אבחון המלריה מבוסס על נתונים מביטויים קליניים, חקירה אפידמיולוגית ושיטות מחקר מעבדתי, לרבות שיטות לזיהוי טפילים, מספרם, מינים וזיהוי נוגדנים בגופו של הנחקר. קודם כל, חולים מקבוצת הסיכון נתונים לבדיקה - אלו שהגיעו מאזורים אנדמיים למלריה, ואשר פיתחו חום בשנתיים הראשונות לאחר שעזבו את האזורים הללו.
אורז. 1. דגימת דם להכנת תכשיר "טיפה עבה".
אורז. 2. צבע וסוג התכשירים: "טיפה עבה" ומריחה דקה.
אבחון מלריה בשיטה מיקרוסקופית
מיקרוסקופיה של "טיפה עבה" ומריחה דקה, המאפשרת לזהות טפילים, מספרם ומינים, היא השיטה המובילה לאבחון המלריה. זה מתבצע עם החשד הקל ביותר למחלה זו, ללא קשר לתגובת הטמפרטורה של המטופל. מריחת דם דקה משמשת לקביעת מיני הטפילים ושלב המחלה. יותר טפילים ממוקמים בטיפה עבה מאשר במריחה.שיטת אבחון זו עדיפה פי 20 עד 40 מהשיטה לקביעת הימצאות פתוגנים של מלריה במכת דם דקה.
טפילים מתגלים בדם היקפי זמן מסוים לאחר ההדבקה:
למלריה של 3 ימים - לאחר 8 - 12 ימים,
עבור טרופי - מחמישה וחצי ימים עד 12,
עם 4 ימים - לאחר 15 - 21 ימים,
למלריה בדומה ל-3 ימים - לאחר 9 - 15 ימים.
טפילים קיימים בדם הן במהלך התקף חום והן בתקופה האינטריקלית ובמהלך הובלת טפילים.
אורז. 3. טכניקה להכנת מריחה דקה.
טכניקה להכנת טיפה "עבה".
טיפת דם המתקבלת על ידי דקירת אצבע מונחת על שקף זכוכית שנוקה ויבש קודם לכן ונמרח עד לקבלת כתם בקוטר 1 ס"מ. לאחר ייבוש באוויר, ממלאים את השקף בצבע רומנובסקי-גימסה. לאחר חשיפה של 40 דקות, התרופה נשטפת תחת מים זורמים ומייבשת בטמפרטורת החדר, ממוקמת במצב אנכי.
לפחות 100 שדות ראייה נבדקים במיקרוסקופ. זה נחשב יעיל יותר ללמוד 2 טיפות עבות במשך 2.5 דקות מאשר ללמוד טיפה אחת במשך 5 דקות. 100 שדות ראייה נצפים גם במקרה שבו מתגלות פלסמודיה מלריה כבר בשדות הראשונים. זה נעשה כדי לא לפספס זיהום מעורב.
אורז. 4. מיקרוסקופיה של תכשיר "טיפה עבה" ומריחה דקה היא השיטה המובילה לאבחון מלריה.
סף גילוי טפילים
סף הגילוי לפלסמודיה של מלריה הוא הריכוז המינימלי של פתוגנים שניתן לזהות במיקרוסקופיה של תכשיר "טיפה עבה". במהלך המחלה, נתון זה הוא 5 טפילים במיקרוליטר אחד של דם.כאשר צופים ב-100 שדות ראייה, נבדקים 0.2 μl של דם.
אם יש סימנים עקיפים למלריה (שהייה באזורים אנדמיים, אנמיה היפוכרומית, זיהוי פיגמנט במונוציטים) ותוצאות שליליות של מחקר תרופות "טיפה עבה", חוזרים על המחקר ביתר זהירות, ולא רק אחת, אלא סדרה המורכב מ-4 - 6 תרופות בזריקה אחת, או שהתקבלו במהלך דגימת דם, המתבצעת 4 - 6 פעמים ביום במשך 2 - 3 ימים.
עוצמת הטפילה נקבעת על ידי הסימן "+".
1 (+) מציין זיהוי של 1 עד 100 טפילים ב-10 p/z, המתאים ל-5 - 50 פלסמודיות במיקרוליטר אחד של דם;
2 (+) מציין זיהוי של 10 עד 100 טפילים ב-10 p/z, המתאים ל-50 - 500 פלסמודיה במיקרוליטר אחד של דם;
3 (+) מציין זיהוי של 1 עד 10 טפילים ב-1 p/z, המתאים ל-500 - 5000 פלסמודיה במיקרוליטר אחד של דם;
4 (+) מציין זיהוי של 10 עד 100 טפילים ב-1 p/z, המתאים ל-5000 - 50,000 פלסמודיה במיקרוליטר אחד של דם;
5 (+) מציין זיהוי של יותר מ-100 טפילים ב-1 p/z, המתאים ליותר מ-50,000 פלסמודיות במיקרוליטר אחד של דם.
ניתן לחשב את עוצמת הטפילה לפי מספר הטפילים לכל 100 תאי דם אדומים ב-10 שדות ראייה, או לפי היחס בין מספר הטפילים והלוקוציטים ב-1 μl של דם.
עוצמת הטפילה קובעת את הפרוגנוזה למלריה טרופית. בסוגים אחרים של מחלות, יותר מ-2% מתאי הדם האדומים אינם נפגעים.
צורות של פלסמודיה של מלריה בשלבי התפתחות שונים
בתכשיר דם "טיפה עבה" ניתן לזהות פלסמודיה של מלריה בשלבי התפתחות שונים - טרופוזואיד, טבעת, schizont, מורולה וגמטות.
אורז. 5.Plasmodium ovale יש צורה עגולה.
אורז. 6. Plasmodium vivax trophozoite צעיר באריתרוציט.
אורז. 7. טרופוזואידים נעורים של Plasmodium falciparum.
אורז. 8. trophozoites בצורת טבעת של Plasmodium vivax.
אורז. 9. Amoeboid schizonts Plasmodium vivax.
אורז. 10. סכיזונטים בוגרים Plasmodium vivax.
אורז. 11. גמטוציטים נשיים של פתוגני מלריה טרופיים.
אורז. 12. גמטוציטים של פלסמודיה של מלריה טרופית הם בצורת סהר, בעוד פלסמודיה של סוגים אחרים של המחלה הם עגולים.
אורז. 13. במהלך הגדילה מצטבר פיגמנט בציטופלזמה של טפילים. בתמונה נראה R. vivax.
מעקב אחר יעילות הטיפול
בטיפול הולם במלריה, רמת הטפילה תוך 24 שעות יורדת ב-25% או יותר, ולאחר 3 ימים מתחילת הטיפול היא צריכה להיות לא יותר מ-25% מהרמה ההתחלתית. אם מתגלים טפילים ביום הרביעי מתחילת הטיפול, הדבר מצביע על התפתחות עמידות לתרופות של הפתוגנים.
תדירות המחקר
כאשר מתגלה מלריה, מתבצעת מדי יום בדיקה מיקרוסקופית של מוצרי הדם. בצורות חמורות של מלריה טרופית, מיקרוסקופיה מתבצעת 2 פעמים ביום עד להיעלמות הפתוגנים בדם ולאחר מכן מדי שבוע עד ליום ה-28 לטיפול על מנת להעריך את יעילותה ולזהות עמידות לתרופות אנטי מלריה.
אורז. 14. כאשר נדבקים ב-P. vivax וב-P. ovale, כדוריות הדם האדומות הופכות מוגדלות, מתעוותות ומעוותות ומופיעה בהן גרנולריות רעילה.
כאשר נדבקים ב-P. malariae ו-P. falciparum, הצורה והגודל של תאי הדם האדומים אינם משתנים. בתמונה נראים תאי דם אדומים מעוותים של חולה מלריה (מיקרוסקופ סורק).
באמצעות serodiagnosis של מלריה, ניתן לזהות נוגדנים ואנטיגנים טפילים מסיסים בסרום הדם של החולה. בדיקות סרולוגיות מיועדות לשימוש במקרים של חום ממקור לא ידוע, hepatosplanomegaly, אנמיה בחולים, כמו גם לחקר דם התורם - מקור ההדבקה המשוער. בדיקות סרולוגיות משמשות למעקב אפידמיולוגי אחר אנשים שחיים באזורים שלא היו נוחים למלריה בעבר.
לרוב, באבחון של מלריה, נעשה שימוש ב-NIIF - תגובה אימונופלואורסצנטית עקיפה. נעשה שימוש גם ב-ELISA, RIGA וכו'. השימוש בתגובת נוגדנים מסומנת באנזים (ERMA) נמצא בשימוש.
במקרים של טפילה נמוכה מאוד, יש לציין שימוש ב-PCR (תגובת שרשרת פולימראז). העלות הגבוהה והמורכבות של השימוש בטכניקה זו אינה מאפשרת שימוש נרחב בה.
פותחו שיטות חדשות לאבחון מלריה - ניתוח מיקרוסקופי מהיר של מוצרי דם באמצעות צבעים פלורסנטים, המאפשר לזהות תוך שתי דקות טפילי מלריה טרופיים, שמספרם הוא יותר מ-60 ב-1 μl של דם מומוס.
במלריה, נוגדנים מופיעים בימים 8-27 של טפילה. נוגדני IgM מופיעים תחילה, ואחריהם נוגדני IgG. נוגדנים לאחר מלריה וטיפול מוצלח יכולים להישאר בדם של אדם במשך זמן רב - מ 0.5 עד 2 או אפילו 20 שנים.
אורז. 15. לרוב, בעת אבחון מלריה, משתמשים ב-NRIF - תגובה אימונופלואורסצנטית עקיפה.
יש להבחין בין מלריה לבין שפעת וזיהומים נגיפיים חריפים בדרכי הנשימה, דלקות מעיים, לפטוספירוזיס, קדחת צהובה, צורות ממאירות של דלקת כבד נגיפית, מחלות טיפוס-פארטיפוס, אלח דם, ברוצלוזיס, אלח דם, קדחת דימומית ומחלות דם.
במצב של תרדמת, יש להבחין בין מלריה לבין דלקת קרום המוח המוחית מגיפה, תרדמת אורמית, כבדית וסוכרתית.
לפעמים יש להבדיל בין מלריה לבין דלקת כיס המרה, כולנגיטיס, אבצס בכבד, פיאלונפריטיס ולימפוגרנולומטוזיס.
אורז. 16. מחקר שגרתי של התרופה "טיפה עבה" באזורים אנדמיים של מלריה.
