Diagnostika giardiózy je obtížný úkol. Nemoc nemá žádné patogonické příznaky. Často se klinický obraz giardiózy překrývá s jinými onemocněními gastrointestinálního traktu. Z mnoha důvodů není vždy možné detekovat protilátky v krevním séru. Mikroskopická metoda má také svá omezení – nemožnost rozlišit blízce příbuzné druhy Giardia a četnost izolace cyst činí skatologickou diagnostickou metodu méně vypovídací.
Analýza pro Giardia zahrnuje analýzu stolice, krve a obsahu dvanáctníku:
Mikroskopie nativního (nezbarveného) nátěru a nátěru obarveného Lugolovým roztokem k detekci cystických forem ve formovaných a precystických formách parazita v tekutém trusu. S průjmem a v duodenálním obsahu jsou detekovány vegetativní formy patogenů.
Detekce vegetativních forem Giardia během duodenální intubace. Biopsie duodena je nejspolehlivější diagnostickou metodou.
Detekce protilátek proti patogenu v krevním séru pomocí ELISA a RNIF je citlivější metodou. Některé laboratoře provádějí testy na detekci antigenů parazitů ve stolici. Tato technika pro diagnostiku giardiózy je vhodnější než hledání cyst ve stolici pacienta.
Molekulárně genetická metoda je považována za vysoce citlivou.
Giardia se pěstuje na umělých živných půdách, ale tato technika se v praxi nepoužívá.
Vzhledem k nedostatku 100% senzitivity každé z výše uvedených metod musí být diagnostika giardiázy prováděna komplexně.
Rýže. 1. Na fotografii je Giardia (vegetativní forma parazita, trofozoiti).
Parazitologický výzkum
Při podezření na onemocnění se provádějí testy na Giardii: vyšetřují se výkaly a duodenální obsah. Cysty jsou detekovány ve fekálních hmotách s průjmem (v tekutých fekálních hmotách), v duodenálním obsahu jsou detekovány cysty i trofozoity, detekovány jsou pouze trofozoity (mobilní vegetativní formy parazitů).
Rýže. 2. Giardia pod mikroskopem.
Rýže. 3. Na fotografii jsou mobilní vegetativní formy Giardia (na obrázku výše) a cysta parazita (foto níže).
Skatologická výzkumná metoda
Skatologická výzkumná metoda (analýza stolice pro Giardia) je nejdostupnější, ale méně informativní. S jeho pomocí se zjišťují parazitické cysty, vylučované u pacientů se stolicí od 5. do 7. dne onemocnění intermitentně, každých 2 až 21 dní (v průměru každých 8 až 14 dní).
Během „tichého“ období se uvolňování cyst zastaví. Tato okolnost vyžaduje opakované vyšetření trusu a použití dalších laboratorních technik.V čerstvém trusu odebraném 15 - 20 minut před začátkem studie jsou vegetativní formy Giardia detekovány v 5 % případů. Během půl hodiny nebo hodiny vegetativní formy odumírají a cysty se „scvrknou“ a spojí se s detritem, což znemožňuje jejich detekci.
Na Giardii by měli být vyšetřeni pacienti s onemocněním trávicího traktu se sklonem k chronicitě, se současnou neurocirkulační dysfunkcí, s dlouhodobou eozinofilií a alergickými onemocněními.
Optimalizace skatologického výzkumu lze dosáhnout následujícím způsobem:
provedení 4-5násobné analýzy stolice na Giardii v intervalech 7-8 dnů;
vyloučení na 5 - 7 dní z užívání antiparazitik;
pokud není možné dopravit čerstvě odebranou stolici do laboratoře, doporučuje se použít konzervační prostředky v poměru tři díly konzervantu na jeden díl stolice;
při zácpě je nutné v předvečer vyšetření stolice na lamblie užít projímadlo (gutalax, senáda atd.) a/nebo choleretika.
Rýže. 4. Na fotografii jsou vegetativní formy parazitů - trofozoity (elektronová rastrovací mikroskopie).
Rýže. 5. Cysty Trophozoite (foto A) a Giardia (foto B).
Mikroskopie obsahu duodena
V duodenálním obsahu při giardiáze jsou mobilní formy Giardie (vegetativní formy, trofozoidy) detekovány s větší frekvencí než ve stolici. Pokud však Giardia parazituje v dolních částech tenkého střeva, jsou výsledky testu negativní. Studie obsahu duodena by měly být prováděny současně s vyšetřením stolice. V poslední době se tento typ výzkumu používá jen zřídka.
K identifikaci specifických imunoglobulinů se provádí krevní test na Giardii. Předpokládá se, že hlavním faktorem patogenity Lamblia intestinalis (hlavního imunogenu) je antigen Ag GSA-65, na jehož základě byly vytvořeny moderní testovací systémy, které se používají k diagnostice tohoto onemocnění.
V laboratorní diagnostice giardiázy jsou slibné metody enzymové imunoanalýzy (ELISA) a imunofluorescence (RNIF). S jejich pomocí jsou detekovány sérové imunoglobuliny tříd G a M pacientů a nosiče a antigeny ve vzorcích stolice. Senzitivita a specificita těchto metod pro diagnostiku giardiózy je více než 90 %.
Imunoglobuliny IgM a IgG se objevují v krvi od 12 do 14 dnů nemoci. Přítomnost imunoglobulinů IgM i IgG naznačuje, že pacient má giardiázu. Po sanitaci IgM zmizí a IgG přetrvává až dva měsíce.
Úroveň IgM (v nepřítomnosti IgG) indikuje přítomnost akutní giardiázy u pacientů, u kterých k invazi došlo maximálně před 3 měsíci.
hladina IgG (v kombinaci s nebo bez IgM) indikuje chronický průběh giardiázy nebo počáteční fázi rekonvalescence akutní giardiázy.
Čím vyšší je hladina protilátek v krevním séru pacienta, tím častěji je pozorována negativní sekrece cyst.
Protilátky nejsou detekovány u dětí s lymfaticko-hypoplastickou diatézou a u pacientů s neúčinnými humorálními obrannými mechanismy, což přispívá k chronicitě infekčního procesu. Léčba giardiózy se v tomto případě provádí podle jednotlivých schémat.
Analýza Giardia se současným použitím sérologických a skatologických metod umožňuje přesnější identifikaci onemocnění. Diagnóza giardiózy pouze na základě výsledků skatologických výzkumných metod je považována za neopodstatněnou.
Rýže. 7. Na fotografii jsou cysty lamblia střevní.
Biopsie tenkého střeva je cenným diagnostickým testem, který umožňuje identifikovat a posoudit rozsah poškození sliznice a odhalit parazity. Tato technika se používá v extrémních případech.
Rýže. 8. Při giardiáze jsou poškozeny klky sliznice tenkého střeva. Na fotografii vlevo je mikroskopie bioptického materiálu od pacienta s giardiázou. Na fotografii vpravo se Giardia pohybuje směrem ke střevním klkům.
Pokud pacient onemocní, provede se obecný krevní test.
Rýže. 9. Eozinofilie indikuje rozvoj alergických reakcí u pacienta s giardiázou (foto vlevo). Při dlouhém a těžkém průběhu onemocnění vzniká anémie (foto vpravo).
Giardiáza by měla být odlišena od bakteriální a virové gastroenteritidy. Podobný obrázek poskytuje střevní helmintiáza, bakteriální a amébová úplavice.
