Diagnos av malaria baseras på data från kliniska manifestationer, epidemiologiska undersökningar och laboratorieforskningsmetoder, inklusive metoder för att identifiera parasiter, deras antal, arter och påvisande av antikroppar i kroppen på den som studeras. Först och främst är patienter från riskgruppen föremål för undersökning - de som kom från regioner som är endemiska för malaria och som utvecklade feber under de första två åren efter att de lämnat dessa regioner.
Ris. 1. Blodprov för att förbereda preparatet för "tjocka droppar".
Ris. 2. Färg och typ av preparat: "tjock droppe" och tunt smet.
Diagnos av malaria med mikroskopisk metod
Mikroskopi av en "tjock droppe" och ett tunt utstryk, som gör det möjligt att upptäcka parasiter, deras antal och arter, är den ledande metoden för att diagnostisera malaria. Det utförs vid minsta misstanke om denna sjukdom, oavsett patientens temperaturreaktion. Ett tunt blodutstryk används för att bestämma arten av parasiter och sjukdomsstadiet. Fler parasiter är lokaliserade i en tjock droppe än i ett utstryk.Denna diagnostiska metod är 20 till 40 gånger överlägsen metoden för att bestämma förekomsten av malariapatogener i ett tunt blodutstryk.
Parasiter upptäcks i perifert blod en viss tid efter infektion:
för 3-dagars malaria - efter 8 - 12 dagar,
för tropiska - från fem och en halv dag till 12,
med 4 dagar - efter 15 - 21 dagar,
för malaria liknande 3 dagar - efter 9 - 15 dagar.
Parasiter finns i blodet både under en feberattack och i interiktalperioden och under parasittransport.
Ris. 3. Teknik för att förbereda ett tunt utstryk.
Teknik för att förbereda en "tjock" droppe
En droppe blod som erhålls genom att sticka ett finger appliceras på en tidigare rengjord och torr glasskiva och smetas ut tills en fläck på 1 cm i diameter erhålls. Efter torkning i luft fylls objektglaset med Romanovsky-Giemsa-färg. Efter 40 minuters exponering sköljs läkemedlet under rinnande vatten och torkas vid rumstemperatur, ställs i vertikalt läge.
Minst 100 synfält undersöks i mikroskop. Det anses mer effektivt att studera 2 tjocka droppar i 2,5 minuter än att studera 1 droppe i 5 minuter. 100 synfält ses även i de fall malariaplasmodi upptäcks redan i de första fälten. Detta görs för att inte missa en blandinfektion.
Ris. 4. Mikroskopi av ett "tjockt dropp"-preparat och ett tunt utstryk är den ledande metoden för att diagnostisera malaria.
Parasitdetektionströskel
Detektionströskeln för malariaplasmodi är den lägsta koncentrationen av patogener som kan detekteras genom mikroskopi av ett "tjockt dropp"-preparat. Under sjukdomen är denna siffra 5 parasiter i en mikroliter blod.Vid visning av 100 synfält undersöks 0,2 μl blod.
Om det finns indirekta tecken på malaria (vistelse i endemiska områden, hypokrom anemi, upptäckt av pigment i monocyter) och negativa resultat av studien av "tjocka droppar" läkemedel, upprepas studien mer noggrant, och inte bara en, utan en serie bestående av 4 - 6 läkemedel med en injektion, eller erhållna under blodprovstagning, som utförs 4 - 6 gånger om dagen i 2 - 3 dagar.
Intensiteten av parasitemi bestäms av tecknet "+".
1 (+) indikerar detektion av 1 till 100 parasiter i 10 p/z, vilket motsvarar 5 - 50 plasmodia i en μl blod;
2 (+) indikerar detektion av 10 till 100 parasiter i 10 p/z, vilket motsvarar 50 - 500 plasmodia i en μl blod;
3 (+) indikerar detektion av 1 till 10 parasiter i 1 p/z, vilket motsvarar 500 - 5000 plasmodia i en μl blod;
4 (+) indikerar detektion av 10 till 100 parasiter i 1 p/z, vilket motsvarar 5 000 - 50 000 plasmodia i en μl blod;
5 (+) indikerar detektion av mer än 100 parasiter i 1 p/z, vilket motsvarar mer än 50 000 plasmodier i en μl blod.
Intensiteten av parasitemi kan beräknas genom antalet parasiter per 100 röda blodkroppar i 10 synfält, eller av förhållandet mellan antalet parasiter och leukocyter i 1 μl blod.
Intensiteten av parasitemi bestämmer prognosen för tropisk malaria. Vid andra typer av sjukdomar påverkas inte mer än 2 % av de röda blodkropparna.
Former av malariaplasmodi i olika utvecklingsfaser
I den "tjocka droppen" blodpreparatet är det möjligt att identifiera malariaplasmodia i olika utvecklingsstadier - trofozoid, ring, schizont, morula och gameter.
Ris. 5.Plasmodium ovale har en rund form.
Ris. 6. Ung Plasmodium vivax trofozoit i en erytrocyt.
Ris. 7. Juvenila trofozoider av Plasmodium falciparum.
Ris. 8. Ringformade trofozoiter av Plasmodium vivax.
Ris. 9. Amoeboid schizonter Plasmodium vivax.
Ris. 10. Mogna schizonter Plasmodium vivax.
Ris. 11. Kvinnliga gametocyter av tropiska malariapatogener.
Ris. 12. Gametocyter av plasmodia av tropisk malaria är halvmåneformade, medan plasmodia av andra typer av sjukdomen är runda.
Ris. 13. Under tillväxten ackumuleras pigment i cytoplasman hos parasiter. Bilden visar R. vivax.
Övervakning av behandlingens effektivitet
Med adekvat behandling av malaria minskar nivån av parasitemi inom 24 timmar med 25% eller mer, och efter 3 dagar från behandlingens början bör den inte vara mer än 25% av den initiala nivån. Om parasiter upptäcks den 4: e dagen från behandlingens början indikerar detta utvecklingen av läkemedelsresistens hos patogenerna.
Frekvens av forskning
När malaria upptäcks görs dagligen mikroskopisk undersökning av blodprodukter. Vid svåra former av tropisk malaria utförs mikroskopi 2 gånger om dagen tills patogenerna försvinner i blodet och sedan varje vecka fram till den 28:e behandlingsdagen för att bedöma dess effektivitet och identifiera resistens mot malarialäkemedel.
Ris. 14. När de infekteras med P. vivax och P. ovale, blir röda blodkroppar förstorade, missfärgade och deformerade, och giftig granularitet uppträder i dem.
När de infekteras med P. malariae och P. falciparum förändras inte formen och storleken på röda blodkroppar. Bilden visar deformerade röda blodkroppar från en malariapatient (scanning mikroskop mikroskop).
Immunologiska metoder för att diagnostisera malaria
Med serodiagnos av malaria är det möjligt att detektera antikroppar och lösliga parasitantigener i patientens blodserum. Serologiska tester är indikerade för användning i fall av feber av okänt ursprung, hepatosplanomegali, anemi hos patienter, såväl som för studier av donatorblod - den förmodade infektionskällan. Serologiska tester används för epidemiologisk övervakning av personer som bor i områden som tidigare var ogynnsamma för malaria.
Oftast, vid diagnos av malaria, används NIIF - indirekt immunfluorescensreaktion. ELISA, RIGA etc. används också. Användningen av enzymmärkt antikroppsreaktion (ERMA) införs i praktiken.
Vid mycket låg parasitemi är användning av PCR (polymeraskedjereaktion) indicerad. Den höga kostnaden och komplexiteten för att använda denna teknik tillåter inte dess utbredda användning.
Nya metoder för att diagnostisera malaria har utvecklats - snabb mikroskopisk analys av blodprodukter med hjälp av fluorescerande färgämnen, vilket gör det möjligt att identifiera tropiska malariaparasiter, vars antal är mer än 60 på 1 μl hemolyserat blod, inom två minuter.
Vid malaria uppstår antikroppar på dag 8–27 av parasitemi. IgM-antikroppar visas först, följt av IgG-antikroppar. Antikroppar efter malaria och framgångsrik behandling kan finnas kvar i en persons blod under lång tid - från 0,5 till 2 eller till och med 20 år.
Ris. 15. Oftast, vid diagnos av malaria, används NRIF - indirekt immunfluorescensreaktion.
Malaria bör särskiljas från influensa och andra akuta luftvägsinfektioner, tarminfektioner, leptospiros, gula febern, maligna former av viral hepatit, tyfoid-paratyfoidsjukdomar, sepsis, brucellos, sepsis, hemorragisk feber och blodsjukdomar.
I komatöst tillstånd bör malaria särskiljas från epidemisk cerebrospinal meningit, uremisk, hepatisk och diabetisk koma.
Ibland bör malaria skiljas från kolecystit, kolangit, leverböld, pyelonefrit och lymfogranulomatos.
Ris. 16. Rutinstudie av läkemedlet "tjock droppe" i malaria-endemiska regioner.
