Listerioza jest chorobą zakaźną, która powoduje najbardziej zjadliwe infekcje przenoszone przez żywność. Listerioza jest powszechna wśród zwierząt i ludzi. Charakteryzuje się wieloma źródłami zakażenia, różnymi drogami i czynnikami jej przenoszenia, mnogością form manifestacji oraz wysoką śmiertelnością. Listerioza dotyka tysiące ludzi na całym świecie, z czego 20–30% umiera. Śmiertelność z powodu ciężkich, powszechnych postaci choroby sięga 90–100%. Terminowe rozpoznanie listeriozy pozwala przepisać odpowiednie leczenie, które zapewni pacjentowi całkowite wyleczenie.
Ryż. 1. Zdjęcie przedstawia pacjenta chorego na listeriologiczne zapalenie opon mózgowo-rdzeniowych.
Polimorfizm objawów klinicznych i brak możliwości ustalenia źródła zakażenia w niektórych przypadkach stwarza wyjątkowe trudności w ustaleniu rozpoznania na podstawie danych klinicznych i epidemiologicznych. W związku z tym kluczowa staje się diagnostyka laboratoryjna listeriozy.Wstępne rozpoznanie ustala się na podstawie badania bakterioskopowego, ostateczne rozpoznanie wymaga potwierdzenia bakteriologicznego lub PCR.
U kobiet, które urodziły martwe dziecko lub z objawami listeriozy, badaniu poddawane jest łożysko, płyn owodniowy i wydzielina z kanału rodnego.
Smółka jest testowana u noworodków.
U pacjentów z podejrzeniem listeriowego zapalenia opon mózgowo-rdzeniowych bada się płyn mózgowo-rdzeniowy.
Ze zwłok pobiera się różnorodny materiał biologiczny.
W celu określenia nosicielstwa bakterii pobiera się kał i wymaz z jamy ustnej i gardła.
Diagnostyka listeriozy za pomocą mikroskopii zwykłej i fluorescencyjnej
Ryż. 2. Widok Listerii pod mikroskopem. Bakterie występują pojedynczo lub parami, rzadziej w krótkich łańcuchach. Po zabarwieniu metodą Grama Listeria ma kolor różowy.
Ryż. 3. Listeria w świetle mikroskopu dającego trójwymiarowe powiększenie wygląda jak cylindry.
Ryż. 4. Listeria w makrofagach.
Mikroskopia ziarniniaków listerii
Osłabienie funkcjonowania odporności komórkowej prowadzi do rozprzestrzeniania się infekcji po całym organizmie. W narządach i tkankach tworzą się specyficzne ziarniniaki – listeriomy. Ich specyficzny skład określa się za pomocą mikroskopii rozmazu lub biopaty.
Ryż. 5. Ziarniniaki w wątrobie (zdjęcie po lewej). Ziarniniak (listerioma) w mózgu (zdjęcie po prawej).
Diagnostyka laboratoryjna listeriozy na podstawie badania bakteriologicznego
Listeria rośnie w temperaturze pokojowej na zwykłych pożywkach - lekko zasadowych i obojętnych. Zaleca się uprawę w ciągu pierwszych 7–10 dni choroby.Inkubacja trwa 3 tygodnie w temperaturze 37°C. Podczas wysiewu na agar z krwią i glukozą wybiera się typowe kolonie (przezroczyste lub w kształcie rogu), które powodują hemolizę.
Ryż. 6. Kolonie Listerii wysiane na agarze peptonowym przypominają krople rosy. W świetle przechodzącym kolonie nabierają perłowego odcienia.
Ryż. 7. Kiedy Listeria rośnie na agarze chromogennym, kolonie nabierają niebieskiego koloru.
Ryż. 8. Podczas uprawy na agarze Oxford wokół kolonii tworzy się czarna aureola.
Ryż. 9. Kiedy Listeria rośnie w bulionie mięsno-peptonowym, tworzy się zmętnienie z lekką opalescencją.
Diagnostyka listeriozy na podstawie próbek biologicznych
Badania biologiczne polegają na zakażaniu zwierząt laboratoryjnych materiałem biologicznym pobranym od pacjenta w celu wykrycia bakterii. Na infekcję narażone są białe myszy, króliki, świnki morskie i stepowe.
Ryż. 10. Zdjęcie przedstawia białe myszy zakażone listeriozą. W środku zdrowa mysz. Po jego prawej i lewej stronie znajdują się karmiące myszy z paraliżem przednich nóg.
Ryż. 11. Na zdjęciu po lewej stronie listerioza u królika rozwinęła się po zakażeniu dożylnym. Zdjęcie po prawej stronie przedstawia reakcję zapalną, która rozwinęła się w miejscu śródskórnego wstrzyknięcia Listerii.
Przeciwciała przeciwko Listerii oznacza się za pomocą reakcji serologicznych: reakcji aglutynacji (RA), reakcji pośredniej hemaglutynacji (IRHA) i reakcji wiązania dopełniacza (CFR) z antygenem listerii w sparowanych surowicach. Jeśli pacjent ma listeriozę, wzrost miana rejestruje się 4-krotnie lub więcej. Reakcje przeprowadza się dwukrotnie z 2-tygodniową przerwą.
Ze względu na pokrewieństwo antygenowe Listeria i Staphylococcus możliwe są wyniki fałszywie dodatnie.
Po 2 tygodniach od wystąpienia choroby we krwi pacjenta wykrywane są przeciwciała IgG, które są obecne we krwi przez cały okres choroby. Podczas przewlekłej listeriozy przeciwciała pozostają we krwi przez długi czas.
Metoda przeciwciał fluorescencyjnych
Reakcja immunofluorescencyjna (RIF) jest szybką i wysoce czułą metodą diagnozowania listeriozy. Istnieje bezpośrednia i pośrednia metoda RIF. Przy oznaczaniu przeciwciał metodą bezpośrednią surowicę znakowaną fluorochromem dodaje się do zawiesiny drobnoustrojów utrwalonej na szkiełku. Kiedy w świetle niebiesko-fioletowym (ultrafioletowym) tworzy się kompleks antygen-przeciwciało, pod mikroskopem fluorescencyjnym bakterie świecą jasnozieloną barwą.
Ryż. 12. Świecenie Listerii podczas reakcji immunofluorescencyjnej.
Badanie krwi na listerię jest skutecznym sposobem na wykrycie zakażenia listerią. W różnych postaciach listeriozy w organizmie pacjentów aktywowany jest układ jednojądrzastych fagocytów - makrofagów. Wychwytują i niszczą bakterie i wirusy żyjące wewnątrzkomórkowo, odczytują informacje o ich budowie i przekazują je do limfocytów T. Następnie limfocyty B zaczynają wytwarzać przeciwciała, które niszczą patogen. Wraz z chorobą wzrasta liczba monocytów we krwi obwodowej. W septycznej postaci listeriozy ich liczba sięga 70% (przy normie 3–11%).
Ryż. 13. Na zdjęciu monocyty są największymi komórkami krwi obwodowej.
Aby zdiagnozować listeriozę, stosuje się test śródskórny (alergiczny). Antygen Listeria podaje się śródskórnie. Po 24 godzinach bada się reakcję. Jeżeli w ciele osoby badanej występuje listeria, w miejscu wprowadzenia antygenu listerii na skórze pojawia się grudka (naciek) o wielkości 10 milimetrów lub więcej.
Badanie śródskórne wykonuje się w 6–9 dniu od momentu zachorowania.
W przypadku izolowanych przypadków listeriozy diagnostykę choroby należy przeprowadzić metodą bakteriologiczną oraz metodą PCR.
Diagnostykę różnicową listeriozy przeprowadza się z uwzględnieniem rozwiniętej postaci klinicznej choroby.
Listeriowe zapalenie migdałków należy odróżnić od paciorkowcowego zapalenia migdałków.
Ostre formy listeriozy należy odróżnić od rumienia zakaźnego, mononukleozy zakaźnej, ostrej toksoplazmozy i chorób krwi.
Nerwowe formy listeriozy należy odróżnić od bakteryjnego zapalenia opon mózgowo-rdzeniowych o różnej etiologii - pneumokokowej, meningokokowej, gronkowcowej.
Listeriozę u kobiet w ciąży należy odróżnić od powolnego zapalenia odmiedniczkowego i odmiedniczkowego zapalenia nerek.
Listerioza to niebezpieczna infekcja bakteryjna. Informacje od naukowców.
