Листериозата е инфекциозно заболяване, което причинява най-опасните хранителни инфекции. Листериозата е често срещана сред животните и хората. Характеризира се с множество източници на инфекция, различни пътища и фактори на нейното предаване, множество форми на проявление и висока смъртност. Листериозата засяга хиляди хора по света, 20 до 30% от които умират. Смъртността от тежки общи форми на заболяването достига 90 - 100%. Навременната диагностика на листериоза ви позволява да предпише адекватно лечение, което гарантира пълно излекуване на пациента.
Ориз. 1. Снимката показва пациент с листерия менингит.
Полиморфизмът на клиничните прояви и невъзможността за идентифициране на източника на инфекция в някои случаи създава изключителни трудности при установяването на диагноза въз основа на клинични и епидемиологични данни. В тази връзка лабораторната диагностика на листериозата става решаваща.Предварителната диагноза се установява въз основа на бактериоскопско изследване; окончателната диагноза изисква бактериологично потвърждение или PCR.
За изследване използваме:
Кръвни проби, назофарингеална слуз, секрет от очите, пункция на лимфни възли, изпражнения.
При жени, родили мъртво дете или с признаци на листериоза, плацентата, амниотичната течност и отделянето от родовия канал подлежат на изследване.
Мекониумът се изследва при новородени.
При пациенти със съмнение за листериозен менингит се изследва цереброспиналната течност.
От трупове се взема разнообразен биологичен материал.
За определяне на бактериално носителство се вземат фецес и орофарингеални тампони.
Диагностика на листериоза чрез обикновена и флуоресцентна микроскопия
Ориз. 2. Изглед на Listeria под микроскоп. Бактериите са разположени поединично или по двойки, по-рядко в къси вериги. При оцветяване с оцветяване по Грам Listeria изглежда розова.
Ориз. 3. Listeria в светлината на микроскоп, който дава триизмерно увеличение, изглежда като цилиндри.
Ориз. 4. Листерия в макрофагите.
Микроскопия на листериални грануломи
Намаляването на функционирането на клетъчния имунитет води до разпространение на инфекцията в тялото. В органите и тъканите се образуват специфични грануломи - листериоми. Техният специфичен състав се определя чрез микроскопия на цитонамазка или биопат.
Ориз. 5. Грануломи в черния дроб (снимка вляво). Гранулом (листериома) в мозъка (снимка вдясно).
Лабораторна диагностика на листериоза чрез бактериологично изследване
Listeria расте при стайна температура върху обикновени хранителни среди - леко алкални и неутрални. Сеитбите се препоръчват през първите 7-10 дни от заболяването.Инкубацията продължава 3 седмици при температура 37 °C. При посяване върху глюкозно-кръвен агар се избират типични колонии (прозрачни или с форма на рог), които предизвикват хемолиза.
Ориз. 6. Колониите от Listeria, когато се посят върху месопептонен агар, приличат на капки роса. При преминаваща светлина колониите придобиват перлен оттенък.
Ориз. 7. Когато Listeria расте върху хромогенен агар, колониите придобиват син цвят.
Ориз. 8. При отглеждане върху оксфордски агар около колониите се образува черен ореол.
Ориз. 9. Когато Listeria расте в месопептонен бульон, се образува мътност с лека опалесценция.
Биологичните тестове се основават на заразяване на лабораторни животни с биологичен материал, взет от пациент, за да се открият бактерии. Белите мишки, зайците, морските свинчета и степните пъстри са изложени на инфекция.
Ориз. 10. Снимката показва бели мишки, заразени с листериоза. В центъра е здрава мишка. Вдясно и вляво от него са бозаещи мишки с парализа на предните крака.
Ориз. 11. На снимката вляво листериозата при заек се развива след интравенозна инфекция. Снимката вдясно показва възпалителна реакция, развила се на мястото на интрадермално инжектиране на Listeria.
Антителата срещу Listeria се определят с помощта на серологични реакции: реакция на аглутинация (RA), реакция на индиректна хемаглутинация (IRHA) и реакция на фиксиране на комплемента (CFR) с антиген на листерия в двойки серуми. Ако пациентът има листериоза, увеличението на титъра се записва 4 пъти или повече. Реакциите се провеждат два пъти с 2-седмична почивка.
Поради антигенната връзка на Listeria и Staphylococcus са възможни фалшиво положителни резултати.
След 2 седмици от началото на заболяването в кръвта на пациента се откриват IgG антитела, които присъстват в кръвта през целия период на заболяването. Антителата остават в кръвта дълго време по време на хронична листериоза.
Метод на флуоресцентни антитела
Имунофлуоресцентната реакция (RIF) е бърз и високочувствителен метод за диагностициране на листериоза. Има директен и индиректен RIF метод. При определяне на антитела чрез директен метод, белязаният с флуорохром серум се добавя към суспензия от микроби, фиксирани върху предметно стъкло. Когато се образува комплекс антиген-антитяло под синьо-виолетова (ултравиолетова) светлина, бактериите светят ярко зелено под флуоресцентен микроскоп.
Ориз. 12. Сияние на Listeria по време на имунофлуоресцентна реакция.
Кръвният тест за Listeria е ефективен начин за откриване на инфекция с Listeria. При различни форми на листериоза в тялото на пациентите се активира системата от мононуклеарни фагоцити - макрофаги. Те улавят и унищожават бактерии и вируси, живеещи вътреклетъчно, разчитат информация за тяхната структура и я предават на Т-лимфоцитите. Впоследствие В-лимфоцитите започват да произвеждат антитела, които унищожават патогена. При заболяването броят на моноцитите в периферната кръв се увеличава. При септичната форма на листериоза техният брой достига 70% (при норма 3 - 11%).
Ориз. 13. На снимката моноцитите са най-големите клетки в периферната кръв.
За диагностициране на листериоза се използва интрадермален (алергичен) тест. Антигенът на Listeria се прилага интрадермално. След 24 часа реакцията се изследва. Ако листерията присъства в тялото на изследваното лице, върху кожата на мястото на въвеждане на листерийния антиген се появява папула (инфилтрат) от 10 милиметра или повече.
Интрадермален тест се извършва на 6-9 дни от момента на заболяването.
В случай на изолирани случаи на листериоза, диагностицирането на заболяването трябва да се извърши чрез бактериологичен метод и PCR метод.
Диференциалната диагноза на листериозата се извършва, като се вземе предвид развитата клинична форма на заболяването.
Листерийният тонзилит трябва да се разграничава от стрептококовия тонзилит.
Острите форми на листериоза трябва да се разграничават от инфекциозна еритема, инфекциозна мононуклеоза, остра токсоплазмоза и кръвни заболявания.
Нервните форми на листериозата трябва да се разграничават от бактериалните менингити с различна етиология - пневмококови, менингококови, стафилококови.
Листериозата при бременни жени трябва да се разграничава от бавния пиелоцистит и пиелонефрит.
Листериозата е опасна бактериална инфекция. Информация от учени.
