Maliarijos diagnozė grindžiama klinikinių apraiškų duomenimis, epidemiologiniais tyrimais ir laboratoriniais tyrimų metodais, įskaitant parazitų nustatymo metodus, jų skaičių, rūšis ir antikūnų aptikimą tiriamojo organizme. Visų pirma, tiriami rizikos grupės pacientai – atvykę iš maliarijai endeminių regionų, kuriems per pirmuosius dvejus metus po išvykimo iš šių regionų pakilo temperatūra.
Ryžiai. 1. Kraujo mėginių ėmimas „storo lašo“ preparatui paruošti.
Ryžiai. 2. Preparatų spalva ir tipas: „storas lašas“ ir plonas tepinėlis.
Maliarijos diagnostika mikroskopiniu metodu
„Storo lašo“ ir plono tepinėlio mikroskopija, leidžianti aptikti parazitus, jų skaičių ir rūšis, yra pagrindinis maliarijos diagnozavimo metodas. Jis atliekamas esant menkiausiam įtarimui dėl šios ligos, neatsižvelgiant į paciento temperatūros reakciją. Parazitų rūšiai ir ligos stadijai nustatyti naudojamas plonas kraujo tepinėlis. Tirštame laše lokalizuota daugiau parazitų nei tepinėlyje.Šis diagnostikos metodas yra 20–40 kartų pranašesnis už maliarijos sukėlėjų buvimo ploname kraujo tepinėlyje nustatymo metodą.
Parazitai periferiniame kraujyje aptinkami praėjus tam tikram laikui po užsikrėtimo:
3 dienų maliarijai - po 8 - 12 dienų,
atogrąžoms - nuo penkių su puse dienos iki 12,
su 4 dienomis - po 15 - 21 dienos,
sergant maliarija panašiai kaip 3 dienos – po 9 – 15 dienų.
Kraujyje parazitų yra tiek karščiavimo priepuolio metu, tiek tarpuplaučio periodu, tiek parazitų nešiojimosi metu.
Ryžiai. 3. Plono tepinėlio paruošimo technika.
„Storo“ lašo paruošimo technika
Kraujo lašas, gautas pradūrus pirštą, užlašinamas ant anksčiau išvalyto ir sauso stiklelio ir tepamas, kol gaunama 1 cm skersmens dėmė. Po džiovinimo ore stiklelis užpildomas Romanovsky-Giemsa dažais. Po 40 minučių poveikio vaistas nuplaunamas tekančiu vandeniu ir džiovinamas kambario temperatūroje, pastatomas vertikalioje padėtyje.
Mikroskopu tiriama mažiausiai 100 regėjimo laukų. Manoma, kad veiksmingiau tirti 2 storus lašus 2,5 minutės, nei tirti 1 lašą 5 minutes. Matoma 100 matymo laukų net ir tuo atveju, kai maliarinė plazmodija aptinkama jau pirmuosiuose laukuose. Tai daroma siekiant nepraleisti mišrios infekcijos.
Ryžiai. 4. „Storo lašo“ preparato ir plono tepinėlio mikroskopija yra pagrindinis maliarijos diagnozavimo metodas.
Parazitų aptikimo slenkstis
Maliarinės plazmodijos aptikimo slenkstis yra mažiausia patogenų koncentracija, kurią galima aptikti mikroskopuojant „storo lašo“ preparatą. Ligos metu šis skaičius yra 5 parazitai viename mikrolitre kraujo.Apžiūrint 100 matymo laukų, tiriama 0,2 μl kraujo.
Jei yra netiesioginių maliarijos požymių (buvimas endeminėse zonose, hipochrominė anemija, pigmento aptikimas monocituose) ir neigiami „storo lašo“ vaistų tyrimo rezultatai, tyrimas kartojamas atidžiau, ir ne vienas, o serija. susidedantis iš 4 - 6 vaistų su viena injekcija, arba gautas kraujo mėginių ėmimo metu, kuris atliekamas 4 - 6 kartus per dieną 2 - 3 dienas.
Parazitemijos intensyvumas nustatomas pagal „+“ ženklą.
1 (+) rodo, kad 10 p/z yra aptikta nuo 1 iki 100 parazitų, o tai atitinka 5 - 50 plazmodijų viename μl kraujo;
2 (+) rodo 10-100 parazitų aptikimą 10 p/z, o tai atitinka 50-500 plazmodijų viename μl kraujo;
3 (+) rodo 1-10 parazitų aptikimą 1 p/z, o tai atitinka 500 - 5000 plazmodijų viename μl kraujo;
4 (+) rodo 1 p/z aptikimą nuo 10 iki 100 parazitų, o tai atitinka 5000 - 50 000 plazmodijų viename μl kraujo;
5 (+) rodo daugiau nei 100 parazitų aptikimą 1 p/z, o tai atitinka daugiau nei 50 000 plazmodijų viename μl kraujo.
Parazitemijos intensyvumą galima apskaičiuoti pagal parazitų skaičių 100 raudonųjų kraujo kūnelių 10 matymo laukų arba pagal parazitų ir leukocitų skaičiaus santykį 1 μl kraujo.
Parazitemijos intensyvumas lemia atogrąžų maliarijos prognozę. Esant kitoms ligoms, daugiau nei 2% raudonųjų kraujo kūnelių nepažeidžiami.
Maliarinės plazmodijos formos įvairiose vystymosi fazėse
„Storo lašo“ kraujo preparate galima nustatyti maliarijos plazmodijas įvairiuose vystymosi etapuose - trofozoidą, žiedą, šizontą, morulę ir gametas.
Ryžiai. 5.Plasmodium ovale yra apvalios formos.
Ryžiai. 6. Jaunas Plasmodium vivax trofozoitas eritrocite.
Ryžiai. 7. Plasmodium falciparum jauni trofozoidai.
Ryžiai. 8. Plasmodium vivax žiedo formos trofozoitai.
Ryžiai. 11. Tropinės maliarijos sukėlėjų moteriškos lyties gametocitai.
Ryžiai. 12. Tropinės maliarijos plazmodijų gametocitai yra pusmėnulio formos, o kitų ligos tipų plazmodijos yra apvalios.
Ryžiai. 13. Augimo metu pigmentas kaupiasi parazitų citoplazmoje. Nuotraukoje – R. vivax.
Gydymo efektyvumo stebėjimas
Tinkamai gydant maliariją, parazitemijos lygis per 24 valandas sumažėja 25% ar daugiau, o po 3 dienų nuo gydymo pradžios jis turi būti ne didesnis kaip 25% pradinio lygio. Jei parazitai aptinkami 4 dieną nuo gydymo pradžios, tai rodo patogenų atsparumo vaistams išsivystymą.
Tyrimų dažnumas
Nustačius maliarija, kasdien atliekamas mikroskopinis kraujo produktų tyrimas. Esant sunkioms atogrąžų maliarijos formoms, mikroskopija atliekama 2 kartus per dieną, kol patogenai išnyks kraujyje, o vėliau kas savaitę iki 28 gydymo dienos, siekiant įvertinti jo veiksmingumą ir nustatyti atsparumą vaistams nuo maliarijos.
Ryžiai. 14. Užsikrėtus P. vivax ir P. ovale, raudonieji kraujo kūneliai padidėja, pakinta ir deformuojasi, juose atsiranda toksinis granuliuotumas.
Užsikrėtus P. malariae ir P. falciparum, raudonųjų kraujo kūnelių forma ir dydis nekinta. Nuotraukoje matyti deformuoti maliarija sergančio paciento raudonieji kraujo kūneliai (skenavimo mikroskopinė mikrografija).
Naudojant maliarijos serodiagnozę, paciento kraujo serume galima aptikti antikūnus ir tirpius parazitinius antigenus. Serologiniai tyrimai skirti neaiškios kilmės karščiavimui, hepatosplanomegalijai, ligonių mažakraujystei, taip pat donorų kraujo – spėjamo infekcijos šaltinio – tyrimui. Serologiniai tyrimai naudojami epidemiologinei asmenų, gyvenusių maliarijai anksčiau nepalankiose vietovėse, priežiūrai.
Dažniausiai maliarijos diagnozei naudojamas NIIF – netiesioginė imunofluorescencinė reakcija. Taip pat naudojami ELISA, RIGA ir kt. Praktikoje diegiama fermentu žymėtų antikūnų reakcija (ERMA).
Labai mažos parazitemijos atvejais nurodomas PGR (polimerazės grandininės reakcijos) naudojimas. Didelė šios technikos naudojimo kaina ir sudėtingumas neleidžia jos plačiai naudoti.
Sukurti nauji maliarijos diagnostikos metodai – greitoji mikroskopinė kraujo produktų analizė naudojant fluorescencinius dažus, leidžianti per dvi minutes nustatyti tropinės maliarijos parazitus, kurių 1 μl hemolizuoto kraujo yra daugiau nei 60.
Sergant maliarija, antikūnai atsiranda 8–27 parazitemijos dieną. Pirmiausia atsiranda IgM antikūnai, po to IgG antikūnai. Antikūnai po maliarijos ir sėkmingo gydymo gali išlikti žmogaus kraujyje ilgą laiką – nuo 0,5 iki 2 ar net 20 metų.
Ryžiai. 15. Dažniausiai diagnozuojant maliariją naudojamas NRIF – netiesioginė imunofluorescencinė reakcija.
Maliariją reikėtų skirti nuo gripo ir kitų ūmių kvėpavimo takų virusinių infekcijų, žarnyno infekcijų, leptospirozės, geltonosios karštinės, piktybinių virusinio hepatito formų, vidurių šiltinės-paratifos susirgimų, sepsio, bruceliozės, sepsio, hemoraginės karštligės, kraujo ligų.
Komos būsenoje maliarija turėtų būti atskirta nuo epideminio cerebrospinalinio meningito, ureminės, kepenų ir diabetinės komos.
Kartais maliarija turėtų būti atskirta nuo cholecistito, cholangito, kepenų absceso, pielonefrito ir limfogranulomatozės.
