Listerios är en infektionssjukdom som orsakar de mest virulenta livsmedelsburna infektionerna. Listerios är vanligt bland djur och människor. Det kännetecknas av många infektionskällor, olika vägar och faktorer för dess överföring, flera former av manifestationer och hög dödlighet. Listerios drabbar tusentals människor över hela världen, av vilka 20 till 30 % dör. Dödligheten från allvarliga vanliga former av sjukdomen når 90 - 100%. Snabb diagnos av listerios gör att du kan ordinera adekvat behandling, vilket säkerställer ett fullständigt botemedel för patienten.
Ris. 1. Bilden visar en patient med listeria meningit.
Polymorfismen av kliniska manifestationer och omöjligheten att identifiera infektionskällan skapar i vissa fall exceptionella svårigheter att fastställa en diagnos baserad på kliniska och epidemiologiska data. I detta avseende blir laboratoriediagnos av listerios avgörande.En preliminär diagnos ställs på grundval av bakterioskopisk undersökning. Den slutliga diagnosen kräver bakteriologisk bekräftelse eller PCR.
Hos kvinnor som fött ett dödfött barn eller med tecken på listerios undersöks moderkaka, fostervatten och flytningar från förlossningskanalen.
Mekonium testas på nyfödda.
Hos patienter med misstänkt listeria meningit undersöks cerebrospinalvätskan.
En mängd olika biologiskt material tas från lik.
Avföring och orofaryngeala pinnar tas för att fastställa bakteriell transport.
Diagnos av listerios med vanlig och fluorescensmikroskopi
Ris. 2. Vy över Listeria under ett mikroskop. Bakterier finns var för sig eller i par, mindre ofta i korta kedjor. När den färgas med Gram-färgning ser Listeria rosa ut.
Ris. 3. Listeria i ljuset av ett mikroskop som ger tredimensionell förstoring ser ut som cylindrar.
Ris. 4. Listeria i makrofager.
Mikroskopi av listeria granulom
En minskning av funktionen av cellulär immunitet leder till spridning av infektion i hela kroppen. Specifika granulom - listeriom - bildas i organ och vävnader. Deras specifika sammansättning bestäms genom mikroskopi av ett utstryk eller biopat.
Ris. 5. Granulom i levern (foto till vänster). Granulom (listeriom) i hjärnan (foto till höger).
Laboratoriediagnos av listerios med hjälp av bakteriologisk undersökning
Listeria växer i rumstemperatur på vanligt näringsmedium - lätt alkaliskt och neutralt. Grödor rekommenderas att göras under de första 7 - 10 dagarna av sjukdomen.Inkubationen varar i 3 veckor vid en temperatur på 37 °C. Vid utstrykning på glukos-blodagar väljs typiska kolonier (transparenta eller hornformade) som producerar hemolys.
Ris. 6. Listeriakolonier när de sås på köttpeptonagar liknar daggdroppar. I genomsläppt ljus får kolonierna en pärlemorskimrande nyans.
Ris. 7. När Listeria växer på kromogen agar får kolonierna en blå färg.
Ris. 8. När man odlar på Oxford-agar bildas en svart gloria runt kolonierna.
Ris. 9. När Listeria växer i kött-peptonbuljong bildas en grumlighet med lätt opalescens.
Diagnos av listerios med hjälp av biologiska prover
Biologiska tester bygger på att man infekterar försöksdjur med biologiskt material som tagits från en patient för att upptäcka bakterier. Vita möss, kaniner, marsvin och stäppbågar utsätts för infektion.
Ris. 10. Bilden visar vita möss infekterade med listerios. I mitten står en frisk mus. Till höger och vänster om honom sitter diande möss med förlamning av frambenen.
Ris. 11. På bilden till vänster utvecklades listerios hos en kanin efter intravenös infektion. Bilden till höger visar en inflammatorisk reaktion som utvecklades på platsen för intradermal injektion av Listeria.
Antikroppar mot Listeria bestäms med hjälp av serologiska reaktioner: agglutinationsreaktion (RA), indirekt hemagglutinationsreaktion (IRHA) och komplementfixeringsreaktion (CFR) med listeriaantigen i parade sera. Om en patient har listerios, registreras en ökning av titern med 4 gånger eller mer. Reaktioner utförs två gånger med 2 veckors paus.
På grund av det antigena förhållandet mellan Listeria och Staphylococcus är falskt positiva resultat möjliga.
Efter 2 veckor från början av sjukdomen detekteras IgG-antikroppar i patientens blod, som finns i blodet under hela sjukdomsperioden. Antikroppar finns kvar i blodet under lång tid under kronisk listerios.
Fluorescerande antikroppsmetod
Immunfluorescensreaktion (RIF) är en snabb och mycket känslig metod för att diagnostisera listerios. Det finns en direkt och indirekt RIF-metod. Vid bestämning av antikroppar med den direkta metoden tillsätts fluorokrommärkt serum till en suspension av mikrober fixerade på ett objektglas. När ett antigen-antikroppskomplex bildas under blåviolett (ultraviolett) ljus lyser bakterierna klart grönt under ett fluorescensmikroskop.
Ris. 12. Glöd av Listeria under immunfluorescensreaktion.
Ett Listeria-blodprov är ett effektivt sätt att upptäcka listeriainfektion. I olika former av listerios aktiveras systemet av mononukleära fagocyter - makrofager - i patienternas kropp. De fångar in och förstör bakterier och virus som lever intracellulärt, läser information om deras struktur och överför den till T-lymfocyter. Därefter börjar B-lymfocyter producera antikroppar som förstör patogenen. Med sjukdomen ökar antalet monocyter i det perifera blodet. I den septiska formen av listerios når deras antal 70% (med en norm på 3 - 11%).
Ris. 13. På bilden är monocyter de största cellerna i det perifera blodet.
För att diagnostisera listerios används ett intradermalt (allergiskt) test. Listeriaantigen administreras intradermalt. Efter 24 timmar studeras reaktionen. Om listeria finns i kroppen på den som testas, uppträder en papel (infiltrat) på 10 millimeter eller mer på huden vid platsen för införandet av listeriaantigenet.
Ett intradermalt test görs dag 6–9 från sjukdomsögonblicket.
Vid enstaka fall av listerios bör diagnosen av sjukdomen utföras med den bakteriologiska metoden och PCR-metoden.
