Detekce opisthorchidních vajíček ve stolici je jedinou hlavní spolehlivou metodou („zlatý“ standard) potvrzující přítomnost onemocnění u pacienta. Diagnostika opisthorchiázy v časných stádiích onemocnění je obtížná, protože vajíčka parazitů se objevují ve stolici 4–6 týdnů po infekci.
Opisthorchiáza je parazitární onemocnění způsobené červy rodu Opisthorchis - Opisthorchisviverrini A Opisthorchisfelineus (motolice sibiřská nebo kočičí, motolice kočičí), patřící do třídy motolic (třematodů). Helminti se dostávají do těla lidí a masožravců požitím špatně tepelně zpracovaných, syrových nebo nasolených ryb z čeledi kaprovitých. Parazitní toxiny způsobují u člověka akutní alergózu (alergickou reakci), sami parazité působí mechanickým působením na žlučník, žlučové cesty a vývody slinivky břišní.Hromadění opisthorchidních vajíček vede k obstrukci průchodů, v důsledku čehož je ztížen odtok žluči a pankreatických šťáv.
Absence specifických klinických příznaků ztěžuje diagnostiku opisthorchiázy. Faktory příslušnosti k původním obyvatelům Severu, přítomnost v ohniscích opisthorchiázy a konzumace nedostatečně tepelně upravených, syrových nebo málo nasolených ryb z čeledi kaprovitých poskytnou významnou pomoc při rozpoznání nemoci.
Rýže. 1. Na fotce je Opisthorchi felineus.
Rýže. 2. Opisthorchis pěstovaný v laboratorních podmínkách.
Diagnostika opisthorchiázy pomocí mikroskopické metody
Detekce vajíček opisthorchiázy ve stolici je „zlatým“ standardem pro diagnostiku opisthorchiázy. Vajíčka parazitů se mohou nacházet ve výkalech, obsahu duodena a žluči. Je však třeba vzít v úvahu řadu okolností:
vajíčka parazitů se objevují ve výkalech 4 - 6 týdnů po infekci;
kvůli nekonzistentní produkci vajíček opisthorchidy by mělo být odebráno několik vzorků stolice k analýze;
Ve výkalech se mohou nacházet „tranzitní“ vajíčka – ta, která se dostala do střev při konzumaci jater infikovaných parazity. Nevyvíjejí se, ale jsou vylučovány společně s fekáliemi.
Při vyšetřování trusu na přítomnost opisthorchidních vajíček se používají obohacovací metody k dosažení zvýšení koncentrace vajíček parazitů na povrchu tekutiny nebo v sedimentu (Kalantaryan, Fulleborn, Krasilnikov, Bermanova metoda, Shulmanova vířivá metoda). Při identifikaci opisthorchidních vajíček se používá metoda jednoduché mikroskopie a hustého stěru (metoda Kato).
Pokud jsou výsledky negativní, fekální vyšetření se několikrát opakuje v intervalu 5–7 dnů.
Obr.Nádoby na sběr výkalů pro analýzu. Nádoby na sběr výkalů pro analýzu.
Rýže. 4. Detekce vajíček opisthorchiázy ve stolici je „zlatým“ standardem pro diagnostiku opisthorchiázy.
Rýže. 5. Mnohočetná vajíčka v děloze opisthorchis (skleněný vzorek).
Posouzení intenzity invaze
Po identifikaci vajíček parazitů se spočítá počet vajíček, k čemuž se používá Stoll metoda - stanovení počtu vajíček v 1 gramu trusu.
méně než 1000 vajec na 1 gram. výkaly - nízká intenzita invaze;
od 1 do 5 tisíc vajec - střední intenzita invaze;
5 tisíc a více - vysoký stupeň intenzity invaze.
V extrémně závažných případech opisthorchiázy může počet vajíček parazitů překročit 30 tisíc v 1 gramu stolice.
Pokud je intenzita invaze nízká, jsou pacientovi předepsány choleretické léky nebo slepé sondování. Provokativním faktorem zvýšeného uvolňování vajíček parazitů ve výkalech je antiparazitární léčba.
Rýže. 6. Opisthorchi felineus ve výkalech.
Diagnostika opisthorchiázy pomocí mikroskopie duodenálního obsahu
Pokud se při mikroskopii stolice nezjistí opisthorchidní vajíčka, použije se obsah získaný duodenální intubací pro diagnostické účely. Studie musí být provedena během prvních dvou hodin po obdržení materiálu. Při delším skladování v obsahu duodena dochází k lýze vajíček. Všechny části materiálu - A, B a C - jsou vyšetřeny na detekci vajec.
Rýže. 7. Vejce Opisthorchid felineus. Skořápka vejce je tenká, dobře ohraničená. Na jednom z pólů vajec je „víčko“, na druhém konci je tuberkulo (výčnělek skořápky).
Při opisthorchiáze způsobují odpadní produkty parazitů senzibilizaci lidského těla a rozvoj závažných alergických reakcí. Rozvoj akutní alergózy je indikován zvýšenou hladinou eozinofilů v krvi. Tyto krvinky absorbují a vážou histamin a další mediátory alergie a zánětu a aktivně se podílejí na tvorbě antiparazitární imunity.
Eozinofilie se vyskytuje od prvních dnů vývoje onemocnění, postupně se zvyšuje a po 18-30 dnech dosahuje maxima, které se pohybuje od 60 do 90%. Dále se počet eozinofilů v krvi postupně snižuje. U chronické opisthorchiázy klesá hladina eozinofilie na 5 - 12 %. U těžké opisthorchiázy pokračuje proces snižování počtu eozinofilů déle než jeden měsíc.
Při opisthorchiáze se zvyšuje počet leukocytů a ESR v krvi. U dětí se často rozvine anémie.
Při poruše jaterních funkcí se zvyšuje hladina bilirubinu, alkalické fosfatázy, suleymických a thymolových testů, sérových transamináz (ALT a AST) a klesá hladina sérového albuminu.
Při poruše funkce slinivky břišní se ráno nalačno zvyšuje hladina glukózy v krevním séru, klesá hladina trypsinu, lipázy a amylázy v obsahu duodena, zvyšuje se jejich hladina v krevním séru a hladina diastázy. v moči se zvyšuje.
V polovině případů opisthorchiázy se kyselost žaludeční šťávy snižuje.
Rýže. 8. Na fotografii vlevo je eozinofil pod mikroskopem. Fotografie vpravo ukazuje shluk eozinofilů.
Rýže. 9. Fotografie ukazuje nahromadění eozinofilů v tkáních pacienta.
Diagnostika opisthorchiázy pomocí imunologických metod
Imunologické diagnostické metody umožňují detekovat protilátky v krvi, které jsou produkovány tělem pacienta v reakci na invazi opisthorchidu.
Během akutní fáze opisthorchiázy je pozorováno zvýšení hladiny imunoglobulinů IgM v krvi pacienta, což poskytuje primární imunitní odpověď. Postupem času se jejich hladina snižuje.
Při chronické opisthorchiáze se v krvi pacientů zvyšuje hladina imunoglobulinů IgG, což zajišťuje dlouhodobou imunitní odpověď.
Pro opisthorchiázu se používá imunologická metoda ELISA (enzyme-linked immunosorbent assay). Jeho diagnostická hodnota je poměrně vysoká. U pacientů s opisthorchiázou v akutní fázi dosahuje účinnost ELISA 90%, v chronické fázi - 51,6%.
Negativní stránkou imunologických výzkumných metod je příjem falešně pozitivních a falešně negativních výsledků. Proto se 1 - 1,5 měsíce po zjištění zvýšené hladiny IgM doporučuje provést test na detekci vajíček parazitů v obsahu duodena. Pokud je zjištěna zvýšená hladina IgG, okamžitě se provede studie duodenálního obsahu.
Nebylo přesně stanoveno, jak dlouho protilátky zůstávají v krvi po vyléčení opisthorchiázy, takže není možné posoudit uzdravení osoby na základě výsledků získaných z imunologické studie.
Konečná diagnóza opisthorchiázy je stanovena pouze na základě výsledků parazitologické studie.
Rýže. 10. Mnoho parazitů ve žlučových cestách (foto vlevo). Na fotografii vpravo je opisthorchis fixován ke stěně žlučníku pomocí přísavek a stahuje jej.
Rýže. 11. Fotografie jasně ukazuje tři opisthorchidy ve žlučovodu jater (skleněný vzorek).
Diagnostika opisthorchiázy pomocí molekulárních metod
Pomocí polymerázové řetězové reakce je možné detekovat fragmenty DNA parazitů ve stolici pacienta s opisthorchiázou. Když je intenzita infekce nízká, ukazuje se tato technika jako slabě citlivá. Při střední a vysoké úrovni invaze poskytuje tato diagnostická metoda dobré výsledky.
K diagnostice opisthorchiázy se používá ultrazvuk, MRI, CT, cholecystografie atd. Pomocí instrumentálních diagnostických metod se odhalují známky dyskineze žlučových cest a žlučníku, snížená vylučovací funkce jater, dilatace žlučových cest.
Ultrazvukovým vyšetřením se zjišťuje velikost a stav stěn žlučových cest a žlučníku, v některých případech jsou detekovány shluky parazitů.
Pomocí endoskopické retrográdní cholangiopankreatikografie je studován stav žlučových a pankreatických vývodů.
Pomocí perkutánní transhepatické cholangiografie se zjišťuje úroveň a příčiny mechanické obstrukce a identifikují se parazité ve žlučových cestách.
K vyšetření břišních orgánů se používá počítačová tomografie (CT) a magnetická rezonance (MRI).
Rýže. 12. Fotografie ukazuje opisthorchid ve žlučovodu.
Rýže. 13. Na fotografii vlevo jsou v pankreatickém vývodu jasně patrné tři opisthorchis. Na fotografii vpravo je skupina opisthorchidů v pankreatickém vývodu.
