Meningokoková infekce je sporadická, ale i přes to je jedna z nejnebezpečnějších a nepředvídatelných z hlediska rychlosti blesku.1/3 všech případů jsou hypertoxické, fulminantní formy, které často končí smrtí pacienta. Průběh meningokokové infekce závisí na včasné diagnostice a adekvátní počáteční terapii ve všech fázích léčby. Diagnostika meningokokové infekce je založena na epidemiologických údajích, údajích získaných z rozhovoru s pacientem, obecných klinických a laboratorních výzkumných metodách.
Pomocí bakterioskopie můžete detekovat patogen a analyzovat buněčné složení mozkomíšního moku. Bakteriologický výzkum se provádí za účelem získání čisté kultury meningokoků (Neisseria meningitidis). Sérologická metoda umožňuje průkaz bakteriálních antigenů a protilátek v krevním séru.
Materiálem pro výzkum je hlen z nosohltanu, mozkomíšní mok (CSF), krev a hnis a kožní škrábance z oblasti hemoragických vyrážek.
Rýže. 1. Fotografie ukazuje těžkou formu meningokokové sepse u dětí.
Diagnostika meningokokové infekce pomocí obecných metod klinického výzkumu
Meningokoková nazofaryngitida se vyskytuje s mírnou leukocytózou a normální nebo mírně zvýšenou ESR. Při diagnostice meningokokové nazofaryngitidy se využívají údaje epidemiologického a bakteriologického vyšetření. Je nesmírně obtížné diagnostikovat toto onemocnění pouze na základě klinických údajů.
Generalizované formy onemocnění se vyskytují s výraznou neutrofilní leukocytózou a významným posunem ve vzorci, eozinofily mizí z periferní krve a zvyšuje se ESR.
Toxická forma meningokokémie se vyskytuje s trombocytopenií a mírnou anémií. Zvýšená hladina hematokritu indikuje zahušťování krve v cévním řečišti.Rozvinutá leukopenie ukazuje na nárůst těžké intoxikace a je špatným prognostickým znakem. Hladina krevních destiček v krvi klesá a koagulogram se mění. Objevují se známky metabolické acidózy a poruchy elektrolytového složení krve.
Výskyt stop bílkovin, odlitků a jednotlivých červených krvinek v moči svědčí o toxickém poškození ledvin. Významné zvýšení bílkovin, granulárních odlitků a červených krvinek ukazuje na rozvoj akutního selhání ledvin.
S hromadnou smrtí meningokoků se uvolňují endotoxiny, jejichž dopad na vnitřní orgány a systémy těla určuje klinický obraz onemocnění, jehož závažnost vyžaduje použití určitého množství výzkumu.
Rýže. 2. Fotografie ukazuje meningokokémii u dětí.
Vyšetření mozkomíšního moku k diagnostice meningokokové meningitidy
Vyšetření mozkomíšního moku je zásadní pro diagnostiku meningitidy. Při lumbální punkci se odebírá mozkomíšní mok.
S jevy meningismu zůstává buněčné složení mozkomíšního moku normální a je zaznamenán jeho mírně zvýšený tlak.
V prvních hodinách onemocnění (fáze serózního zánětu) zůstává mozkomíšní mok průhledný, dochází k mírnému nárůstu buněčných elementů (až na 50 - 200 buněk) s převahou lymfocytů. Antibiotická terapie v tomto období má vždy pozitivní efekt.
Na konci prvního dne se serózní zánět změní na hnisavý. Mozkomíšní mok se zakalí. Cytóza dosahuje vysokých čísel (několik tisíc na 1 mm3). Až 90 % jeho buněčného složení tvoří neutrofily. Obsah bílkovin je nízký. Hladiny cukru jsou mírně sníženy.Hladina globulinů v mozkomíšním moku je výrazně zvýšena (Nonne-Apeltova reakce je ostře pozitivní).
Mozkomíšní mok podléhá celkovému klinickému, bakteriologickému a biochemickému vyšetření, pro které jsou připraveny 3 zkumavky. Výluh ve 4. zkumavce zůstává v přihrádce. Je sledován pro tvorbu filmu charakteristického pro tuberkulózní meningitidu.
Rýže. 3. Na fotografii vlevo je pohled na mozkomíšní mok při hnisavé meningitidě. Na fotografii vpravo jsou meningokoky získávány z mozkomíšního moku (bakterioskopie) pacienta s meningitidou.
Diagnostika meningokokové infekce pomocí biochemických výzkumných metod
U generalizovaných forem meningokokové infekce se vyšetřuje acidobazický stav a elektrolyty krevní plazmy. U meningokokové sepse se sledují parametry krevní srážlivosti a provádějí se ledvinové testy.
Analýza na tuberkulózu přímou bakterioskopií je nejjednodušší a nejrychlejší způsob detekce mykobakterií v testovaném materiálu. Přítomnost patogenu lze zjistit během jedné hodiny. Tato technika se používá pro expresní diagnostiku.
K bakterioskopickému vyšetření se používá stěr odebraný z nosohltanu, hustá kapka krve a mozkomíšní mok. Nátěry jsou obarveny podle Grama nebo ošetřeny methylenovou modří.
Meningokoky jsou diplokoky (koky ve tvaru dvojitých fazolí) o velikosti od 0,6 do 0,8 mikronů. Při barvení Gramem získávají růžovou barvu (Gram-negativní). Jsou umístěny intracelulárně a extracelulárně.
Výtěr z nosohltanu se odebírá nalačno speciálním sterilním tamponem upevněným na hliníkovém drátu.
Při přípravě stěrů z mozkomíšního moku věnujte pozornost vzhledu biologického materiálu. Pokud je mozkomíšní mok hnisavý, připravují se stěry ze sedimentu, který se získá odstředěním materiálu.
Krev pro bakterioskopické vyšetření se odebírá ze žíly. Dále se připraví přípravek husté kapky, která se obarví methylenovou modří.
Rýže. 4. Na fotografii je Neisseria meningitidis (pohled pod mikroskopem). Gramova skvrna.
Rýže. 5. Příprava hustých kapkových nátěrů. V preparátu (foto vpravo) jsou patrné meningokoky, zbarvené tmavě modře (barvení methylenovou modří).
Rýže. 6. Meningokoky v cytoplazmě neutrofilního leukocytu u pacienta s těžkou generalizovanou formou meningokokové infekce.
Diagnostika meningokokové infekce pomocí bakteriologické výzkumné metody
Analýza na meningokoka inokulací biologického materiálu (kultivační metoda) je citlivější než bakterioskopie. Pro výzkum se používají nátěry hlenu z nosohltanu, krve, pleurální tekutiny a mozkomíšního moku. Lékař obdrží odpověď do 4 dnů.
Meningokoky rostou dobře na médiích, která obsahují nativní protein (sérum a krev, ascitická tekutina, Bílek). Optimální teplota růstu 38-36 °C. Mikrobi nerostou na jednoduchých médiích. Neisseria meningitidis jsou aerobní (žijí a vyvíjejí se pouze v přítomnosti kyslíku). Pro získání čisté kultury se do živných médií přidávají antibiotika, která potlačují růst doprovodné mikroflóry.Po získání růstu meningokokových kolonií se provede test citlivosti na antibiotika.
Rýže. 7. Neisseria meningitidis rostoucí na sérovém agaru. Kolonie meningokoků jsou mírně konvexní, průsvitné, s hladkým povrchem a rovnými okraji, v procházejícím světle mají namodralý nádech.
Diagnostika meningokokové infekce pomocí metod sérologického výzkumu
Sérologické testy slouží k průkazu protilátek v lidském těle produkovaných proti meningokokovým antigenům. Tato technika se používá pro retrospektivní diagnostiku a aplikuje se v intervalech 7 až 12 dnů. K detekci patogenních antigenů se používají aglutinační reakce.
V poslední době se k detekci specifických protilátek v krvi nebo mozkomíšním moku pacienta používají expresní metody:
imunofluorescenční technika,
reakce enzymaticky značených protilátek,
gelová precipitační reakce,
imunoelektroforéza se skupinovým precipitujícím antisérem,
Aplikace PCR pro diagnostiku meningokokové infekce
Diagnostika černého kašle pomocí PCR (polymerázová řetězová reakce) je v moderních podmínkách nejslibnější technikou. Vysoká citlivost testu umožňuje detekovat DNA bakterií, i když jich je ve studovaném materiálu několik desítek nebo dokonce málo. Tato metoda je vysoce specifická. Jeho zvláštní hodnota spočívá ve skutečnosti, že detekce meningokoků v biologickém materiálu je možná, když jiné výzkumné metody dávají negativní výsledek.
Rýže. 8.Technika PCR je vysoce specifická a umožňuje detekovat DNA bakterií, i když jich je ve studovaném materiálu několik desítek nebo dokonce několik.
Mezi další výzkumné metody patří elektrokardiogram (EKG), fonokardiografie (PCG), elektroencefalogram (EEG), počítačová tomografie mozku (CT), neurosonografie (NSG), barevné dopplerovské mapování atd.
V případě potřeby jsou do vyšetřování pacientů zapojeni lékaři různých specializací - oftalmologové, otolaryngologové, neurologové.
Rýže. 9. Elektroencefalogram umožňuje odhalit strukturální změny v mozku.
Rýže. 10. Počítačová tomografie mozku umožňuje detekovat přítomnost hematomů, hydrocefalu a dalších prostor zabírajících lézí lokalizovaných v mozku.
Rýže. 11. Elektrokardiogram umožňuje studovat a zaznamenávat elektrická pole vznikající při práci srdce.
Rýže. 12. Neurosonografie (ultrazvuk) se používá ke studiu struktur lebeční dutiny u dětí ve věku do 1 roku.
Meningokokovou meningitidu je třeba odlišit od meningitidy způsobené stafylokoky, streptokoky, Klebsiella, Pseudomonas aeruginosa a Haemophilus influenzae, plísněmi, těžkou úplavicí, salmonelózou a břišním tyfem.
Meningokokémii, která se vyskytuje s vyrážkou, je třeba odlišit od zarděnek, spalniček, spály, yersiniózy, hemoragické vaskulitidy, trombopenických stavů a sepse.
Meningokokovou infekci, ke které dochází při poškození centrálního nervového systému, je třeba odlišit od akutních respiračních virových infekcí, včetně chřipky, ke které dochází při poškození mozku a jeho membrán.
Rýže. 13. Fotografie ukazuje meningokokémii u dospělého.
Včasná diagnostika meningokokové infekce a včasná léčba zajišťuje příznivý výsledek onemocnění.
