Listerioosi on tartuntatauti, joka aiheuttaa virulenteimpia ruokavälitteisiä infektioita. Listerioosi on yleinen eläimillä ja ihmisillä. Sille on ominaista monet tartuntalähteet, erilaiset tartuntareitit ja -tekijät, useat ilmenemismuodot ja korkea kuolleisuus. Listerioosi vaikuttaa tuhansiin ihmisiin maailmanlaajuisesti, joista 20–30 % kuolee. Kuolleisuus taudin vakaviin yleisiin muotoihin on 90-100%. Listerioosin oikea-aikainen diagnoosi antaa sinun määrätä riittävän hoidon, joka varmistaa potilaalle täydellisen parantumisen.
Riisi. 1. Kuvassa potilas, jolla on listeria aivokalvontulehdus.
Kliinisten ilmenemismuotojen monimuotoisuus ja infektion lähteen tunnistamisen mahdottomuus joissakin tapauksissa aiheuttaa poikkeuksellisia vaikeuksia kliinisiin ja epidemiologisiin tietoihin perustuvan diagnoosin tekemisessä. Tässä suhteessa listerioosin laboratoriodiagnoosi tulee ratkaisevan tärkeäksi.Alustava diagnoosi vahvistetaan bakterioskooppisen tutkimuksen perusteella. Lopullinen diagnoosi vaatii bakteriologisen vahvistuksen tai PCR:n.
Naisilla, jotka ovat synnyttäneet kuolleena lapsen tai joilla on listerioosin merkkejä, tutkitaan istukka, lapsivesi ja synnytyskanavavuoto.
Mekoniumia testataan vastasyntyneillä.
Potilaille, joilla epäillään listeria-aivokalvontulehdusta, tutkitaan aivo-selkäydinneste.
Ruumiista otetaan monenlaista biologista materiaalia.
Uloste ja suunielun pyyhkäisynäytteet otetaan bakteerien kulkeutumisen määrittämiseksi.
Listerioosin diagnoosi tavallisella ja fluoresenssimikroskopialla
Riisi. 2. Näkymä Listeriasta mikroskoopin alla. Bakteerit sijaitsevat yksittäin tai pareittain, harvemmin lyhyinä ketjuina. Kun Listeria värjätään Gram-värillä, se näyttää vaaleanpunaiselta.
Riisi. 3. Listeria kolmiulotteisen suurennuksen antavan mikroskoopin valossa näyttää sylintereiltä.
Riisi. 4. Listeria makrofageissa.
Listeria granuloomien mikroskopia
Solujen immuniteetin toiminnan heikkeneminen johtaa infektion leviämiseen koko kehossa. Spesifisiä granuloomia - listerioomat - muodostuu elimiin ja kudoksiin. Niiden erityinen koostumus määritetään mikroskoopilla sivelynäytteestä tai biopathista.
Listeria kasvaa huoneenlämmössä tavallisilla ravintoalustalla - lievästi emäksisellä ja neutraalilla. Viljelyt suositellaan tehtäväksi taudin ensimmäisten 7-10 päivän aikana.Inkubointi kestää 3 viikkoa 37 °C:n lämpötilassa. Kun maljataan glukoosi-veri-agarille, valitaan tyypilliset pesäkkeet (läpinäkyvät tai sarven muotoiset), jotka tuottavat hemolyysiä.
Riisi. 6. Listeria-pesäkkeet muistuttavat kastepisaroita lihapeptoniagarille kylvettynä. Läpäisevässä valossa pesäkkeet saavat helmiäisen sävyn.
Riisi. 7. Kun Listeria kasvaa kromogeenisellä agarilla, pesäkkeet saavat sinisen värin.
Riisi. 8. Kun kasvatetaan Oxford-agarilla, pesäkkeiden ympärille muodostuu musta halo.
Riisi. 9. Kun Listeria kasvaa liha-peptoniliemessä, muodostuu sameutta, jossa on hieman opalenssia.
Listerioosin diagnoosi biologisten näytteiden avulla
Biologiset testit perustuvat laboratorio-eläinten infektoimiseen potilaasta otetulla biologisella materiaalilla bakteerien havaitsemiseksi. Valkoiset hiiret, kanit, marsut ja arot ovat alttiina infektiolle.
Riisi. 10. Kuvassa valkoiset hiiret, jotka ovat saaneet listerioosin. Keskellä on terve hiiri. Hänen oikealla ja vasemmalla puolella imevät hiiret, joiden etujalat ovat halvaantuneet.
Riisi. 11. Vasemmalla olevassa kuvassa kanin listerioosi kehittyi suonensisäisen infektion jälkeen. Oikealla olevassa kuvassa näkyy tulehdusreaktio, joka kehittyi Listeria-injektiokohdassa.
Listeria-vasta-aineet määritetään käyttämällä serologisia reaktioita: agglutinaatioreaktiota (RA), epäsuoraa hemagglutinaatioreaktiota (IRHA) ja komplementin kiinnitysreaktiota (CFR) listeria-antigeenin kanssa pareilluissa seerumeissa. Jos potilaalla on listerioosi, tiitterin nousu kirjataan 4 kertaa tai enemmän. Reaktiot suoritetaan kahdesti 2 viikon tauolla.
Listeria- ja Staphylococcus-bakteerien antigeenisestä suhteesta johtuen väärät positiiviset tulokset ovat mahdollisia.
Kahden viikon kuluttua taudin alkamisesta potilaan verestä havaitaan IgG-vasta-aineita, jotka ovat läsnä veressä koko sairauden ajan. Kroonisen listerioosin aikana vasta-aineet pysyvät veressä pitkään.
Fluoresoiva vasta-ainemenetelmä
Immunofluoresenssireaktio (RIF) on nopea ja erittäin herkkä menetelmä listerioosin diagnosointiin. On olemassa suora ja epäsuora RIF-menetelmä. Kun vasta-aineita määritetään suoralla menetelmällä, fluorokromilla leimattua seerumia lisätään lasilevylle kiinnitettyyn mikrobisuspensioon. Kun sinivioletti (ultravioletti) valossa muodostuu antigeeni-vasta-ainekompleksi, bakteerit hehkuvat kirkkaanvihreänä fluoresenssimikroskoopissa.
Riisi. 12. Glow of Listeria immunofluoresenssireaktion aikana.
Listeria-veritesti on tehokas tapa havaita listeria-infektio. Listerioosin eri muodoissa mononukleaaristen fagosyyttien - makrofagien - järjestelmä aktivoituu potilaiden kehossa. Ne vangitsevat ja tuhoavat solunsisäisesti elävät bakteerit ja virukset, lukevat tietoa niiden rakenteesta ja välittävät sen T-lymfosyytteihin. Tämän jälkeen B-lymfosyytit alkavat tuottaa vasta-aineita, jotka tuhoavat patogeenin. Sairauden myötä monosyyttien määrä perifeerisessä veressä kasvaa. Listerioosin septisessä muodossa niiden määrä on 70% (normilla 3 - 11%).
Riisi. 13. Kuvassa monosyytit ovat ääreisveren suurimpia soluja.
Listerioosin diagnosoimiseksi käytetään intradermaalista (allergista) testiä. Listeria-antigeeniä annetaan intradermaalisesti. 24 tunnin kuluttua reaktiota tutkitaan. Jos testattavan kehossa on listeriaa, iholle ilmestyy listeria-antigeenin sisäänvientikohtaan vähintään 10 millimetrin pituinen papule (infiltraatti).
Ihonsisäinen testi tehdään päivinä 6-9 sairastumishetkestä.
Yksittäisten listerioositapausten tapauksessa taudin diagnoosi on suoritettava bakteriologisella menetelmällä ja PCR-menetelmällä.
