Listeriozė yra infekcinė liga, sukelianti pačias virulentiškiausias per maistą plintančias infekcijas. Listeriozė yra paplitusi tarp gyvūnų ir žmonių. Jai būdinga daug infekcijos šaltinių, įvairūs perdavimo būdai ir veiksniai, įvairios pasireiškimo formos ir didelis mirtingumas. Listerioze visame pasaulyje serga tūkstančiai žmonių, iš kurių 20–30 % miršta. Mirtingumas nuo sunkių įprastų ligos formų siekia 90–100%. Laiku diagnozavus listeriozę, galima paskirti tinkamą gydymą, kuris užtikrina visišką paciento išgydymą.
Klinikinių apraiškų polimorfizmas ir negalėjimas nustatyti infekcijos šaltinio kai kuriais atvejais sukuria išskirtinių sunkumų nustatant diagnozę remiantis klinikiniais ir epidemiologiniais duomenimis. Šiuo atžvilgiu laboratorinė listeriozės diagnostika tampa itin svarbi.Preliminari diagnozė nustatoma remiantis bakterioskopiniu tyrimu, kad galutinė diagnozė būtų patvirtinta bakteriologiniu būdu arba PGR.
Tyrimams naudojame:
Kraujo mėginiai, nosiaryklės gleivės, išskyros iš akių, limfmazgių punkcija, išmatos.
Moterims, pagimdžiusioms negyvą vaiką arba turinčioms listeriozės požymių, tiriama placenta, vaisiaus vandenys ir išskyros iš gimdymo takų.
Mekoniumas tiriamas naujagimiams.
Pacientams, kuriems įtariamas listerinis meningitas, tiriamas smegenų skystis.
Iš lavonų paimama įvairi biologinė medžiaga.
Bakterijų pernešimui nustatyti paimamos išmatos ir burnos ir ryklės tepinėliai.
Listeriozės diagnozė naudojant paprastą ir fluorescencinę mikroskopiją
Ryžiai. 2. Listeria vaizdas po mikroskopu. Bakterijos yra pavieniui arba poromis, rečiau trumpomis grandinėmis. Dažant Gramo dėme, listeria atrodo rausva.
Ryžiai. 3. Listeria mikroskopo, suteikiančio trimatį padidinimą, šviesoje atrodo kaip cilindrai.
Ryžiai. 4. Listerijos makrofaguose.
Listerijų granulomų mikroskopija
Ląstelinio imuniteto veikimo sumažėjimas sukelia infekcijos plitimą visame kūne. Konkrečios granulomos - listeriomos - susidaro organuose ir audiniuose. Specifinė jų sudėtis nustatoma mikroskopuojant tepinėlį arba biopatą.
Laboratorinė listeriozės diagnostika naudojant bakteriologinį tyrimą
Listeria auga kambario temperatūroje ant įprastų maistinių medžiagų - šiek tiek šarminių ir neutralių. Pasėlius rekomenduojama auginti per pirmąsias 7–10 ligos dienų.Inkubacija trunka 3 savaites 37 °C temperatūroje. Dedant ant gliukozės ir kraujo agaro, parenkamos tipinės kolonijos (skaidrios arba rago formos), kurios sukelia hemolizę.
Ryžiai. 6. Listeria kolonijos, pasėtos ant mėsos peptono agaro, primena rasos lašus. Praleidžiamoje šviesoje kolonijos įgauna perlamutrinį atspalvį.
Ryžiai. 7. Kai Listeria auga ant chromogeninio agaro, kolonijos įgauna mėlyną spalvą.
Ryžiai. 8. Auginant ant Oksfordo agaro, aplink kolonijas susidaro juoda aureolė.
Ryžiai. 9. Listerijai augant mėsos-peptono sultinyje susidaro drumstumas su nežymiu opalescencija.
Listeriozės diagnostika naudojant biologinius mėginius
Biologiniai tyrimai yra pagrįsti laboratorinių gyvūnų užkrėtimu iš paciento paimta biologine medžiaga, siekiant aptikti bakterijas. Baltosios pelės, triušiai, jūrų kiaulytės ir stepės yra užkrėstos.
Ryžiai. 10. Nuotraukoje baltos pelės, užsikrėtusios listerioze. Centre yra sveika pelė. Jo dešinėje ir kairėje yra žindomos pelės, kurių priekinės kojos paralyžiuotos.
Ryžiai. 11. Nuotraukoje kairėje triušio listeriozė išsivystė po intraveninės infekcijos. Dešinėje esančioje nuotraukoje parodyta uždegiminė reakcija, kuri išsivystė Listeria intraderminės injekcijos vietoje.
Antikūnai prieš listeriją nustatomi naudojant serologines reakcijas: agliutinacijos reakciją (RA), netiesioginę hemagliutinacijos reakciją (IRHA) ir komplemento fiksavimo reakciją (CFR) su listerijos antigenu poriniuose serumuose. Jei pacientas serga listerioze, titro padidėjimas registruojamas 4 ar daugiau kartų. Reakcijos atliekamos du kartus su 2 savaičių pertrauka.
Dėl listerijų ir stafilokokų antigeninio ryšio galimi klaidingai teigiami rezultatai.
Po 2 savaičių nuo ligos pradžios paciento kraujyje aptinkami IgG antikūnai, kurie kraujyje yra visą ligos laikotarpį. Lėtinės listeriozės metu antikūnai ilgai išlieka kraujyje.
Fluorescencinių antikūnų metodas
Imunofluorescencinė reakcija (RIF) yra greitas ir labai jautrus listeriozės diagnozavimo metodas. Yra tiesioginis ir netiesioginis RIF metodas. Nustatant antikūnus tiesioginiu metodu, į mikrobų suspensiją, fiksuotą ant stiklelio, pridedama fluorochromu pažymėto serumo. Kai mėlynai violetinėje (ultravioletinėje) šviesoje susidaro antigeno-antikūno kompleksas, fluorescenciniame mikroskopu bakterijos švyti ryškiai žaliai.
Ryžiai. 12. Listeria švytėjimas imunofluorescencinės reakcijos metu.
Listeria kraujo tyrimas yra veiksmingas būdas nustatyti listerijos infekciją. Sergant įvairiomis listeriozės formomis, pacientų organizme suaktyvėja mononuklearinių fagocitų – makrofagų – sistema. Jie fiksuoja ir naikina tarpląstelėje gyvenančias bakterijas ir virusus, skaito informaciją apie jų struktūrą ir perduoda ją T limfocitams. Vėliau B limfocitai pradeda gaminti antikūnus, kurie naikina patogeną. Sergant šia liga, periferiniame kraujyje padidėja monocitų skaičius. Sergant septine listeriozės forma, jų skaičius siekia 70% (su norma 3-11%).
Ryžiai. 13. Nuotraukoje monocitai yra didžiausios periferinio kraujo ląstelės.
Listeriozei diagnozuoti naudojamas intraderminis (alerginis) testas. Listeria antigenas švirkščiamas į odą. Po 24 valandų tiriama reakcija. Jei tiriamojo organizme yra listerijų, listerijos antigeno įvedimo vietoje ant odos atsiranda 10 ar daugiau milimetrų papulė (infiltratas).
Intraderminis tyrimas atliekamas 6–9 dienomis nuo susirgimo momento.
Esant pavieniams listeriozės atvejams, ligos diagnozė turėtų būti atliekama naudojant bakteriologinį metodą ir PGR metodą.
