אבחון דיפטריה מבוסס על נתונים קליניים, ולאחר מכן אישור האבחנה בבדיקה בקטריולוגית. אבחון מעבדה של דיפטריה כולל מספר מחקרים, שהעיקרי שבהם הוא מיקרוביולוגי.
לעתים קרובות, די בהיסטוריה רפואית שנאספה בקפידה ובדיקה של אורופרינקס כדי לקבוע אבחנה. כל עיכוב בביסוס האבחנה ורישום טיפול הולם מגדיל את הסבירות לתוצאה שלילית של המחלה.
בידוד של תרבית של פתוגנים עם קביעה לאחר מכן של טוקסיגניות בפתוגנים המבודדים היא השיטה העיקרית והיחידה לאבחון מיקרוביולוגי של דיפטריה.התוצאה המוקדמת מתקבלת לאחר 24 שעות, לאחר 48 שעות מתקבלת תוצאת בדיקת החיידקים דיפתריה לרעילות, לאחר 72 שעות נקבע הביווואר של הפתוגן.
בדיקה מיקרוסקופית לאיתור דיפטריה אינה הגיונית.
אבחון סרולוגי מבוסס על קביעת העלייה בטיטר של נוגדנים אנטיבקטריאליים. התוצאות מתקבלות בשבוע השני של המחלה.
כאשר מאבחנים דיפטריה, משתמשים בשיטה גנטית (PCR) לקביעת ה-DNA של חיידקים.
תגובת צמיחת לטקס היא שיטה מהירה. התוצאה מתקבלת תוך שעתיים.
ניתוח אימונופלואורסצנטי הוא פרודוקטיבי. עם זאת, זה צריך להתבצע רק על ידי צוות מיומן.
אורז. 1. סרט לבן מלוכלך ונפיחות בולטת של רקמת השומן התת עורית של הצוואר - "צוואר שור" - הם סימנים קלאסיים לדיפתריה.
אבחון מיקרוביולוגי של דיפטריה
בדיקה מיקרוביולוגית היא השיטה העיקרית לאבחון מעבדתי של דיפתריה.
שיטת זריעה על חומרי הזנה
באילו מקרים מתבצעת בדיקה בקטריולוגית?
מחקר בקטריולוגי מתבצע במקרים הבאים:
לצורך אבחון דיפטריה של הלוע, האף והלוע במבוגרים וילדים,
על מנת לזהות נשיאת חיידקים אפשרית אצל אנשים הנכנסים למוסדות גן ומוסדות מיוחדים למבוגרים,
על מנת לזהות את המחלה בקרב אנשי קשר.
חומר למחקר
חומר למחקר (מריחה לדיפתריה) נאסף על בטן ריקה או שעתיים לאחר האכילה. למחקר, נעשה שימוש בסרטי דיפתריה או פיסות רקמה הממוקמות בקרבת מקום, הפרשות מהאזורים הפגועים וריר האף-לוע.
שיטת איסוף החומר
איסוף החומר (מריחה לדיפתריה) מתבצע באמצעות מקלון צמר גפן. שורש הלשון נלחץ בעזרת מרית. באמצעות מקלון צמר גפן, אתה צריך לגעת בקרום הרירי של השקדים בגבול הסרט, הקשתות והקיר האחורי של הלוע. לאחר מכן, הספוגית מורידה לתוך מבחנה סטרילית מבלי לגעת בדפנות שלה.
יש לשלוח למעבדה תוך 3 שעות ראשונות. אם אי אפשר לחסן ב-3-4 השעות הקרובות, אוספים את החומר בעזרת צמר גפן סטרילי, המורטב בתמיסת 5% של גליצרין בתמיסה איזוטונית של נתרן כלורי או בתמיסת 2% של אשלגן טלוריט.
איסוף החומר (מריחה לדיפתריה) מתבצע באמצעות שני צמר גפן, שאחד מהם משמש לתרבית, השני למיקרוסקופיה.
אם יש חשד לדיפתריה, יש צורך להודיע לצוות המעבדה כדי שהחומר שנאסף יחוסן על גבי מדיה מתאימה (אגר דם, מדיום לפלר או מדיום טלוריט).
גידול חיידקי דיפתריה
החיסון מתבצע על חומרי הזנה (אגר דם, מדיום לפלר או מדיום טלוריט). טלוריט בריכוז גבוה מדכא את צמיחת המיקרופלורה הנלווית.
אורז. 2. בתצלום ניתן לראות גידול של מושבות חיידקי דיפתריה על מדיות שונות - אגר דם ומצע טלוריט.
כאשר חיידקים גדלים על אגר דם, המושבות מקבלות צבע לבנבן, הן אטומות, עגולות, בצורתן קמורה, בקוטר של 1 - 2 מ"מ, לרוב בעלות עקביות שמנונית.
כאשר חיידקים גדלים על חומרי טלוריט, המושבות אפורות, קמורות ובעלות קצוות חלקים. לאחר יומיים, המושבות רוכשות צבע אפור כהה או שחור, יש להן ברק מתכתי, קצוות חלקים או מסולסלים, פני השטח חלקים או מפוספסים רדיאליים.
זיהוי הביוטיפ (זן הזנים) של דיפתריה
זיהוי זנים של זנים של פתוגני דיפתריה מבוסס על יכולתם של חיידקים לפרק גליקוגן ועמילן. למטרות אלו, נעשה שימוש בטכניקת הסדרה ה"ארוכה" של פחמימות.
בהתחשב במאפיינים האנזימטיים של פתוגנים ובמבנה של מושבות במהלך גדילה על מדיה טלוריטית, נבדלים 4 ביוטיפים של Corynebacterium diphtheria: Corynebacterium diphtheriae gravis, Corynebacterium diphtheriae mittis, Corynebacterium diphtheriae intermedius ו- Corynebacterium diphtheriae.
אורז. 3. בתמונה משמאל מושבות של Corynebacterium diphtheriae gravis. הם גדולים בגודלם, קמורים במרכז, מפוספסים רדיאלית, עם קצוות לא אחידים. בתמונה מימין נראה Corynebacterium diphtheriae mittis. הם קטנים בגודלם, צבעם כהה, חלקים ומבריק, עם קצוות חלקים.
קביעת רעילות של חיידקי דיפתריה
הרעילות של פתוגני דיפתריה נקבעת לאחר בידוד תרבית החיידקים. למטרות אלו, נעשה שימוש בשיטה של משקעים מפוזרים בג'ל ובשיטת קביעת הרעילות של חיידקים באורגניזם חי (שפני ניסיונות).
טכניקת בקטריוסקופיה
לאבחון מעבדה באמצעות מיקרוסקופיה יש חשיבות משנית. בשל העובדה שפתוגני דיפתריה אינם סופגים צבעים היטב, צביעת גראם נחשבת לא ספציפית, אך היא מאפשרת זיהוי עקיף של קורינבקטריות לא פתוגניות, הממוקמות במקביל זו לזו במריחה.
כאשר צובעים לפי נייסר, מתגלים גרגירי באבש-ארנסט האופייניים לחיידקי דיפתריה, הממוקמים בקטבים של התאים ומשווים להם מראה של מועדון.
במריחות, חיידקי דיפתריה פתוגניים ממוקמים בזווית זה לזה.
כדי לזהות גרגירי Babes-Ernst, נעשה שימוש בטכניקת מיקרוסקופיה פלואורסצנטית. כאשר מריחות מוכתמות בקוריפוספין במיקרוסקופ, ניתן לראות גופי תאים חיידקיים צהובים-ירוקים עם גרגרי וולוטין כתומים-אדומים.
אורז. 4. חיידקי דיפתריה במיקרוסקופ. צביעת גראם.
אורז. 5. בתמונה משמאל נראים חיידקי הפסאודיפטריה של הופמן. הם נמצאים לעתים קרובות בלוע האף. הם עבים, קצרים, ממוקמים בתנועות מקבילות זו לזו. התמונה מימין היא חיידקים פתוגניים. במריחה הם ממוקמים בזווית זה לזה.
בדיקות סרולוגיות יכולות לזהות נוגדנים אנטיבקטריאליים ואנטי-רעילים. גילוי נוגדנים אנטיבקטריאליים הוא משמעותי, שכן תכולת האנטי-טוקסין משתנה עקב שימוש בסרום אנטי-רעיל מהימים הראשונים. השכיחה ביותר כיום היא תגובת ההמגלוטינציה הפסיבית (RPHA ו-RPHA).
אימונוגלובולינים G ו-M מצביעים על חומרת התהליך הזיהומי.
אימונוגלובולין G מצביע על מחלה לאחרונה.
אימונוגלובולינים M מצביעים על דיפתריה חריפה.
עם דיפתריה, טיטר הנוגדנים עולה עם הזמן. ירידה בריכוז הנוגדנים מעידה על החלמת המטופל.
נוגדנים נגד דיפתריה נוצרים לאחר החיסון. הם מסתובבים בדמו של אדם מחוסן במשך שנים רבות.
הודות לשימוש בטכניקות נוגדנים פלואורסצנטיים, ניתן היה לבצע ניתוח איכותי וכמותי של אנטיגנים תוך תאיים ומשטחיים בדגימות של תרחפי תאים. אנטיגנים מומחשים באמצעות נוגדנים ספציפיים עם סמנים ניאון. השימוש בטכניקה זו הוא מהימן רק לצוות מיומן במיוחד.
טכניקת PCR משמשת לגילוי מוקדם של חיידקי דיפתריה, אישור אבחנה ובמקרים של כאב גרון לא טיפוסי. זיהוי הגן הטוקסיקוגני באמצעות PCR הוא השיטה המהירה והאמינה ביותר לאבחון מעבדתי של דיפטריה.
אורז. 6. PCR היא השיטה המהירה והאמינה ביותר לאבחון מעבדתי של דיפתריה.
עם נזק רעיל לשריר הלב, שינויים מצוינים באלקטרוקרדיוגרמה, פונוקרדיוגרמה ואולטרסאונד של הלב. הפעילות של מספר אנזימים (לקטט דהידרוגנאז, קריאטין פוספוקינאז, אספרטאט אמינוטרנספראז) נחקרת.
פגיעה בכליות בדיפתריה מתבטאת בצורה של נפרוזה רעילה. אם יש חשד לסיבוך זה, מבצעים בדיקת דם ושתן כללית, מחקרים ביוכימיים (קביעת קריאטינין, אוריאה, שאריות חנקן) ובדיקת אולטרסאונד של הכליות.
נזק לכבד רעיל מתרחש עם תסמינים של היפוגליקמיה (ירידה ברמות הגלוקוז בדם) וגלוקוזוריה (נוכחות של גלוקוז בשתן).
נוכחות או היעדר חסינות נגד דיפתריה נקבעת באמצעות בדיקת Schick תוך עורית, המתבצעת עם רעלן דיפטריה.
במקרה של תגובה שלילית, הם מדברים על חסינות לדיפתריה. כיום, תגובת שיק משמשת רק להתוויות אפידמיולוגיות. זה לוקח כמה ימים כדי להשלים. עם זאת, למרות זאת, זה עוזר לקבוע את מידת הרגישות לדיפתריה של אנשים שהיו במגע עם החולה ולהבהיר את מצבם החיסוני.
אורז. 7. תגובת שיק מתבצעת עם רעלן דיפתריה. רעלן דיפתריה סטנדרטי במינון של 0.2 מ"ל מוזרק תוך עורית לשליש האמצעי של האמה באמצעות מזרק טוברקולין.
