla Giardii) jest najbardziej dostępna, ale mniej informacyjna. Za jego pomocą wykrywa się cysty pasożytnicze, wydalane u pacjentów z kałem od 5 do 7 dnia choroby z przerwami co 2 do 21 dni (średnio co 8 do 14 dni).
W okresie „cichym” uwalnianie cyst ustaje. Ta okoliczność wymaga wielokrotnego badania kału i zastosowania innych technik laboratoryjnych.W świeżym kale pobranym 15–20 minut przed rozpoczęciem badania wegetatywne formy Giardia wykrywa się w 5% przypadków. W ciągu pół godziny lub godziny formy wegetatywne obumierają, a cysty „kurczą się” i łączą z detrytusem, uniemożliwiając ich wykrycie.
U pacjentów z chorobami przewodu pokarmowego o tendencji do przewlekłości, ze współistniejącą dysfunkcją układu neurokrążeniowego, z długotrwałą eozynofilią i chorobami alergicznymi należy wykonać badanie w kierunku Giardii.
Optymalizację badań skatologicznych można osiągnąć w następujący sposób:
przeprowadzenie 4-5-krotnej analizy kału w kierunku Giardia w odstępach 7-8 dni;
wykluczenie na 5 – 7 dni z przyjmowania leków przeciwpasożytniczych;
w przypadku braku możliwości dostarczenia do laboratorium świeżo pobranego kału zaleca się stosowanie środków konserwujących w proporcji 3 części środka konserwującego na jedną część kału;
w przypadku zaparć konieczne jest przyjęcie środka przeczyszczającego (gutalax, senade itp.) i/lub leków żółciopędnych w przeddzień badania kału na lamblie.
Ryż. 4. Na zdjęciu formy wegetatywne pasożytów - trofozoity (elektronowa mikroskopia skaningowa).
Ryż. 5. Trofozoit (zdjęcie A) i cysty Giardia (zdjęcie B).
Mikroskopia zawartości dwunastnicy
W treści dwunastnicy podczas lambliozy mobilne formy Giardia (formy wegetatywne, trofozoidy) są wykrywane z większą częstotliwością niż w kale. Jeśli jednak Giardia pasożytuje w dolnych partiach jelita cienkiego, uzyskuje się ujemne wyniki testu. Badanie zawartości dwunastnicy należy wykonywać jednocześnie z badaniem kału. Ostatnio tego typu badania są rzadko stosowane.
Wykonuje się badanie krwi w kierunku Giardii w celu identyfikacji określonych immunoglobulin. Uważa się, że głównym czynnikiem chorobotwórczym Lamblia jelitowego (głównym immunogenem) jest antygen Ag GSA-65, na podstawie którego stworzono nowoczesne systemy testowe służące do diagnozowania tej choroby.
Metody testu immunoenzymatycznego (ELISA) i immunofluorescencji (RNIF) są obiecujące w diagnostyce laboratoryjnej lambliozy. Za ich pomocą wykrywa się immunoglobuliny w surowicy klas G i M pacjentów i nosicieli oraz antygeny w próbkach kału. Czułość i swoistość tych metod diagnostyki lambliozy wynosi ponad 90%.
Immunoglobuliny IgM i IgG pojawiają się we krwi od 12 do 14 dni choroby. Obecność immunoglobulin IgM i IgG wskazuje, że pacjent cierpi na lambliozę. Po oczyszczeniu IgM znika, a IgG utrzymuje się do dwóch miesięcy.
Poziom IgM (przy braku IgG) wskazuje na obecność ostrej lambliozy u pacjentów, których inwazja nastąpiła nie więcej niż 3 miesiące temu.
Poziom IgG (w połączeniu z IgM lub bez) wskazuje na przewlekły przebieg lambliozy lub początkowy etap rekonwalescencji ostrej lambliozy.
Im wyższy poziom przeciwciał w surowicy krwi pacjenta, tym częściej obserwuje się ujemne wydzielanie cyst.
Przeciwciała nie są wykrywane u dzieci ze skazą limfatyczno-hipoplastyczną oraz u pacjentów z nieskutecznymi humoralnymi mechanizmami obronnymi, co przyczynia się do przewlekłości procesu zakaźnego. Leczenie lambliozy w tym przypadku odbywa się według indywidualnych schematów.
Analiza Giardii przy jednoczesnym zastosowaniu metod serologicznych i skatologicznych pozwala na dokładniejszą identyfikację choroby. Rozpoznanie lambliozy wyłącznie na podstawie wyników metod badań skatologicznych uważa się za nieuzasadnione.
Biopsja jelita cienkiego jest cennym badaniem diagnostycznym, pozwalającym na identyfikację i ocenę stopnia uszkodzenia błony śluzowej oraz wykrycie pasożytów. Technikę tę stosuje się w skrajnych przypadkach.
Ryż. 8. W przypadku lambliozy kosmki błony śluzowej jelita cienkiego ulegają uszkodzeniu. Na zdjęciu po lewej stronie mikroskopia materiału biopsyjnego od pacjenta z lambliozą. Na zdjęciu po prawej Giardia zmierza w stronę kosmków jelitowych.
Jeśli pacjent zachoruje, wykonuje się ogólne badanie krwi.
Ryż. 9. Eozynofilia wskazuje na rozwój reakcji alergicznych u pacjenta z lambliozą (zdjęcie po lewej). Przy długim i ciężkim przebiegu choroby rozwija się niedokrwistość (zdjęcie po prawej).
Giardiozę należy odróżnić od bakteryjnego i wirusowego zapalenia żołądka i jelit. Podobny obraz daje robaczyca jelitowa, czerwonka bakteryjna i amebowa.
