Malarian diagnoosi perustuu kliinisten ilmentymien, epidemiologisen tutkimuksen ja laboratoriotutkimusmenetelmien tietoihin, mukaan lukien menetelmät loisten tunnistamiseksi, niiden lukumääräksi, lajiksi ja vasta-aineiden havaitsemiseksi tutkittavan kehossa. Ensinnäkin tutkitaan riskiryhmään kuuluvat potilaat - ne, jotka saapuivat malarian endeemisiltä alueilta ja joille kehittyi kuume kahden ensimmäisen vuoden aikana näiltä alueilta poistumisen jälkeen.
Riisi. 2. Valmisteiden väri ja tyyppi: "paksu pisara" ja ohut sively.
Malarian diagnoosi mikroskooppisella menetelmällä
"Paksun pisaran" ja ohuen sivelynäytteen mikroskopia, joka mahdollistaa loisten, niiden lukumäärän ja lajin havaitsemisen, on johtava menetelmä malarian diagnosoinnissa. Se suoritetaan pienimmälläkin epäilyllä tästä taudista riippumatta potilaan lämpötilareaktiosta. Ohuella verikokeella määritetään loisten laji ja taudin vaihe. Paksussa pisarassa on enemmän loisia kuin sivelyssä.Tämä diagnostinen menetelmä on 20–40 kertaa parempi kuin menetelmä, jolla määritetään malariapatogeenien esiintyminen ohuesta verinäytteestä.
Loiset havaitaan ääreisverestä tietyn ajan kuluttua tartunnasta:
3 päivän malariaan - 8-12 päivän kuluttua,
trooppisille - viidestä ja puolesta päivästä 12:een,
4 päivän kuluttua - 15 - 21 päivän kuluttua,
malarialle samanlainen kuin 3 päivää - 9 - 15 päivän kuluttua.
Loisia esiintyy veressä sekä kuumekohtauksen aikana että interiktaaljaksolla ja loisten kuljettamisen aikana.
Riisi. 3. Tekniikka ohuen sivelyn valmistukseen.
Tekniikka "paksun" pisaran valmistamiseksi
Sormella pistämällä saatu veripisara laitetaan aiemmin puhdistetulle ja kuivalle lasilevylle ja sivellään, kunnes saadaan halkaisijaltaan 1 cm:n täplä. Ilmakuivauksen jälkeen objektilasi täytetään Romanovsky-Giemsa maalilla. 40 minuutin altistuksen jälkeen lääke huuhdellaan juoksevan veden alla ja kuivataan huoneenlämpötilassa pystysuoraan asentoon.
Ainakin 100 näkökenttää tutkitaan mikroskoopilla. Katsotaan tehokkaammaksi tutkia 2 paksua tippaa 2,5 minuuttia kuin 1 tippaa 5 minuuttia. 100 näkökenttää katsotaan myös siinä tapauksessa, että malariaplasmodia havaitaan jo ensimmäisistä kentistä. Tämä tehdään, jotta ei missaa sekainfektiota.
Riisi. 4. "Paksun pisaran" valmisteen ja ohuen sivelynäytteen mikroskopia on johtava menetelmä malarian diagnosoinnissa.
Loisten havaitsemiskynnys
Malariaplasmodian havaitsemiskynnys on pienin patogeenien pitoisuus, joka voidaan havaita mikroskopialla "paksua pisaraa sisältävästä" valmisteesta. Taudin aikana tämä luku on 5 loista yhdessä mikrolitrassa verta.Kun tarkastellaan 100 näkökenttää, tutkitaan 0,2 μl verta.
Jos malariasta on epäsuoria merkkejä (oleskelu endeemisillä alueilla, hypokrominen anemia, pigmentin havaitseminen monosyyteissä) ja negatiivisia tuloksia "paksujen pisaroiden" lääkkeiden tutkimuksesta, tutkimus toistetaan huolellisemmin, eikä vain yksi, vaan sarja koostuu 4 - 6 lääkkeestä yhdellä injektiolla tai saadaan verinäytteiden yhteydessä, joka suoritetaan 4 - 6 kertaa päivässä 2 - 3 päivän ajan.
Parasitemian voimakkuus määräytyy "+"-merkillä.
1 (+) osoittaa 1 - 100 loisen havaitsemisen 10 p/z:ssä, mikä vastaa 5 - 50 plasmodiaa yhdessä μl:ssa verta;
2 (+) osoittaa 10 - 100 loisen havaitsemisen 10 p/z:ssä, mikä vastaa 50 - 500 plasmodiaa yhdessä μl:ssa verta;
3 (+) osoittaa 1 - 10 loisen havaitsemisen 1 p/z:ssä, mikä vastaa 500 - 5000 plasmodiaa yhdessä μl:ssa verta;
4 (+) osoittaa 10 - 100 loisen havaitsemisen 1 p/z:ssä, mikä vastaa 5000 - 50 000 plasmodiaa yhdessä μl:ssa verta;
5 (+) osoittaa yli 100 loisen havaitsemisen 1 p/z:ssä, mikä vastaa yli 50 000 plasmodiaa yhdessä μl:ssa verta.
Parasitemian intensiteetti voidaan laskea loisten lukumäärällä 100 punasolua kohti 10 näkökentässä tai loisten ja leukosyyttien lukumäärän suhteella 1 μl:ssa verta.
Parasitemian voimakkuus määrittää trooppisen malarian ennusteen. Muissa sairauksissa yli 2 % punasoluista ei kärsi.
Malariaplasmodian muodot eri kehitysvaiheissa
"Paksu pisara" -verivalmisteesta on mahdollista tunnistaa malariaplasmodia eri kehitysvaiheissa - trofosoidi, rengas, skizontti, morula ja sukusolut.
Riisi. 5.Plasmodium ovale on pyöreä muoto.
Riisi. 6. Nuori Plasmodium vivax trophozoite erytrosyytissä.
Riisi. 7. Plasmodium falciparumin nuoret trofosoidit.
Riisi. 12. Trooppisen malarian plasmodian gametosyytit ovat puolikuun muotoisia, kun taas muiden tautityyppien plasmodiat ovat pyöreitä.
Riisi. 13. Kasvun aikana pigmentti kerääntyy loisten sytoplasmaan. Kuvassa R. vivax.
Hoidon tehokkuuden seuranta
Riittävällä malarian hoidolla parasitemian taso 24 tunnin sisällä laskee 25% tai enemmän, ja 3 päivän kuluttua hoidon aloittamisesta sen ei pitäisi olla yli 25% alkuperäisestä tasosta. Jos loisia havaitaan 4. päivänä hoidon aloittamisesta, tämä viittaa patogeenien lääkeresistenssin kehittymiseen.
Tutkimustiheys
Kun malaria todetaan, verituotteiden mikroskooppinen tutkimus tehdään päivittäin. Trooppisen malarian vaikeissa muodoissa mikroskopia suoritetaan 2 kertaa päivässä, kunnes taudinaiheuttajat häviävät verestä, ja sitten viikoittain 28. hoitopäivään asti sen tehokkuuden arvioimiseksi ja malarialääkkeiden vastustuskyvyn tunnistamiseksi.
Riisi. 14. P. vivax- ja P. ovale -tartunnan saaneet punasolut suurentuvat, värjäytyvät ja epämuodostuvat, ja niissä ilmenee myrkyllistä rakeisuutta.
P. malariae- ja P. falciparum -tartunnan saaneiden punasolujen muoto ja koko eivät muutu. Kuvassa on malariapotilaan epämuodostuneita punasoluja (pyyhkäisymikroskooppimikrokuva).
Malarian serodiagnoosin avulla on mahdollista havaita vasta-aineita ja liukoisia loisantigeenejä potilaan vereseerumista. Serologiset testit on tarkoitettu käytettäväksi tuntemattoman alkuperän kuumeen, hepatosplanomegalian, potilaiden anemian sekä luovuttajan veren - oletetun infektiolähteen - tutkimukseen. Serologisia testejä käytetään aiemmin malarialle epäsuotuisilla alueilla asuneiden henkilöiden epidemiologiseen seurantaan.
Useimmiten malarian diagnosoinnissa käytetään NIIF:ää - epäsuoraa immunofluoresenssireaktiota. Käytetään myös ELISA:ta, RIGAa jne. Entsyymileimatun vasta-ainereaktion (ERMA) käyttö on tulossa käytäntöön.
Jos parasitemia on erittäin alhainen, PCR:n (polymeraasiketjureaktion) käyttö on aiheellista. Tämän tekniikan käytön korkeat kustannukset ja monimutkaisuus eivät salli sen laajaa käyttöä.
Malarian diagnosointiin on kehitetty uusia menetelmiä - verituotteiden nopea mikroskooppinen analyysi fluoresoivilla väriaineilla, jonka avulla voidaan tunnistaa trooppiset malarialoiset, joita on yli 60 1 μl:ssa hemolysoitua verta, kahdessa minuutissa.
Malariassa vasta-aineita ilmaantuu parasitemian päivinä 8–27. IgM-vasta-aineet ilmaantuvat ensin ja sitten IgG-vasta-aineet. Malarian ja onnistuneen hoidon jälkeiset vasta-aineet voivat pysyä ihmisen veressä pitkään - 0,5 - 2 tai jopa 20 vuotta.
Riisi. 15. Useimmiten malariaa diagnosoitaessa käytetään NRIF:ää - epäsuoraa immunofluoresenssireaktiota.
Malaria tulee erottaa influenssasta ja muista akuuteista hengitystieinfektioista, suolistotulehduksista, leptospiroosista, keltakuumeesta, virushepatiitin pahanlaatuisista muodoista, lavantauti-paratyphoidista, sepsiksestä, luomistaudista, sepsiksestä, verenvuotokuumeista ja verisairauksista.
Koomassa malaria tulee erottaa epidemiasta aivo-selkäydinkalvontulehduksesta, ureemisesta, maksa- ja diabeettisesta koomasta.
Joskus malaria tulee erottaa kolekystiitistä, kolangiitista, maksan paiseesta, pyelonefriitistä ja lymfogranulomatoosista.
Riisi. 16. Rutiinitutkimus lääkkeestä "paksu pisara" malarian endeemisillä alueilla.
